ПЕРЕЛІК ДИСЦИПЛІН:
  • Адміністративне право
  • Арбітражний процес
  • Архітектура
  • Астрологія
  • Астрономія
  • Банківська справа
  • Безпека життєдіяльності
  • Біографії
  • Біологія
  • Біологія і хімія
  • Ботаніка та сільське гос-во
  • Бухгалтерський облік і аудит
  • Валютні відносини
  • Ветеринарія
  • Військова кафедра
  • Географія
  • Геодезія
  • Геологія
  • Етика
  • Держава і право
  • Цивільне право і процес
  • Діловодство
  • Гроші та кредит
  • Природничі науки
  • Журналістика
  • Екологія
  • Видавнича справа та поліграфія
  • Інвестиції
  • Іноземна мова
  • Інформатика
  • Інформатика, програмування
  • Історичні особистості
  • Історія
  • Історія техніки
  • Кибернетика
  • Комунікації і зв'язок
  • Комп'ютерні науки
  • Косметологія
  • Короткий зміст творів
  • Криміналістика
  • Кримінологія
  • Криптология
  • Кулінарія
  • Культура і мистецтво
  • Культурологія
  • Російська література
  • Література і російська мова
  • Логіка
  • Логістика
  • Маркетинг
  • Математика
  • Медицина, здоров'я
  • Медичні науки
  • Міжнародне публічне право
  • Міжнародне приватне право
  • Міжнародні відносини
  • Менеджмент
  • Металургія
  • Москвоведение
  • Мовознавство
  • Музика
  • Муніципальне право
  • Податки, оподаткування
  •  
    Бесплатные рефераты
     

     

     

     

     

     

         
     
    Ефективність внутрішньовенної інфузії мезенхімальних стовбурових клітин кісткового мозку при експериментальному цирозі печінки
         

     

    Медицина, здоров'я

    Ефективність внутрішньовенної інфузії мезенхімальних стовбурових клітин кісткового мозку при експериментальному цирозі печінки

    Для лікування експериментального цирозу печінки раніше застосовували трансплантацію гепатоцитів [1] або методи генотерапіі - наприклад, введення гена HGF [2] або анти-TGF-beta-терапія [3].

    Останнім час з'явилися роботи зі стимуляції регенерації печінки методом трансплантації клітин кісткового мозку - гемопоетичних та/або мезенхімальних. З'ясовано, що це може здійснюватися як шляхом клітинного злиття донорських клітин з гепатоцитами, так і за допомогою прямої диференціювання.

    Є ряд робіт, які демонструють, що клітини кісткового мозку відіграють істотну роль у патогенезі цірротіческого процесу та фіброзу. Хоча думки вчених з цього приводу неоднозначні. Наприклад, показано, що при ушкодженні легенів, клітини кісткового мозку мігрують у вогнище, диференціюються в міофібробласти і беруть активну участь у освіту фіброзного рубця [5,6]. З іншого боку, при системному введенні мезенхімальних стовбурових клітин мишам з формується токсичним фіброзом легенів, показали диференціювання донорських клітин в легеневій епітелій, зменшення синтезу колагену та інтенсивності хронічного запалення [4].

    Аналогічні дані отримані і при вивченні ролі клітин кісткового мозку в розвитку цирозу печінки. Так, клінічна робота [7] демонструє пряму участь гемопоетичних клітин у патогенезі аутоімунного гепатиту з формуванням первинного біліарного цирозу. Недавнє дослідження [9], виконане на людському матеріалі, так ж вказує на виникнення міофібробластів в цірротіческой печінки з клітин кісткового мозку. Проте, робота [8] китайських дослідників демонструє диференціювання цих клітин в гепатоцити, але не в міофібробласти при розвитку експериментального цирозу.

    У новій роботі, опублікованій в Transplantation, автори виконували внутрішньовенну інфузію сінгенних мезенхімальних стовбурових клітин (МСК) мишам з формується токсичним цирозом печінки. Токсичний цироз моделювали введенням CCl-4 (чотирьоххлористого вуглецю). Сінгенние клітини кісткового мозку виділяли і виробляли негативний (видаляли позитивну популяцію) магнітний сортінг (MACS) по CD45 (+), GlyA (+), CD34 (+). Потім культивували домагаючись освіти одиничних (1 колонія на 1 лунку 96-ти ямкової плашки) пластик-адгезивних колоній. Перед транспланатціей клітини, виділені з колоній мали фенотип CD34, CD45, CD31, vWF, GlyA, CD11a, CD11b - негативні і Flk1 - позитивні. Подібний фенотип зберігався протягом 30 пасажів.

    трансгендерних клітинну трансплантацію виробляли внутрівено в дозі 1 мільйон через 1 тиждень від початку моделювання цирозу і негайно (в той же день) після введення токсину. Контрольні тварини отримували фіз. розчин.

    Через 5 тижнів після призначення токсину в групах з клітинною трансплантацією спостерігали engraftment і диференціювання введених клітин. Вони мали епітелій-подібну морфологію, несли Y-хромосому (донор - самець, реципієнт - самка) і експресувати альбумін. Подібні клітини не ідентифікувалися на більш ранніх терміни (2 тижні). Морфологічні ознаки цирозу-фіброзу були значно менше в групі негайної трансплантації, в порівнянні з відстроченою трансплантацією клітин (через тиждень) і контролем (фіз. розчин). Однак «Морфологічний регрес» цирозу спостерігався в цій групі лише через 5 тижнів від початку експерименту, а в більш ранній термін (2 тижні) між групами не було отримано ніяких достовірних відмінностей. У групах з клітинної трансплантацією було також виявлено зниження (але незначне) вмісту гідроксипроліну, як маркера посиленого синтезу колагену в цірротіческой печінки. У сироватці крові виявили значне зниження таких маркерів розвивається цирозу печінки як трансамінази (ALT), procollagen III-N-peptide і гіалуронової кислоти - в групі з негайною трансплантацією клітин. І тільки у цій же групі ідентифікували значне зниження рівня мРНК TGF-beta1 (трансформує чинника зростання), як одного з найважливіших маркерів фіброгенеза і синтезу колагену. З іншого боку не виявлялося ніякого впливу клітинної трансплантації на сироватковий загальний біллірубін.

    Таким чином, показано позитивний вплив flk трансплантації-1 (+) МСК кісткового мозку на уповільнення розвитку та регрес експериментального цирозу печінки. Однак сприятливий ефект трансплантації проявлявся тільки при негайному, але не відстроченому введення клітин після початку дії шкідливого фактора.

    Все-таки залишається неясним механізм дії введених клітин. Так, клітини були схожі на епітелій протоків, але синтезували альбумін. І чому саме Flk-1 (+) популяція як маркер МСК? Нагадаю, що Flk-1 є одним з рецепторів (тирозин-кіназовим) vascular endothelial growth factor (VEGF), а їх взаємодія обусласлівает запуск ангіогенезу [10,11]. Експресується, в основному на эндотелиоцитах і гематопоетіческіх прогеніторних клітинах [11]. Сортування клітин (ембріональних стовбурових [12] та кісткового мозку дорослих і фетусов [13]) по Flk-1 (+) здійснюється, як правило для отримання попередників судинного ендотелію та стимуляції ангіогенезу. І хоча в роботі для трансплантації застосовували очищену від гемопоетичних клітин Flk-1 (+) популяцію клітин, ні слова не було сказано про ангіогенезу в печінці.

    Список літератури

    1. Nagata H, et al. Treatment of cirrhosis and liver failure in rats by hepatocyte xenotransplantation. Gastroenterol 2003; 124; 2: 422-431

    2. Matsuno Y, et al. Hepatocyte growth factor gene transfer into the liver via the portal vein using electroporation attenuates rat liver cirrhosis. Gene Ther 2003; 10; 18: 1559-1566

    3. Arias M, et al. Adenoviral expression of a transforming growth factor-beta1 antisense mRNA is effective in preventing liver fibrosis in bile-duct ligated rats. BMC Gastroenterol 2003; 3; 1: 29

    4. Ortiz LA, et al. Mesenchymal stem cell engraftment in lung is enhanced in response to bleomycin exposure and ameliorates its fibrotic effects. PNAS 2003; 100: 8407

    5. Epperly MW, et al. Bone marrow origin of myofibroblasts in irradiation pulmonary fibrosis. Am J Respir Cell Mol Biol 2003; 29; 2: 213-224

    6. Hashimoto, et al. Bone marrow-derived progenitor cells in pulmonary fibrosis. J Clin Invest 2004; 113: 243-252

    7. Kyriakou DS, et al. Hemopoietic progenitor cells and bone marrow stromal cells in patients with autoimmune hepatitis type 1 and primary biliary cirrhosis. J Hepatol 2003; 39; 5: 679-685

    8. Zhan YT, et al. Differentiation of bone marrow stem cells in rat hepatic fibrogenesis environment. Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi 2003; 11; 11: 673-675

    9. Forbes S, et al. A significant proportion of myofibroblasts are of bone marrow origin in human liver fibrosis. Gastroenterol 2004; 126: 955-963

    10. Achen MG, et al. Vascular endothelial growth factor D (VEGF-D) is a ligand for the tyrosine kinases VEGF receptor 2 (Flk1) and VEGF receptor 3 (Flt4). PNAS 1998; 95; 2: 548-553

    11. Chiang MK, Flanagan JG. Interactions between the Flk-1 receptor, vascular endothelial growth factor, and cell surface proteoglycan identified with a soluble receptor reagent. Growth Factors 1995; 12; 1: 1-10

    12. Yamashita J, et al. Flk1-positive cells derived from embryonic stem cells serve as vascular progenitors. Nature 2000; 408; 6808: 92-96

    13. Fanga B, et al. Multipotency of Flk1 + CD34 - progenitors derived from human fetal bone marrow. J Lab Clin Med 2004; 143; 4

         
     
         
    Реферат Банк
     
    Рефераты
     
    Бесплатные рефераты
     

     

     

     

     

     

     

     
     
     
      Все права защищены. Reff.net.ua - українські реферати !