Державний Аграрний Університет Молдови

На правах рукопису

ЖOCAH Микола Степанович

УДК 619:619. 98-092:636.2-053.2

СТАН ПРИРОДНОГО резистентності та імунологічної реактивності у

новонароджених телят ПРИ колібактеріозу

16.00.03 - ветеринарна мікробіологія та вірусологія

Дисертація

на здобуття наукового ступеня доктора ветеринарних наук

Науковий консультант - Скутарі Іван Гаврилович, доктор-хабілітат ветеринарних наук, професор

Кишинів 1998

Зміст:

Список умовних скорочень ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... 6

ВСТУП 7

Розділ I ОГЛЯД ЛІТЕРАТУРИ 17

1.1. Короткі відомості про колібактеріозу телят 17

1.2. Специфічна імунологічна реактивність телят в постнатальний період 43

1.3. Неспецифічна імунологічна реактивність новонароджених телят

53

1.4. Отримання і застосування лактоглобулін 57

висновок 64

РОЗДІЛ 2 РЕЗУЛЬТАТИ ВЛАСНИХ ДОСЛІДЖЕНЬ 66

2.1. Матеріали та методи досліджень. 66

2.2. Вивчення специфічної імунологічної реактивності телят в постнатальний період. 89

2.2.1. Рівень імуноглобулінів у сироватці крові телят до прийому молозива і через 24 год після народження і взаємозв'язок між концентрацією імуноглобулінів і проявом синдрому порушення травлення. 90

2.2.2. Кількісна характеристика абсорбції колостральних імуноглобулінів новонародженими телятами. 94

2.2.3. Рівень колостральних імуноглобулінів у сироватці крові новонароджених телят через 6, 24 і 48 годин після народження.

100

2.2.4. Кількісне визначення колостральних імуноглобулінів у сироватці крові і в фецес неонатальних телят .. 102

2.2.5. Концентрація імуноглобулінів в сироватці крові і секреті молочної залози корів. 103

2.2.6. Зміст імуноглобулінів у сироватці крові корів і новонароджених телят. 105

2.2.7. Рівень антитіл проти О-антигенів Е. coli в нормальному коров'ячому молозиві, молоці і сироватці крові новонароджених телят .. 110

2.2.8. Рівень антитіл проти К-антигенів Е. coli в нормальному коров'ячому молозиві, молоці і в сироватці крові новонароджених телят. 120

2.2.9. Протективного механізм молозива при колібактеріозу новонароджених телят. 131

2.2.10. Фактори, що впливають на виживання новонароджених телят. 134

2.2.11. Клінічна оцінка ефективності вакцинації корів для профілактики колібактеріозу телят. 137

ВИСНОВКИ 145

РОЗДІЛ 3 ВИВЧЕННЯ НЕСПЕЦИФІЧНІ Імунологічна реактивність
Новонароджених телят 147

3.1. Біохімічний аналіз крові новонароджених телят. 147

3.2. Корекція кислотно-основного балансу при діареї неонатальних телят. 154

3.3. Зміна фагоцітарнихних показників у новонароджених телят в залежності від клінічного статусу. 158

3.4. Бактерицидна активність сироватки крові новонароджених телят.

171

3.5. Комплементарна активність сироватки крові новонароджених телят

178

3.6. Лізоцімная активність сироватки крові. 184

3.7. Пропердиновим активність сироватки крові. 189

ВИСНОВКИ 193

РОЗДІЛ 4 ЕФЕКТИВНІСТЬ ЛІКАРСЬКИХ ПРЕПАРАТІВ ПРИ колібактеріозу
Новонароджених телят 194

4.1. Ефективність застосування колостральной сироватки та лактоглобулін для корекції імунодефіциту неонатальних телят. 194

4.2. Ефективність лактоглобулін і ретинолу що застосовуються з метою корекції імунодефіциту новонароджених телят. 198

4.3. Застосування хлорпромазину і Т-активіну для лікування телят, хворих колібактеріозу. 203

ВИСНОВКИ 209

5. Обговорення результатів досліджень. 210

6. ВИСНОВКИ. 222

7. РЕКОМЕНДАЦІЇ ВИРОБНИЦТВУ. 228

СПИСОК умовних скорочень

АГТ - агглютінаціонний тестант - антіглобуліновий тестАТФ - аденозинтрифосфатднк - дезоксирибонуклеиновая кислотампа - м'ясо-пептони агарМПБ - м'ясо-пептони бульйонмппб - м'ясо-пептони печоночний бульйонра - реакція аглютинаціїРНК - рибонуклеїнова кислотарн - від'ємний логарифм концентрації водневих іонівсда - синдром дефіциту антитілtl - термолабільних фракція E. colits - термостабільна фракція E. coliфек-м - фотоелектрокаллоріметрцАМФ - циклічний 3'5 '- Аденозинмонофосфат

ВСТУП

Успішний розвиток тваринництва в чому залежить від спрямованоговирощування молодняка, що поєднує високу продуктивність з стійкістюорганізму до захворювань.

Результати численних досліджень стану природноїрезистентності організму сільськогосподарських тварин свідчить проте, що захисні сили є динамічним показником, і визначається якгенетичними особливостями організму, так і впливом різнихфакторів навколишнього середовища. Ця обставина дозволяє направлено впливатина формування та прояв захисних сил організму. Забезпечення тваринамсприятливих умов утримання, максимально відповідають біологічнимособливостей організму, що склалися в процесі еволюційного розвитку,сприяє більш швидкому формуванню і кращому прояву його захиснихсил. Разом з тим, несприятливий вплив навколишнього середовища призводить доослаблення стійкості організму, захисні сили його виявляютьсянедостатньо, що посилює небезпеку виникнення та поширенняінфекційних захворювань. Отже, інфекційні хвороби можутьвиникнути тільки в результаті порушення нормальної реактивності,ослаблення захисних властивостей організму.

На тлі порушення нормальної реактивності і ослаблення захисних властивостейорганізму виникають масові шлунково-кишкові захворювання новонародженихтварин, особливо телят. Серед них, колібактеріозу телят відноситься до числанайбільш широко поширених інфекційних хвороб молодняку іреєструється у всіх розвинених країнах світу, у тому числі в господарствах
Республіки Молдова.

Внаслідок цього, актуальність вивчення даного захворювання стала неменшою, а навпаки зросла. Це пов'язано з резистентністюентеротоксіческіх штамів Е. coli до більшості доступниххіміотерапевтичних засобів. Дана резистентність має внехромосомальнийхарактер, вона детермінується плазмідами (R) і в зв'язку з цим поступовоохоплює все більше число штамів ентеротоксіческіх і визначається, як
«Заразна комплексна резистентність до антибіотиків». Крім того,продукують ешеріхіями екзо-ендо-і ентеротоксин здатні впливатисамостійно, що ускладнює використання засобів специфічної захисту іпрофілактики. Дуже складне багатогранне і далеко не вивчене впливзбудника на імунну систему організму господаря призводить до вкрайнизькою його опірності.

Біологічна активність ентеротоксин проявляється у вигляді порушеннярівноваги між процесами секреції електролітів у кишечнику. Колонізаціяентеротоксіческіх штамів Е. coli за допомогою специфічних фімбріями вентероцита, дає можливість проникнення в них молекул ентеротоксин,які порушують стан рівноваги між обсягами електролітів,переміщуються з кровоносних судин в кишечник і в зворотному напрямку,це ж рівновага є результатом зростання секреції рідин епітеліємкишкових крипт і гальмування їх резорбції клітинами епітелію кишковихворсинок.

Таким чином, внаслідок продукування кишковою паличкою (Е. coli)ентеротоксин відбувається стимуляція аденілаткінази ентероцитів, щовикликає трансформацію АТФ в циклічний 3 ', 5'-Аденозинмонофосфат (АМФ).
Одночасно змінюється функція ентероцитів, які замість абсорбціїпоживних речовин, елімінує вільну воду та мінеральні речовини зклітини в кишечник, що призводить до різкого обезводнення і деструктивнимзмінам ворсинок епітелію [E. Salajka, 1980]. Отже, колонізаціяслизової кишечника патогенними Е. coli має основне значення длярозвитку хвороби. Смертельні результати в ході гострої форми колібактеріозу уновонароджених телят є наслідком суттєвих порушеньелектролітного рівноваги і дегідратації.

Актуальність теми. Зниження захворюваності та попередження загибелінародилися молодняку є однією з головних завдань, що стоять передветеринарної наукою і практикою.

Однією з головних причин, що гальмують повне збереження зароджуваногомолодняку - масові шлунково-кишкові захворювання новонароджених тварин,особливо телят. Ці захворювання мають широке поширення, завдаютьзначний економічний збиток і викликають великий відхід телят, якийскладає в країнах світу від 3,1 до 31,0%, а в колишньому СРСР середній відхідсеред хворих телят за ряд років склав 18-21% [Г. В. Гнатенко, 1968;
Л. К. Волинець, 1975; А. В. Драгомир, Е. А. Драгомир, A.Ф. Каришева, Ф. В.
Спатарь, 1985; А. А. Гутковський, 1989; Ю. С. Кабанков, С. Ф. Армаш, 1991].

Серед захворювань новонароджених телят колібактеріозу займає одне зпровідних місць. Він відноситься до числа гострих захворювань, що найчастішеперебігає з ознаками діареї, інтоксикації, септицемії, розладисерцево-судинної та центральної нервової системи. У виникненні,розвиток і кінець захворювання реактивність організму відіграє першоряднуроль [С. Н. Преображенський, Н. І. Блінов, Н. В. Єршова, Г. В. Вишинський,
1974, І. М. Архангельський, 1976; В. С. Бузлама, С. М. Сулейманов, В. Н.
Долгополов, Н. Н. Коновалов, М. Н. Рецкій, І. С. Толкачов, 1978; П. А.
Ємельяненко, 1979; Е. С. Коган, 1981; В. Я. Мозгіс, 1982; В. М. Асламов,
1983; М. А. Костина, 1984; R. Morar, 1985; А. Н. Голиков, 1989, І. М.
Карпуть, А. Г. Ульянов, 1990; Е. А. Маринин, Т. Т. Ворошилова, 1993; П. П.
Ігнатьєв, Г. Ч. Бондаренко, 1994; T. E. Besser, C. C. Gay, 1994; A. S.
Sheikh, P. S. Bradford, S. C. James, B. Patricia, B. F. Thomas, H. Richard,
D. Gregore, D. R. Lin, W. Bert, 1995; Д. Н. Масюк, 1997].

Захисні сили тварин є основними показниками, що забезпечуютьстійкість організму новонароджених телят до факторів зовнішнього середовища та їхтестування дозволяє визначати імунний статус.

Несприятливий вплив навколишнього середовища призводить до послабленнястійкості організму і посилює небезпеку виникнення ірозповсюдження різних захворювань, у тому числі інфекційних. У зв'язку зцим академік А. А. Богомолов відзначав, що інфекційні хвороби можутьвиникнути тільки в результаті порушення нормальної реактивності,ослаблення захисних властивостей організму [С. І. Плященко, В. Т. Сидоров, А. Ф.
Трофимов, 1990].

Незважаючи на те, що в профілактиці колібактеріозу телят досягнутіпевні успіхи, однак ця проблема ще далеко від свого повногорішення. Лікарські препарати, які використовуються з цією метою, не викликаютькорекцію імунного статусу. Крім того, реалізація існуючих способівпрофілактики колібактеріозу телят ускладнена через відсутність експрес -індикації К-антитіл у колостральной сироватці корів.

Вивчення імунологічної реактивності організму новонароджених телят,таким чином, набуває актуального значення для розуміння патогенезузахворювання, для раціональної патогенетичної терапії.

Зв'язок роботи з науковими програмами. Тема дисертаційної роботи булачастиною проблеми ветеринарної медицини Республіки Молдова «Розробкаметодів і засобів профілактики і боротьби з хворобами тварин ».

Мета роботи. Мета роботи полягає в експериментальному і теоретичномуобгрунтуванні неспецифічної та специфічної реактивності новонародженихтелят при колібактеріозу, розробці імунологічно обгрунтованихраціональних способів корекції імунного статусу та інгібуванняциклічного аденозинмонофосфату (Самро) за допомогою «анти-секреторногочинника ».

Для реалізації цієї мети ми поставили наступні завдання:

1. Визначити рівень антитіл проти О-та К-антигенів Е. coli в нормальному коров'ячому молозиві, молоці і в сироватці крові новонароджених телят.

2. Вивчити кількісну характеристику абсорбції колостральних імуноглобулінів класів G, М і А новонародженими телятами.

3. Виявити роль кислотно-основного балансу протягом інфекційного процесу при колібактеріозу телят.

4. Установити величину взаємозв'язку між показниками неспецифічної реактивності; (фагоцитарна реакція, бактерицидна, лізоцімная, комплементарна і пропердиновим активність) у здорових, хворих і полеглих новонароджених телят.

5. Розробити способи корекції імунного статусу новонароджених телят і інгібування циклічного аденозинмонофосфату (Самро) за допомогою

«антисекреторної фактора».

Наукова новизна отриманих результатів.
Новизна роботи полягає в тому, що вперше до вивчення захворюванняколібактеріозу телят виявлений новий, комплексний підхід. У результатікомплексно проведених досліджень вивчена специфічна і неспецифічнареактивність організму новонароджених телят.

Вперше вивчено рівень антитіл проти К-антигенів у нормальному коров'ячомумолозиві, молоці і в сироватці крові новонароджених телят.

Доведено, що клінічний статус новонароджених телят знаходиться в прямійзалежно від сироваткової концентрації імунних глобулінів та їхкатаболічних ефективності, збільшення рівня імуноглобулінів М і А всироватці крові клінічно здорових тварин в середньому в 5,7 і 3,4 рази, запорівняно з полеглими вказує на їх захисну функцію. Виявлено порушеннякислотно-лужної рівноваги при діареї неонатальних телят. Доведено, щосупутніми ацидозу були відхилення в рівнях сироваткових хлоридівнатрію, кальцію і калію. Застосування електролітного розчину коригувавзазначені аномалії.

Встановлено взаємозв'язок між фагоцитарних показниками і бактерицидноїактивністю сироватки крові, фагоцитарної між активністю та рівнемпропердіна, між рівнем пропердіна і лізоцімной активністю, міжрівнем комплементу і фагоцитарної активністю у здорових, хворих і полеглихтелят.

Обгрунтовані й випробувані лікарські препарати, що коректують імуннийстатус новонароджених телят і інгібуючі циклічний Аденозинмонофосфат
(Самро) за допомогою «анти-секреторного фактора».

Практична значимість отриманих результатів. На підставі результатівдосліджень визначено рівень антитіл проти О-та К-антигенів Е. coli.
Вивчено кількісна характеристика абсорбції колостральнихімуноглобулінів новонародженими телятами.

Матеріали подають інформацію про зміст імуноглобулінів G, M і А всироватці крові та у фекаліях телят хворих колібактеріозу, а також проекспрес методи для визначення імунного статусу новонароджених телят.

Для корекції імунного статусу випробуваний лактоглобулін спільно зретинолом. Випробуваний хлорпромазин спільно з Т-активіну для інгібуванняциклічного аденозинмонофосфату.

Результати досліджень дозволяють дати теоретично обгрунтованірекомендації щодо корекції специфічної реактивності організмуновонароджених телят, для розуміння патогенезу захворювання та дляраціональної патогенетичної терапії, так як у виникненні, розвитку ікінець захворювання реактивність організму відіграє першорядну роль.

Основні результати досліджень використовуються в навчальній і науково -дослідницькій роботі та в практичній діяльності ветеринарнихспеціалістів господарств Республіки Молдова.

Для ветеринарної наук і практики запропоновані:

I. Методичні рекомендації щодо застосування колостральной сироватки та лактоглобулін для корекції імунодефіциту неонатальних телят.

Схвалено науково-технічною радою Міністерства сільського господарства і продовольства Республіки Молдова. Видано:

Молдагроінформреклама, Кишинів, 1992.

II. Методичні рекомендації - Експрес-метод індикації антиген-аглютиніни проти К-антигену Е. coli в колостральной сироватці корів і в сироватці крові новонароджених телят. Схвалено Науково-технічною радою Міністерства сільського господарства і продовольства республіки Молдова, Кишинів, 1994.

Розроблено способи:

I. Корекція імунодефіциту неонатальних телят. (Brevet de inven? Ie, n 345), Republica Moldova.

II. Лікування телят хворих колібактеріозу (Brevet de inven? Ie, nr.

409), Republica Moldova.

III. Результати досліджень включені в тексти лекцій і реалізуються на лабораторно-практичних заняттях зі студентами ветеринарного й зооінженерному факультетів Державного аграрного університету Республіки Молдова.

Особистий внесок здобувача. Автором самостійно виконано весь обсягекспериментальних досліджень. Біохімічний аналіз крові проводили наугорської лабораторної установці «Контіфло».

Апробація результатів дисертації. Результати наукових дослідженьповідомлені і схвалені на який відбувся у жовтні 1972 р. в м. Москві Пленумівідділення ветеринарії ВАСГНІЛ по проблемі лікування та профілактики хворобмолоднякусільськогосподарських тварин; на науковій конференціїпрофесорсько-викладацького складу Одеського сільськогосподарськогоінституту (Одеса, 1974); на науковій конференції з питань підвищенняпродуктивності сільськогосподарських тварин в умовах Північного
Казахстану (Целіноград, 1976), на Республіканській науковій конференційпрофесорсько-викладацького складу і аспірантів Кишинівськогосільськогосподарського інституту ім. М. В. Фрунзе (Кишинів 1977); на 3-хконференціях професорсько-викладацького складу науково -дослідницької конференції Кишинівського сільськогосподарського інституту
(Кишинів, 1979, 1980, 1982); на Республіканській науково-виробничоїконференції (Кишинів, 1981); на Республіканської науково-практичноїконференції «Технічні проблеми продовольчої програми» (Кишинів,
1984); на Всесоюзній науково-виробничій конференції «Питанняінтенсифікації та науково-обгрунтованого ветеринарного обслуговуванняпромислового тваринництва »(Кишинів, 1987); на засіданнях Вченої радиветеринарного факультету Державного аграрного університету Республіки
Молдова. (1988-1998 рр. .).

Публікації. За матеріалами дисертації опубліковано 37 робіт у працях
ВАСГНІЛ, міжвузівських збірниках і республіканських виданнях, у тому числі 2підручника (навчальні посібники), 1 монографія, 29 наукових статей, 2 патенти, 1рацпропозиція, 2 методичні рекомендації.

Структура та обсяг дисертації. Дисертація викладена на 229 сторінкахмашинописного тексту і складається з вступу, огляду літератури, результатіввласних досліджень, обговорення отриманих результатів, висновків,рекомендацій виробництву, списку літератури і додатки. Робота містить
88 таблиць і 11 малюнків. Список літератури включає 410 джерел, у томучислі 212 іноземних.

Розділ I

ОГЛЯД ЛІТЕРАТУРИ

1.1. Короткі відомості про колібактеріозу телят

1.1.1. Історична довідка. Вчення про роль в патології новонародженихтелят кишкових паличок (Bact. сoli, пізніше названої Eschеrichia coli,
1939), виявлених Обіхом [C. О. Jensen, 1897], а пізніше ешерихії [Th.
Escherich, 1885] пройшло тривалу історію становлення.

Морські свинки та кролики після зараження кишковою паличкою гинуличерез кілька годин, а іноді через 2 дня, за наявності сильного проносу іпідвищеної температури [Th. Escherich, 1885]. Хвороботворні діюмікроба проявлялося як при інтраперітонеальном, так і при підшкірномузараженні.

Данська вчений C. O. Jensen, 1897 перший звернув увагу на кишковупаличку як на збудника проносів у новонароджених тварин. Йогодослідження дозволили припустити про аналогічної причини диспепсичнихрозладів у дітей.

За даними численних дослідників серед масових шлунково -кишкових захворювань новонароджених телят значну питому вагу займаютьінфекційні захворювання, з яких найбільше поширення має коли -інфекція [П. Алтухов, 1904; М. К. Апалев, 1908; Th. Smith, M. L. Orcutt,
1925; Ф. Гутіра, І. Марек, Р. Маннінгер, І. Сечі, 1961; Т. П. Руденко,
1963; О. С. Андрєєва, 1966; Д. Келмен, 1967; Е. П. Чиркова, 1968; Я. Е.
Коляков, С. С. Гітельсон, Л. С. Каврук, 1970; Л. Н. Головнев, 1970; S.
Craven, 1970; C. C. Gaу, 1971; H. Feу, 1972; T. Gossling, K. A. Mckaу,
1974; H. W. Moon, 1974; S. D. Acres, C. J. Laing, O. M. Radostis, 1975; А.
В. Голіков, А. С. Вовк, А. Т. Марчук, В. Т. Ширяєва, 1976; J. Tyler, 1976;
Л. К. Волинець, 1978; Г. Пашкявічус, 1978; Я. Е. Коляков, 1978; Ю. В.
Алексєєв, 1979; J. E. C. Bellamу, S. D. Acres, 1979; J. Hutchinoson, 1979;
H. W. Smith, M. B. Huggins, 1979; E. Salajka, 1980; М. А. Сидоров, 1981; H.
Feу, 1981; Дж. Х. Б. Рой, 1982; C. C. Gaу, S. M. Parish, T. C. McGuire,
1982; В. А. Алікаев, В. В. Матюшин, 1983; Г. В. Гнатенко, Л. Т. Тупица,
1984; М. А. Сидоров, 1984; В. А. Гушул, Л. А. Афанасьєв, Т. П. Мантрова,
1984; M. E. Amstutz, 1985; J. A. Morris, W. J. Sojka, 1985; В. Г. Зароза,
1985; І. І. Фельдман, 1985; Я. Антал, Р. Благо, Я. Булла, 1986; В. І.
Девлікамов, М. А. Сидоров, 1986; L. Okerman, 1987; M. M. Levine, 1987; К.
С. Ліванов, 1988; Г. Л. Дворкін, 1989; З. М. Бедоева, 1990; В. Г. Зароза,
1991; В. А. Ушкалов, 1992; Г. К. Волков, В. Д. Баранников, 1997;].

1.1.2. Збудник хвороби. Вивчення ентеропатогенних ролі кишковоїпалички для людини і тварин починається відразу ж після відкриття її
Обіхом Цит. по Jensen C. O., (1897), пізніше ешерихії [Th. Escherich, 1885]і, особливо Іенсеном [C. O. Jensen, 1897].

У 1897 році C. O. Jensen, 1897 зазначив, що в органах і кишечнику телят,полеглих від кривавого проносу, знаходиться велика кількість мікробів подібнихтим, які були відкриті ешерихії. Іенсен встановив, що достатньоновонародженому теляті дати разом з молоком 5-6 мл бульйону культури Е.coli, що виділена з трупів телят, полеглих від проносу, щоб викликатисмертельну хворобу.

Можливість ендогенного виникнення колібаціллеза у телят шляхомзгодовування їм креоліну, піоктаніна і формаліну, що викликали у телят гострийентерит і подальше проникнення Е. coli до загального ліжечокекспериментально підтвердив C. O. Jensen, 1905. З органів полеглих у цихвипадках тварин виділяли бактерії кишкової палички, здатні викликатизахворювання при пероральної дачі їх здоровим телятам без запровадженнядратівливих речовин. На цій підставі Іенсен вважав, що дизентерію,
«Білий пронос», може викликати будь-яка кишкова паличка, якщо з якихосьпричин різко знижується резистентність організму новонародженого. Іенсенпершим приготував спочатку моно валентну сироватку а потім полівалентноїгіперімунна колісиворотку і з успіхом її застосував для профілактики
«Білого проносу».

Думка Іенсена поділяли і російські дослідники [П. Алтухов, 1904; М.
К. Апалев, 1908].

Іенсен вказував, що загибель новонароджених телят, може бути як урезультаті септичній форми колібаціллеза, так і в результаті важкогогастроентериту з явищами інтоксикації, без проникнення збудника вкров'яне русло. Автор не виявив відмінності в культурально-біохімічнихвластивості у штамів, виділених від ганьблячи телят, і штамів, виробленавід здорових тварин того ж віку.

Кількісні та якісні співвідношення різних серогрупи Е. coli ввмісті кишечника мало чим різняться у хворих і здорових телят [W. J.
Sojka, 1971].

В даний час для диференціації ентеропатогенних штамів інепатогенних використовують класичний тест на ізольованих петлях кишечникакролика, порося, теля [E. Salajka, 1980].

Останнім часом опубліковано значну кількість робіт, в якихдокладно дається характеристика купьтурально-морфологічних та біохімічнихвластивостей Е. coli виділених від новонароджених телят, як хворих, так іздорових [C. O. Jensen, 1897; О. С. Андрєєва, 1966; Е. П. Чиркова, 1968; А.
Ф. Пілуй, В. А. Ленькова, В. В. Медведєв, 1974; L. L. Myers, P. A. Guinee,
1976; Я. Е. Коляков, 1978; Л. К. Волинець, 1978; J. Hutchinson, 1979; М. А.
Сидоров, 1980; S. Tzipori, 1981; H. Brade, C. Galanos, 1983; И. И. Тарасов,
1984; Б. М. Анохін, 1985; А. В. Драгомир., Е. А. Драгомир., А. Ф. Каришева,
Ф. В. Спатарь, 1985; І. І. Фельдман, 1985; В. Тілга, Н. Кампус, 1986; У.
Рііхікоскі, 1986; H. W. Ewing, 1986; М. А. Сидоров, 1987; Н. А. Соколова,
О. А. Полякова, Н. І. Євглевський, 1987; К. С. Ліванов, 1988; I. Blanco, E.
A. Gonzalez, S. Garcia, 1988; Н. Н. Жосан, 1989; А. А. Гутковський, 1989; B.
H. Janke, D. H. Francis, J. E. Collins, 1990; В. Г. Зароза, 1991; Ю. С.
Кабанков, С. Ф. Армаш, 1991; G. Galiero, M. Palladino, O. Lai, C. G.
Goffredi, 1995; А. В. Куликовський, А. М. Панін, В. В. Сосніна, 1997].

Згідно з останніми міжнародних класифікацій кишкових бактерій (9-евидання визначника бактерій Берги) рід Escherichia представлений однимвидом Escherichia coli, який у свою чергу ділиться на сіро -ферментативні типи.

Е. coli є бактерію або кокобактерію розміром 1-4мкм/0,4-0,6 мкм. Під впливом зовнішніх факторів ешерихії трансформуються вниткоподібні форми довжиною до 8-10 мкм. Суперечка не утворюють. Перітріхі, аледеякі штами не мають джгутиків (атріхі). Під впливом антибіотиківта інших чинників утворюються гранулярні форми (L-форма), представленісферичними елементами різної величини (5-20 мкм). Більшістьсеротипів, ізольованих від здорових тварин не утворюють капсулу.
Ізольовані серотипи від хворих тварин можуть бути яккапсулообразующімі (серотипи 08, 09 і 0101), так і не утворюють капсулу.

фарбуються всіма аніліновими фарбами. Грам-негативні.

Е. coli володіють віями (пили), які представляють рецептори,за допомогою яких відбувається абсорбція на бактеріальної клітці РНК -містять фагів, а також здійснюється проникнення РНК фага в мікробнуклітку. У процесі кон'югації через вії (пили), що виконують рольконьюгаціонного містка (каналу) відбувається передача ДНК від клітини донора доклітці реципієнту. Фімбріями (вії, пили) мають адгезивними властивостямиза допомогою яких ешерихії прикріплюються на епітеліальних клітинахтравного тракту.

Здатність Е. coli утворювати фімбріальние адгезіни визначають украпельної РА з моноспеціфіческімі антіадгезівнимі сироватками К99, F41,
Аtt25, 987Р, К88ав, К88ас, К88аd [О.А. Полякова, Н. І. Євглевський, Н. А.
Соколова, 1986; Ю. А. Маллахов, О. А. Тугаринов, М. К. Пирожков, Т. І.
Ісхакова, 1993].

Е. coli - аероб або факультативний анаероб. Оптимальна температуразростання 37,5 ° С, ріст і розмноження бактерій може відбуватися в межах 15 -
45 ° С, оптимум рН 7,0, але культивувати можливо і при значнихзміни рН середовища.

Культивують, як на звичайних (МПБ, МПА), так і на діфференцнально -днагностіческіх середовищах (Ендо, Левіна). У МПБ зростання ешерихій характеризуєтьсярівномірним помутнінням середовища без осаду або з утворенням незначногоосаду легко розбивається при струшуванні. У старих культурах утворюєтьсяіноді пристінкові кільце і дуже рідко плівка. Форму «R» бактерійпродукують культури утворюють, осад, а МПБ залишається майже прозорим.

На МПА форма «S» бактерій утворюють округлі колонії, злегка опуклі,непрозорі з рівними краями. Форма «R» представлена сухими колоніями,сплющеними, щільно прилягають до середовища з нерівними краями. Розмір колонійваріює в межах 2-10 мм.

На середовищі Ендо кишкова паличка росте у вигляді малиново-червоних колоній зметалевим блиском або без нього, а на середовищі Левіна (агар з еозином іметиленової синькою) у вигляді темно-фіолетових або чорних колоній.

Кишкова паличка не вимоглива до живильному середовищі і здатнарозмножуватися навіть у фізіологічному розчині хлориду натрію [Я. Е. Коляков,
С. С. Гітельсон, Л. С. Каврук, 1990].

1.1.3. Біохімічні властивості. Одним з провідних диференціальнихознак кишкової палички, що відрізняють її від бактерій інших родівсімейства Enterobacteracea є зброджування лактози з утвореннямкислота і газу [И. В. Голубєва, 1985].

Кишкова паличка здатна ферментувати багато цукру і багатоатомнихспирти, глюкозу, манітол, дульца, сахарозу, Арабіноза та ін, але, якправило, не змінює адоніта і інозиту. При зброджування вуглеводівутворюється піруват, що перетворюється на молочну, оцтову і мурашинукислоти. Глюкоза, лактоза, манітол зброджується з утворенням кислоти тагазу. Цукроза і дульца ферментують непостійно.

Кишкова паличка не засвоює цитрат, не розріджує желатину, виділяєіндол і не утворює сірководень, дає позитивну реакцію з метілротом інегативну Фогес-Проскауера (не утворює ацетілметілкарбінол),редукує нітрати в нітрити, непостійно декарбоксілірует лізин та орнітін.
Вона не володіє фенілаланіндезаміназой і цитохромоксидази, що єокислювальним ферментом. Не росте на середовищах з ціаністим калієм [H. Fey,
1972; А. А. Гутковський, Г. Л. Дворкін, 1989; В. Г. Зароза, 1991; Ю. С.
Кабанков, С. Ф. Армаш, 1991].

1.1.4. Антигенна структура. Диференціація патогенних Е. coli віднепатогенних стало можливим завдяки детальному вивченню антигенноїструктури бактерій роду Escherihia [Th. Smith, M. L. Orcutt, 1925; H.
Knipschildt, 1945; F. Kaufman, 1966; H. Fey, 1972; G. Orskov, F. Orskov,
1984; А. А. Гутковський, Г. Л. Дворкін, 1989; Ю. С. Кабанков, С. Ф. Армаш,
1991].

У 1948 році була опублікована перша класифікація Кауфмана-Кніпшільдта-
Велна, яка послужила підставою до міжнародної класифікації. [H. Fey,
1972].

Е. coli має складну антигенну структуру. Розрізняють соматичний О -антиген, поверхневий (оболончатий) К-антиген і жгутикових Н-антиген [H.
Knipschildt, 1945; F. Kaufman, 1966; H. Fey, 1972; G. Orskov, F. Orskov,
1984].

В даний час по О-антигену ешерихії підрозділяються на 180серогрупи, за К-антигену на 104 і по Н-антигену на 56 серогрупи.
Встановлено 18 фімбріальних адгезінов (пили-антигени) [В. Г. Зароза, 1988,
1991].

Соматичний О-антиген Е. coli термостабільний, резистентний донагрівання при 100 ° С протягом 2,5 ч. Він являє собоюполісахаріднопротеіноліпідний комплекс.

К-антиген має полісахаридних природу і складається з трьох компонентів,позначених буквами L, В, А. Для типізації культури по О-антигену їїпрогрівають при температурі від 100 до 121 ° С. L-і В-антигени володіютьсхожої термостабільність. Антигенна здатність штаму, що володіє По -антигеном не повністю руйнується при нагріванні при 100 ° С протягом 2,5ч. Більш сувора діфференцнація між L-і В-антигенами відбувається, коликультуру нагрівають при 121 ° С. А-антиген зберігає агглютінабільние іантигенні властивості після нагрівання культури при 100 ° С, але ці властивостівтрачаються при 121 ° С, через 2,5 год [Я. Е. Коляков, С. С. Гітельсон, Л.
С. Каврук, 1970; H. Fey, 1972; А. А. Гутковський, Г. Л. Дворкін, 1989; В. Г.
Зароза, 1991]

Штам Е. coli може володіти більш ніж одним типом К-антигену [G.
Orskov, F. Orskov, 1984].

жгутикових Н-антиген термолабільних, має антигенними іагглютіногеннимі властивостями при нагріванні до 60 ° С, ці властивостівтрачаються при 100 ° С. Хімічний склад антигену-Н білкової природи [Th.
Smith, M. L. Orcutt, 1925].

Адгезивні антигени Е. coli мають першорядне, значення, оскількивони дозволяють мікроорганізмам конкурувати з бактеріями коменсаламі припаразитування в організмі тварин.

Відомо 7 типів специфічних адгезивних антигенів: К99, К88, 987Р,
СFА1, СFА2 і F7, Аtt25 [В. Г. Зароза, 1988; А. М. Головко, 1997].

Адгезивні антиген К99 вперше описаний в 1975 р. він характерний длякишкових паличок, ентеропатогенних для телят і ягнят, за деякимиповідомленнями і для поросят, лошат, козенят [F. Orskov, G. Orskov, H. W.
Smith, W. J. Sojka, 1975; S. Tzipori, 1981].

У адгезивному антигену К99 залежно від іммунофоретіческой активностійого фракцій розрізняють аніонний і катіонний компоненти. Перший міститьсятільки в серотипу Е. coli ПРО9, О101, а друга в серотипу Е. coli ПРО8, ПРО9,
О20, О64, О101. Серотипи Е. coli з аніонних компонентом викликаєаглютинацію еритроцитів овець, морських свинок і коней, а з катіонамикомпонентом тільки еритроцитів коней.

При захворюванні телят діареєю Е. coli К99 звичайно заселяють медіальний ікаудальний сегменти тонкого кишечника. Ентеротоксігенние Е. coli з цимантигеном зазвичай викликають діарею в 1-2-денних телят і 1-4-денних ягнят
[H. W. Moon, S. C. Whipp, S. M. Skartvedt, 1976].

Адгезивні антиген К88 вперше описаний в 1961р. За іммунофоретіческойрухливості адгезивний антиген К88 має три варіанти: К88ав, К88ас і
К88ад. [C. J. Murray, 1987].

Е. coli з адгезивний антигеном К88 викликає у 71% випадків діарею вновонароджених поросят. [J. A. Morris, W. J. Sojka, 1985].

Адгезивні антигени 987Р і F41 вперше описані в 1977р. і в данийчас визнані ентеротоксігеннимі для поросят [B. Nagy, Gy. Nagy, 1982].
Характерна особливість культур Е. coli з адгезівпим антигеном 987Р --відсутність здатності агглютініровать еритроцити. Цей антиген непоєднується з К88, має більш вираженими, ніж К88 колонізує іадгезивними властивостями і зустрічається іноді у телят. Адгезивний антиген
F41 в окремих випадках у Е. coli може поєднуватися з адгезивний антигеном
К99 [J. A. Morris, W. J. Sojka, 1985].

Адгезивні антигени СFА1, СFА2, і F7 вперше описані в 1975 (СFА1, СFА2)і в 1980 - F7. Всі ці антигени характерні для кишкових паличок,ентеротоксігенних для людини. Дані типи адгезивних антигенівтермолабільних, володіють вираженою специфічністю, аглютинативна у людиниеритроцити крові групи А [S. Tzipori, 1981].

Адгезивні антигени Е. coli закодовані у плазміди, які відносятьсядо молекул ДНК (незалежно від хромосоми бактеріальної клітини) і володіютьздатність до реплікації. При схрещуванні бактерій-донорів з іншимиреципієнтами плазміди легко їм передаються тобто володіють трансмісивність
[М. А. Сидоров, М. А. Соколова, 1982; J. A. Morris, W. J. Sojka, 1985].

Взаємозв'язок адгезивних і соматичних антигенів. При діареї телятентеротоксігенние Е. coli з адгезивний антигеном К99 в 47% випадківвідносяться до О-групі 101, а в інших випадках до О-груп 64, 8, 9, 20.
При холероподобних захворюваннях дітей у ентеротоксігенних Е. coliадгезивний антиген СFА1 корелює з соматичним антигеном 78, а антиген
СFА2 з О-групами 6 і 8 [B. Nagy, Gy. Nagy, 1982]. При діареї поросятентеротоксігенние Е. coli з адгезивний антигенами К88, 987Р, К99присутні у Е. coli О-груп 9, 20, 141, 101, 149, причому Е. coli О101найчастіше синтезують антиген К99 [M. Awad-Masalmeh, H. W. Moon, P. L.
Runnels, R. A. Schneider, 1982].

1.1.5. Токсини. Незважаючи на численні дослідження в областівивчення біол?? гии кишкової палички, все ще не досить ясно, за рахунокяких саме властивостей патогенних серотипів Е. coli обумовлюється їхентеропатогенних і здатність, на відміну від непатогенних кишковихпаличок, викликати захворювання у новонароджених телят [Ю. П. Вертов, 1987].

Тому вивчення токсичних компонентів Е. coli має велике значенняв розшифровці патогенності кишкової палички.

Вже незабаром після відкриття кишкової палички окремі дослідникивідрізняли у даного мікроба наявність токсичних властивостей [P. H. Romer, H.
Much, 1906].

На підставі спостережень при зараженні культурою кишкової палички,встановлено наявність у даного мікроба двох типів токсичних речовин: 1)що викликають токсикоз і 2) що обумовлюють ентерит [А. І. Улендеев, В. І.
Оленін, О. Г. Тихонова, 1971; І. В. Голубєва, 1985; Ю. В. Езепчук, 1985].

Вперше присутність токсину в фільтрату бульйонні культур кишковоїпалички було відзначено А. Г. Радзінський [Д. Е. Біленький, 1932]; Йогоспостереження надалі підтвердив Д. М. L. Barber, 1978, якийвстановив, що кишкова паличка продукує дві токсину - екзотоксин,що з'являються в бульйон культури вже протягом першої доби росту іендотоксин, що накопичується в тих же культурах пізніше, в результатіаутолізу мікробних тел.

Токсичність добових фільтратів бульйонні культур зникла післяпрогрівання їх при 56 ° С протягом 30 хв [Д. Е. Біленький, 1932].
Прогрівання ж «старих» фільтратів (з 20-40 добових культур) при 56 ° С непризводило до втрати їх токсичності.

Більш детальне вивчення екзотоксинів Е. coli проводилося І. В.
Голубєвої, 1985. Автор досліджувала екзотоксини в фільтрату бульйоннікультур 130 штамів Е. coli. Нею були встановлені відмінності в антигенних іімуногенних властивості екзо-і ендотоксинів. Величина смертельної дозитермолабільних колітоксіна залежала від сили токсину кожного штаму,індивідуальної чутливості тварин і способу введення токсину.
Найбільш характерні патологоанатомічні зміни, що викликаютьсяекзотоксинів, автор виявила в нервових клітинах спинного мозку.

Наявність у Е. coli екзо-і ендотоксинів було підтверджено численнимивченими: [В. Л. Елин, 1957; Т. П. Руденко, 1963; О. С. Андрєєва, 1966; K.
Garson, E. Bull, 1970; А. І. Улендеев, 1971; H. Fey, 1971b; C. Wray, J. R.
Thomlinson, 1972; H. Fey, 1972; J. W. Boyd, J. R. Baker, A. Leyland,
1974; Л. К. Волинець, 1975; E. T. Anderson, L. S. Young, W. L. Hewitt, 1978;
Дж. Х. Б. Рой, 1982; J. Blanu, J. H. Parvu, O. Ivanciu, 1983; W. H. Ewing,
1986; А. А. Гутковський, Г. Л. Дворкін, 1989; Л. Сланіна, 1989; В. А.
Ушкалов, 1992].

ендотоксини Е. coli представлені полісахаридів-ліпідів-протеїновихкомплексом, асоціюється з О-антигеном, який інтегрований у кишковустінку і сома. Це основний токсин загальний для патогенних і апатогенних грам -негативних мікроорганізмів. Ендотоксіновий комплекс може бутиекстрагувати з бактерій в кількості 5-10% до якого входять:полісахариди 45-60%, ліпід А 5-15%, протеїн 15-20% і ліпіди 10% [Д. Е.
Бєлєнький, 1932; C. Wray, J. R. Thomlinson, 1972].

ендотоксини володіє важливим біологічним ефектом протягомінфекційного процесу, викликаного грам-негативними мікроорганізмами,імунотерапія та іммунопрофілакті