ПЕРЕЛІК ДИСЦИПЛІН:
  • Адміністративне право
  • Арбітражний процес
  • Архітектура
  • Астрологія
  • Астрономія
  • Банківська справа
  • Безпека життєдіяльності
  • Біографії
  • Біологія
  • Біологія і хімія
  • Ботаніка та сільське гос-во
  • Бухгалтерський облік і аудит
  • Валютні відносини
  • Ветеринарія
  • Військова кафедра
  • Географія
  • Геодезія
  • Геологія
  • Етика
  • Держава і право
  • Цивільне право і процес
  • Діловодство
  • Гроші та кредит
  • Природничі науки
  • Журналістика
  • Екологія
  • Видавнича справа та поліграфія
  • Інвестиції
  • Іноземна мова
  • Інформатика
  • Інформатика, програмування
  • Юрист по наследству
  • Історичні особистості
  • Історія
  • Історія техніки
  • Кибернетика
  • Комунікації і зв'язок
  • Комп'ютерні науки
  • Косметологія
  • Короткий зміст творів
  • Криміналістика
  • Кримінологія
  • Криптология
  • Кулінарія
  • Культура і мистецтво
  • Культурологія
  • Російська література
  • Література і російська мова
  • Логіка
  • Логістика
  • Маркетинг
  • Математика
  • Медицина, здоров'я
  • Медичні науки
  • Міжнародне публічне право
  • Міжнародне приватне право
  • Міжнародні відносини
  • Менеджмент
  • Металургія
  • Москвоведение
  • Мовознавство
  • Музика
  • Муніципальне право
  • Податки, оподаткування
  •  
    Бесплатные рефераты
     

     

     

     

     

     

         
     
    Хламідіоз. Методи визначення / діагностики
         

     

    Медицина, здоров'я


    | |
    | Хламідіозу - СУЧАСНІ ПІДХОДИ до діагностики та лікування |
    | Цітоскопіческіе методи виявлення хламідій |
    | При цітоскопіческом методі одночасно з пошуком |
    | цитоплазматичних клітин-включень Провачека враховується |
    | кількість лейкоцитів як показника запалення, а також |
    | додаткова інформація про наявність супутньої |
    | бактеріальної мікрофлори, дріжджоподібних грибів, трихомонад |
    | і т.п. |
    | Показання: Гостра фаза захворювання. |
    | Матеріалом для дослідження служать зіскрібки з уретри у |
    | чоловіків і уретри і/або цервікального каналу у жінок. |
    | Матеріал беруть спеціальними щіточками або ложечками |
    | Фолькмана. Виділення з цервікального каналу видаляються |
    | ватним тампоном. Щіточка вводиться в канал на 1-2 см, |
    | обертається 15 секунд. Соскобний матеріал розподіляється на |
    | предметному склі, висушується на повітрі і фіксується в |
    | метанолі або холодному ацетоні. Найбільш популярна забарвлення |
    | за Романовскому-Гимзе. Після забарвлення препарати |
    | проглядаються в світловому мікроскопі, використовуючи |
    | иммерсионное об'єктив (х90). При цьому цитоплазма клітин |
    | забарвлюється в блакитний колір, ядра в фіолетово-синій, |
    | цитоплазматичні включення визначаються у вигляді |
    | темно-синіх або рожевих мікроколоній на тлі блакитний |
    | цитоплазми. На стадії елементарних включення хламідій |
    | фарбуються у рожевий колір, на стадії елементарних тілець |
    |-в синій. |
    | Цітоскопіческій метод широко доступний, але ефективний лише |
    | при гострих формах інфекції, значно менш ефективний і |
    | інформативний при хронічних формах захворювання При |
    | урогенітальному хламідіозі частота виявлення тілець |
    | Провачека в зіскрібків уретри і цервікального каналу не |
    | перевищує 10-12%. Наявність цих тілець підтверджує діагноз |
    | хламідіозу, проте їх відсутність не виключає наявність |
    | інфекції. |
    | |
    | |
    | Пряма імунофлюоресценція (ПІФ) |
    | Цей метод передбачає пряме виявлення антигенів |
    | хламідій. При люмінесцентної мікроскопії включення хламідій |
    | визначаються у вигляді зеленої або жовто-зеленої флуоресценції |
    | включень на коричнево-помаранчевому тлі цитоплазми клітин |
    | Включення можуть мати зернисту гомогенну або змішану |
    | структуру. |
    | Показаннями для діагностики хламідійної інфекції цим |
    | методом є: |
    | 1.Острая фаза захворювання. |
    | 2.Хроніческая фаза захворювання |
    | 3 Встановлення етіології хронічного інфекційного |
    | процесу урогенітального тракту |
    | 4. Вагітність з обтяженим акушерським анамнезом |
    | 5. Безпліддя неясного генезу. |
    | Діагностична інформативність ПІФ пов'язана з тим, що з її |
    | допомогою виявляються не тільки корпускулярні, а й |
    | розчинні антигени хламідій Цей метод не залежить від |
    | можливої зміни тинкторіальних властивостей мікроорганізму |
    | у процесі захворювання та лікування. ПІФ-метод є |
    | найважливішим скринінгове методом діагностики урогенітального |
    | хламідіозу. Його чутливість і специфічність при |
    | використанні моноклональних антитіл становить |
    | відповідно 65-90% і 85-90%. При оцінці результатів |
    | слід враховувати, що тільки показники внутрішньоклітинної |
    | флуоресценції можуть оцінюватися як позитивний |
    | результату цього тесту при використанні поліклональних |
    | антихламідійний антитіл, при використанні моноклональних - |
    | результат вважають за наявності 10 ЕТ в полі зору. |
    | Соскобние препарати готують також, як і для |
    | цітоскопіческіх досліджень. |
    | Випускають діагностичні набори, які містять моноклональні |
    | антитіла для ПІФ, наступні фірми: Syva, Drfco, Kallastad, |
    | Bartrels, Boots celltech, California Integrated |
    | Diagnostics, Orion Diagnostica. Реагенти фірм Syva, Difco, |
    | Kallastad представляють собою мічені Фітц моноклональні |
    | антитіла до основного білка зовнішньої мембрани хламідій, а |
    | реагенти інших фірм - моноклональні антитіла до |
    | родоспеціфіческому хламідійної ліполісахаріду (ЛПС). В |
    | Росії ЗАТ "Ниармедик плюс" при НІІЕМ ім. Н.Ф. Гамалії РАМН |
    | випускає моноклональні антитіла до ЛПС хламідій, які |
    | успішно конкурують з продукцією іноземних фірм по |
    | якості продукції. Це набір "Хламоноскрін" для |
    | визначення моноклональних антитіл до родоспеціфіческому |
    | ліпополісахарідному антигену і набір "Хламоноскрін-2" для |
    | визначення моноклональних антитіл до видоспецифічні |
    | білкового антигену хламідій трахоматіс. Набори мають ФС |
    | 42-359598 і реєстраційне посвідчення МОЗ Росії |
    | 93/270/9. |
    | Моноклональні антитіла відрізняються один від одного по |
    | викликається яскравості світіння, постійності виявляються форм ЕТ |
    | і ступеня специфічності. Для діагностики хламідій цим |
    | методом необхідний люмінесцентний мікроскоп. |
    | У цілому, метод ПІФ відповідає критеріям високої |
    | чутливості і специфічності, але вимагає виконання |
    | досвідченим, компетентним лабораторним працівником. |
    | Висококваліфікована експертна оцінка методом ПІФ рідко |
    | буває доступною, тому середня чутливість його |
    | знижується. Метод недостатньо чутливий і для |
    | стабільного визначення малих кількостей ЕТ. До того ж |
    | неможливо перевірити і негативні результати, і, |
    | отже, виявити серед них хибнонегативні, що |
    | призводить до зниження чутливості. |
    | |
    | |
    | Імуноморфологічні методи |
    | Ці методи засновані на виявленні антигенних субстанцій |
    | хламідій в епітелії та інших тканинах шляхом обробки |
    | препаратів специфічними антитілами. Антитіла |
    | діагностичної антихламідійний сироватки з'єднані з |
    | будь-якої міткою - люмінесцирує (Фітц-антитіла) або |
    | ферментної (ензим-мічені антитіла). |
    | |
    | |
    | Непрямий метод іммунофлюресценцііі |
    | Непрямий метод іммунофлюресценціі застосовують у тих випадках, |
    | коли немає в наявності Фітц-кон'югату антихламідійний антитіл. |
    | У цих випадках приготований тим же методом, що і для ПІФ |
    | препарат з клінічних проб обробляють спочатку |
    | антихламідійний антитілами, отриманими шляхом імунізації |
    | хламідіями овець, кролів, мишей або інших тварин, а |
    | потім другий сироваткою, специфічною для виду тварини, |
    | яке було імунізовані хламідіями. Антитіла другу |
    | сироватки кон'югованих з Фітц. Показання до застосування та |
    | специфічність даного методу збігаються з ПІФ. |
    | |
    | |
    | Діагностика хламідій на культурі клітин МсСоу |
    | Одним з кращих, але в той же час найбільш трудомістким |
    | є метод діагностики хламідій шляхом ізоляції |
    | збудника на культурі клітин, оброблених різними |
    | антиметаболітів ( "золотий стандарт") Для цієї мети звичайно |
    | використовують чутливу культуру клітин, оброблену |
    | ціклогексімідом. Чутливість культурального методу за |
    | порівнянні з ПЛР становить 70-80%, але в той же час він |
    | перевершує молекулярно-біологічні методи діагностики по |
    | специфічності. У літературі описані випадки виявлення |
    | хламідій трахоматіс методом ПЛР при негативних |
    | результати культурального тесту і навпаки. |
    | Показаннями для діагностики хламідійної інфекції цим |
    | методом є: |
    | 1 Вагітність з обтяженим акушерським анамнезом. |
    | 2. Оцінка ефективності проведеного антибактеріального |
    | лікування. |
    | 3. Виявлення чутливості та резистентності до |
    | антибактеріальним |
    | препаратів. |
    | 4. Виявлення хламідій у ВІЛ-інфікованих або осіб з |
    | вторинними імунодефіцитними станами (онкологічні |
    | хворі після проведених курсів променевої та хіміотерапії, |
    | трансплантації кісткового мозку; особи, які отримують |
    | імунодепресанти; хворі на вірусний гепатит та |
    | туберкульоз). |
    | 5. Безпліддя неясного генезу. |
    | 6. Встановлення етіології хронічного інфекційного |
    | процесу урогенітального тракту. |
    | Культуральні посів є референс-методом при оцінці |
    | ефективності антибактеріальної лікування. При дослідженні |
    | біопроб методом ПЛР після курсу хіміотерапії в деяких |
    | випадках можна отримати "хибнопозитивні з клінічною |
    | точки зору "результати. Це пов'язано з тим, що неможливо |
    | однозначно оцінити життєздатність і патогенність |
    | мікробної клітини на підставі виявлення фрагменту її |
    | геному, використовуючи лише дані молекулярно-біологічних |
    | методів. У цьому випадку при дослідженні клінічного |
    | матеріалу за допомогою культурального посіву мікробні клітини, |
    | втратили ці важливі з клінічної точки зору властивості, |
    | не дадуть зростання в клітинній культурі. |
    | Для транспортування і зберігання клінічного матеріалу |
    | використовують спеціальну живильне середовище (транспортна |
    | середу). Вона розливається в пеніциліновий флакони по 1 мл і |
    | зберігається при температурі + 4 ° С (в загальній камері побутового |
    | холодильника) протягом 2-х місяців. Склад транспортної |
    | середовища: середа MEM з додаванням 10% сироватки великої |
    | рогатої худоби і антибіотика гентаміцину концентрації 50 |
    | мкг/мл. |
    | Клінічний матеріал після перенесення в транспортну середу |
    | зберігається в загальній камері холодильника при температурі + 4 ° |
    | З і, протягом двох діб повинен бути доставлений в |
    | лабораторію. |
    | Процедура посіву |
    | 1. Обробка одноденною клітинної культури МсСоу 1% |
    | розчином ДЕАЕ декстрану протягом 30 хвилин. |
    | 2. Зараження оброблених клітин матеріалом, отриманим від |
    | хворих. |
    | 3. Центрифугування заражених клітин при 2500 g протягом |
    | 45 хвилин. |
    | 4. Відмивання клітин живильним середовищем. |
    | 5. Додавання до клітин ростової середовища, що містить |
    | ціклогексімід. |
    | 6. Інкубації клітин протягом двох діб при 36 ° С. |
    | 7. Виявлення хламідій в клітинах методом прямої |
    | иммунофлюоресценции або ПЛР. |
    | Реальний термін отримання результатів цим методом - сім |
    | днів. |
    | |
    | В даний час в літературі зростає кількість повідомлень про |
    | випадках резистентності хламідій до антибактеріальних |
    | препаратів (еритроміцину, тетрацикліну, доксициклину, |
    | фторхінолонів). Цінність культурального методу полягає в |
    | те, що він є поки єдиним методом, який дозволяє |
    | вибрати антибактеріальний препарат для лікування хламідійної |
    | інфекції та оцінити ефективність антибактеріальної терапії. |
    | |
    | Схема методу виявлення стійкості хламідій трахоматіс к |
    | антибактеріальних препаратів |
    |-Хламідійним ізолятів, виділених від хворого при посіві, |
    | заражають чутливі клітини. |
    |-К заражених клітин додають ростові середу, що містить |
    | антибіотик. |
    |-Заражені клітини інкубують 5 днів при температурі + 36 ° |
    | С. |
    |-Хламідій Чутливість до антибіотика визначається за |
    | придушення інфекції в заражених клітинах. Процедура |
    | тривала, займає за часом два тижні. |
    | |
    | |
    | Діагностика Chlamydia trachomatis методом полімеразної |
    | ланцюгової реакції |
    | Дорожнеча, тривалість і трудомісткість |
    | мікробіологічного виділення хламідій у культурі |
    | істотно ускладнює використання цієї процедури в |
    | рутинної лабораторній діагностиці. В літературі накопичений |
    | великий клініко-лабораторний досвід з використання методу |
    | ПЛР для виявлення хламідій трахоматіс. Особлива увага при |
    | його використанні слід приділяти, без сумніву, питань |
    | правильної інтерпретації отриманих результатів. |
    | Екстремально високі показники чутливості і |
    | специфічності ПЛР роблять цю методику в чому |
    | революційної в лабораторній діагностиці. Основними |
    | мішенями при виявленні хламідій трахоматіс є |
    | нуклеотидних послідовність видоспецифічні |
    | кріптіческой плазміди, послідовність головного білка |
    | внутрішньої мембрани, рибосомальні гени. |
    | Ця реакція є багато разів повторюються |
    | цикли синтезу (ампліфікації) специфічної області |
    | ДНК-мішені у присутності термостабільної ДНК-полімерази, |
    | дезоксінуклеотідтріфосфатов, відповідного сольового |
    | буфера і олігонуклеотидних затравок-праймерів, що визначають |
    | кордону ампліфіціруемого ділянки. Кожен цикл складається з |
    | трьох стадій з різними температурними режимами. На першому |
    | стадії при 94 ° С відбувається розділення ланцюгів ДНК, потім |
    | при 56-58 ° С - приєднання (отжиг) праймерів к |
    | комплементарним послідовностей на ДНК-мішені, і при |
    | температурі 72 ° С протікає синтез нових ланцюгів ДНК шляхом |
    | добудовування ланцюгів праймерів в напрямку 5 '-3'. В |
    | кожному циклі відбувається подвоєння числа копій |
    | ампліфіціруемого ділянки, що дозволяє за 25-40 циклів |
    | напрацювати фрагмент ДНК, обмежений парою обраних |
    | праймерів, в кількості, достатній для її детекції з |
    | допомогою електрофорезу або альтернативними йому технологіями |
    | В порівнянні з широко застосовуються імунологічними |
    | тестами ПЛР-діагностика має низку переваг: |
    |-високою і регульованою специфічністю, обумовленої лише |
    | нуклеотидної послідовністю, яка застосовується в даній |
    | діагностичній системі; |
    |-високою чутливістю, що дозволяє діагносціровать не |
    | тільки гострі, але й латентні інфекції (можливе виявлення |
    | навіть поодиноких бактерій або вірусів); |
    |-хімічна схожість всіх нуклеїнових кислот дозволяє |
    | розробляти універсальні процедури для виявлення |
    | різних інфекційних агентів, |
    |-можливістю ідентифікації збудника протягом 4,5-5 |
    | годин. |
    | |
    | Доставка біоматеріалу в ПЛР-лабораторію проводиться в |
    | холодового термоконтейнери або термосі з льодом. Важливою |
    | відмінною рисою ПЛР-діагностики є |
    | відносно низька вартість обладнання для проведення |
    | аналізу, що поєднується з універсальністю методу, що |
    | дозволяє виявляти весь спектр клінічно актуальних |
    | інфекційних агентів. |
    | |
    | ПЛР-лабораторія повинна бути розділена на зони (кімнати). |
    | Слід мати не менше двох кімнат |
    |-пре-ПЛР-приміщення, де проводиться обробка клінічних |
    | зразків, виділення ДНК, приготування реакційної суміші |
    | для ПЛР і постановка ПЛР (при наявності умов два останніх |
    | етапу рекомендується також проводити в додатковому |
    | окремому приміщенні), у цих приміщеннях забороняється |
    | проводити всі інші види робіт з інфекційними агентами |
    | (мікробіологічний аналіз, ІФА, інші діагностичні |
    | тести), ПЛР-діагностика яких проводиться в даній |
    | лабораторії. |
    |-пост-ПЛР-приміщення, де проводиться детекция продуктів |
    | ампліфікації, в ПЛР-приміщенні допускається використовувати |
    | інші методи детекції інфекцій, діагностика яких |
    | проводиться в даній лабораторії. Кімнату детекції продуктів |
    | ампліфікації (пост-ПЛР-приміщення) слід розташовувати як |
    | якнайдалі від пре-ПЛР-приміщень. Слід виключити |
    | рух повітряного потоку з пост-ПЛР-приміщення в |
    | пре-ПЛР-приміщення. |
    | У кімнаті приготування реакційної суміші та в кімнаті |
    | обробки клінічних зразків повинні бути встановлені |
    | ультрафіолетові лампи, робочі поверхні в лабораторії |
    | повинні оброблятися дезінфікуючими розчинами. |
    | Показання для діагностики С. trachomatis методом ПЛР |
    | 1. Гостра фаза захворювання |
    | 2. Хронічна фаза захворювання |
    | 3. Встановлення етіології хронічного інфекційного |
    | процесу урогенітального тракту. |
    | 4. Вагітність з обтяженим акушерським анамнезом. 5 |
    | Безпліддя неясного генезу. |
    | 6. Контроль ефективності проведеного антибактеріального |
    | лікування. |
    | У разі виявлення фрагмента ДНК хламідії трахоматіс після |
    | курсу хіміотерапії слід провести культуральну |
    | діагностику для виключення "хибнопозитивні с |
    | клінічної точки зору результату ". Якщо проведення |
    | культуральній діагностики неможливо, то необхідно через |
    | 5-6 тижнів (повне оновлення епітеліального покриву |
    | сечостатевих шляхів) провести повторне дослідження методом |
    | ПЛР. |
    | 7. Виявлення хламідії у ВІЛ-інфікованих осіб, хворих |
    | туберкульозом, вірусним гепатитом і з вторинними |
    | імунодефіцитними стані (онкологічні хворі після |
    | курсів хіміо-і променевої терапії, трансплантації кісткового |
    | мозку, які отримують імуносупресивну терапію). |
    | У 1991 році компанія Хоффман-ла Рош ЛТД отримала від |
    | компанії Cetus права і патенти на використання ПЛР. У цьому |
    | ж році було створено Roche Molecular Systems, що займається |
    | виключно питаннями розвитку та вдосконалення ПЛР. В |
    | 1992 році були впроваджені перші стандартизовані |
    | тест-системи для клінічної ПЛР-діагностики AMPLICOR |
    | Chlamydia trachomatis, а в 1993 році розпочато виробництво |
    | цих тест систем. Численний?? ті проведені дослідження |
    | показали високу чутливість і специфічність даного |
    | набору. Це дозволило отримати даної тест-системи |
    | сертифікат Food and Drug Administration (FDA) в 1993 році. |
    | У 1995 році з'явився новий набір AMPLICOR Chlamydia |
    | trachomatis/Neisseria gonorrhoeae для одночасної їх |
    | детекції в одній пробірці. У тесті використані |
    | біотінілірованние праймери (СР24/СР27) з кріптіческой |
    | плазміди С. trachomatis. Чутливість тесту становить |
    | 10 копій/мл, специфічність 99,6%. Тест-система включає: |
    | набір для збору та транспортування зразків, набір для |
    | виділення ДНК із цервікальних, уретральних зразків і сечі, |
    | набір для ампліфікації і детекції. Всі набори |
    | стандартизовані, повністю готові до використання, мають |
    | внутрішній контроль, систему захисту від контамінації. |
    | Науково-виробничою фірмою "Літех" при НДІ |
    | фізико-хімічної медицини МОЗ РФ випускається набір |
    | реагентів "Полімік" у вигляді трьох окремих наборів для |
    | визначення відповідно Chlamydia trachomatis, |
    | Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealiticum. Кожен режим |
    | "Полімік" комплектується окремим набором для виділення ДНК |
    | з біопроб. Інструкція по застосуванню набору реагентів |
    | рекомендована до затвердження експертною комісією Комітету |
    | за нової медичної техніки МОЗ РФ (протокол No 3 від |
    | 18.03.96 р.) і затверджена Міністерством охорони здоров'я РФ |
    | 17.05.96 р. (ТУ 9398-405-17253567-96). |
    | До складу реакційної суміші набору "Полімік" входить |
    | внутрішній контроль (рекомбінантний плазміда, що містить |
    | фрагмент-вставку розміром 308 н.п.). Цей компонент |
    | дозволяє контролювати процес проходження реакції |
    | ампліфікації, а також тестувати наявність у пробах речовин, |
    | інгібують ПЛР. Смуга, що відповідає внутрішньому |
    | контролю, повинна виявлятися як в позитивному, так і в |
    | негативного контролю, так і в усіх тестованих пробах. |
    | При виділення ДНК із біопробах ( "Набір для виділення ДНК") |
    | використовується метод екстракції ДНК з клітин хламідій з |
    | допомогою гуанідинів тіоціанат та скріплення вивільняються |
    | нуклеїнових кислот з частками великопористі скла. Це |
    | дозволяє оптимізувати умови виділення і підготовки |
    | проб для ампліфікації, а також зменшити кількість |
    | маніпуляцій зі зразком. При цьому всі маніпуляції проводяться |
    | в одній пробірці. Вихід хромосомної ДНК становить 70-80% |
    | за результатами визначення числа колонієутворюючих одиниць |
    | клітин Acholeplasma laidlawii (штам мікоплазм, узятий в |
    | як стандарт) як у випадку чистої культури, так і при |
    | додаванні цих клітин до клінічного матеріалу, не |
    | містить визначених інфекційних агентів. |
    | Після завершення ПЛР продукти ампліфікації фракціоніруют |
    | методом електрофорезу в 1,5% агарозном гелі. |
    | Аналіз результатів діагностики |
    | 1. У позитивному контрольному зразку для хламідій |
    | виявляється смуга розміром 501 н.п. |
    | 2. У негативному контрольному зразку смуга, |
    | відповідна фрагментів геному хламідій, повинна |
    | відсутніми. Поява смуги в негативному контролі |
    | свідчить про контамінації компонентів набору. |
    | 3. У аналізованої пробі відсутність смуги строго на рівні |
    | відповідного контролю свідчить про відсутність |
    | збудника в пробі, наявність смуги, що відповідає за |
    | електрофоретичної рухливості позитивного контролю, |
    | свідчить про наявність хламідій у клінічній пробі. |
    | 4. У всіх зразках виявляється смуга оранжево-червоного |
    | кольору, що відповідає внутрішньому контролю розміром 308 |
    | н.п. Отримані результати можна документувати |
    | фотографуванням гелів з використанням помаранчевого або |
    | інтерференційного (594 нм) світлофільтру. При використанні |
    | відеосистеми "Gel-doc" можливо документування |
    | результатів електрофорезу у вигляді комп'ютерного файлу, |
    | доступного будь-яким додаткам "Windows". |
    | Набір "Полімік" слід зберігати при температурі - 18-20 ° С |
    | протягом усього терміну придатності (6 місяців). Допускається, |
    | зберігання і транспортування набору при температурі не вище 0 |
    | ° градусів не більше однієї доби. |
    | За станом на третій квартал 1999 МОЗ Росії |
    | крім набору "Полімік" дозволені наступні діагностичні |
    | набори для виявлення хламідій трахоматіс методом ПЛР в |
    | якості виробів медичного призначення: |
    | набір реагентів ампліфікаціонний для визначення ДНК |
    | хламідій (Хламідія-Амплі-тест) ТУ 9398-402-18137053-96 |
    | виробництва АТ "ВНЦМДЛ", Москва; |
    | набір реактивів для виявлення нуклеотидних |
    | послідовностей хламидия трахоматіс методом ПЛР (Хлам |
    | Ам) ТУ "9398-403-29032954-96 виробництва ЗАТ" Впровадження |
    | систем в медицину ". Москва, |
    | набір реагентів для виявлення ДНК хламідій трахоматіс |
    | методом ПЛР (Хлам-Ген) ТУ 9398-412-46482062-97 виробництва |
    | НПФ "ДНК-технологія", Москва. |
    | |
    | |
    | Переваги і недоліки різних методів виявлення Chlamydia |
    | trachomatis |
    | (Taylor-Robinson О., Thomas BJ, 1991, з доповненнями Говорун В.М, |
    | Бочкарьов Є.Г., Парфьонова Т.М., 1999) |
    | |
    | Характеристика/Метод |
    | ПІФ |
    | Культуральні посів |
    | ІФА-методи |
    | ПЛР |
    | |
    | Досліджуваний матеріал |
    | Будь-який |
    | Більшість |
    | Обмеження через неспецифічної реакцій |
    | Будь-який |
    | |
    | Значення правильно взятих проб |
    | Вирішальне |
    | Вирішальне |
    | Вирішальне |
    | Вирішальне |
    | |
    | Умови транспортування проб |
    | Якщо препарат фіксований-умови не важливі |
    | Швидка доставка чи зберігання при низькій температурі |
    | Не має значення, якщо проба взята в буфер |
    | Швидка доставка чи зберігання при низькій to менш важливо, ніж для |
    | культури клітин |
    | |
    | Умови зберігання |
    | На короткий час при +4 ° С тривало при -20 ° С |
    | 4 ° С - добу-дві. Трив зберігання в рідкому азоті |
    | 3 -5 днів при +4 ° С Заморожування знижує чутливість |
    | На короткий час + 4 ° С, два тижні - 20 ° С Тривалий час - в |
    | рідкому азоті |
    | |
    | Перевірка адекватності взяття матеріалу |
    | Мазки оцінюють під час тестування |
    | Не практикується |
    | Не практикується |
    | Визначається, чи присутній ДНК. |
    | |
    | Потреба в спеціальному обладнанні |
    | Люмінесцентний мікроскоп |
    | Центрифуга |
    | Комплект для ІФА |
    | Ампліфікатором й устаткування для електрофорезу |
    | |
    | Обробка проб |
    | Проста |
    | Трудомістке |
    | Стає простіше для нових тестів |
    | Вимагає суворої обережності, щоб не контаміновані ДНК |
    | |
    | Читання результатів |
    | Суб'єктивне і стомливе |
    | Суб'єктивне помірно стомлююче |
    | Об'єктивне, Просте |
    | Об'єктивне, просте |
    | |
    | Час виконання |
    | 30 хвилин |
    | 12-72 години |
    | 3 години |
    | 4,5-5 годин |
    | |
    | Способи перевірки результатів |
    | Повторний перегляд |
    | Повторний перегляд |
    | Повторення тесту |
    | Повторна проба або перетравлення ендоуклеазой |
    | |
    | Результат залежить від наступних причин: |
    | Досвіду мікроскопісту |
    | Чутливості клітинної культури |
    | Властивій потужності тесту |
    | Вимагає хорошого контролю та відсутністю контамінації |
    | |
    | Здатність до підтримки штаму |
    | Ні |
    | Да |
    | Ні |
    | Ні |
    | |
    | Використання як контролю ефективності лікування |
    | Обмежено |
    | Рекомендується |
    | Обмежено |
    | Рекомендується з обмеженнями |
    | |
    | |
    | |


         
     
         
    Реферат Банк
     
    Рефераты
     
    Бесплатные рефераты
     

     

     

     

     

     

     

     
     
     
      Все права защищены. Reff.net.ua - українські реферати ! DMCA.com Protection Status