Реакції лімфоцитів на механічні і осмотичні
впливу при водної депривації
М. З. Федорова, В.Н. Левін
Критеріями,
характеризують стан білих клітин крові є показники їх
функціональної активності та опірності різним чинникам. Причому,
остання властивість часто буває більш інформативним показником, тому що пригнічення
функцій може відбуватися при далеко зайшла деструкції клітин, що має
незворотного характеру [1]. Особливо важливе значення це положення має при
аналізі механізмів адаптації організму до екстремальних факторів середовища.
Метою
проведеного дослідження було вивчення реакцій лейкоцитів на механічні і
осмотичні впливу в умовах дегідратації організму.
МЕТОДИКА
Досліди
проведені на 48 безпородних білих щурах-самцях масою 370-420 г. Тварин
експериментальних груп позбавляли води при вільному доступі до сухого корму [4].
Оцінку осмотичній стійкості, осморегуляторних і деформаційних реакцій вели
на 3, 6 і 10 добу безводного змісту. Контролем служили інтактні тварини.
Для
досліджень використовували суспензію лейкоцитів у фізіологічному забуференном
розчині (розчин Дюльбекко), що складається на 95-98% з лімфоцитів. Осмотичну
стійкість, регуляторні можливості і мембранний резерв вивчали, використовуючи
комплексний метод, докладно описаний раніше [6]. Суть методу зводиться до
наступного. Лейкоцити поміщали в розчини хлориду натрію різної концентрації
(0,9%; 0,45%; 0,2%). Час експозиції в гіпотонічних розчинах становило 60
с і 1 ч. Дані щодо зміни морфометричних параметрів клітин після інкубації
в 0,45% розчині використовували для оцінки регуляторних можливостей. Мембранний
резерв визначали щодо змін площі поверхні лейкоцитів після
60-секундної інкубації в 0,2% розчині хлориду натрію. Розрахунки обсягу і площі
поверхні за стандартними формулами для кулястих тел вели на основі вимірювання
діаметра 50-60 клітин, фіксованих глутаровий альдегідів, поміщених на
предметне скло і забарвлених АЗУР-еозином. Осмотічскую стійкість висловлювали
числом (%) клітин що збереглися після годинної експозиції в 0,2% розчині
хлориду натрію.
Для
оцінки деформаційних властивостей за основу було взято методику Tran-Son-Tay R. з
співавт. [7]. Капіляри, діаметром 4 мкм заповнювали ізоосмотіческім буфером і
з'єднували з манометром. Переміщення клітин до капіляри і в капілярі
забезпечувалося постійним у всіх дослідах негативним тиском (100 мм рт.
ст.). Всі маніпуляції проводили в мікрокапілляре на предметному столику
мікроскопа. Для спостережень і вимірів використовували об'єктив 40 ВИ і
окуляр-мікрометр МОВ-1-15 *. Після реєстрації для кожної клітини первинних
параметрів (діаметр лейкоцитів у вихідному стані, довжина і ширина
деформованої клітини, час відновлення до початкової форми) розраховували
площу поверхні і об'єм що спочивають і деформованих лейкоцитів. Для
кожної тварини було обрахувало 40-60 клітин.
Всі
отримані дані оброблені статистично. Достовірність відмінностей опрделялась
за критерієм t Стьюдента.
Результати дослідження
Проведене
дослідження показало, що до 3-х діб дегідратації відбувалося істотне
зменшення розмірів лейкоцитів крові. Надалі (6-10 добу) за рахунок
включення регуляторних механізмів клітинний обсяг відновлювався до рівня
інтактних тварин (табл. 1).
Помірна
гіпоосмотіческая навантаження (60 з в 0,45% розчині хлориду натрію) призводила до
достовірного збільшення об'єму лімфоцитів у контрольних тварин, а також на 6
і 10-у добу безводного змісту (18
