Інфекційний гепатит (hepatitis infectiosa)

Інфекційний гепатит - гостра контагіозна вірусна хвороба, що протікає з лихоманкою, запальними процесами в дихальних шляхах, шлунково-кишковому тракті, некротичними змінами в паренхіматозних органах, особливо в печінці.

Етіологія

Припущення про вірусної природи хвороби вперше висловив в 30-х роках Каудрі, а Рубарт підтвердив це експериментально.

Вірус проходить через фільтри Зейтца ЄК, свічки Беркефельда і Шамберлана Ла і Лз і затримується колоїдними мембранами. Розміри його, за даними електронної мікроскопії, 55-96 нм. За морфологічними антигенних та фізико-хімічними властивостям вірус інфекційного гепатиту собак віднесений до обширної группи аденовірусів. Генетичну інформацію в ньому несе ДНК, вірусна капсула має кубічну симетрію і складається з 252 капсомеров, кожен капсомеров - з 5-6 і дрібніших субстанцій. Вірусні частки в культурі тканини клітин часто мають форму кристалічних скупчень, У складі вірусу не встановлено ліпідів. Вірус містить преципітуючих, гемагглютінірующій і комплементфіксірующій антигени. Біологічні властивості його схильні до великих змін. Зокрема, в процесі лабораторних пасажів вірус здатний змінювати патогенність для собак. Доведено однорідність штамів інфекційного вірусу гепатиту, виділених від природно заразилися гепатитом тварин різних видів. Вірус, виділений від собак, може викликати хворобу у песців, лисиць, єнотів, і навпаки, вірус, виділений від звірів, викликає гепатит у собак з характерними змінами в печінки і розладом її функцій.

зустрічаються в природі виділені штами гепатиту собак по культуральним, серологічні, біохімічним, фізичним, вірулентним і антигенних властивостях ідентичні вірусу гепатиту песців та лисиць.

Вірус стійкий до фізичних факторів. Виділений з органів, тканин та секретів хворих тварин, він зберігає активність кілька місяців. При заморожування, висушуванні, в 50%-му розчині гліцерину вірус не втрачає своїх вірулентних властивостей протягом 3-5 років. При температурі 37 ° С зберігається до 29 днів, при кімнатній температурі - 10-13 тиж., при 4 ° С - більше 9 міс. Висока температура діє на вірус згубно. Так, при 60-70 ° С він втрачає вірулентність в протягом 40-50 хв, при нагріванні до 100 ° С - за 1 хв. Нестійкий до формаліну, лізол, фенолу, свіжогашеним вапна, які инактивируют його протягом 30 хв. Виявляє виражену стійкість до ефіру, хлороформу, метанолу, антибіотиків і ультрафіолетових променів.

Епізоотологія

В природних умовах до інфекційного гепатиту сприйнятливі собаки всіх віків і порід. Хвороба реєструється також серед лисиць, песців, єнотів, вовків та тхорів.

Основний джерело інфекції - хворі собаки, що виділяють вірус з сечею, носової слизом, кон'юнктивальний секретом і калом.

Характерно тривалий вірусоносійство - протягом ряду років. Це підтверджується неодноразовими випадками занесення інфекції в благополучні господарства при закупівлі племінних самців і самок, до числа яких потрапили хронічні хворі.

Природний зараження відбувається через слизові оболонки носової і ротової порожнин, шлунково-кишковий тракт і статеві органи. Встановлені випадки розповсюдження хвороби при недотриманні правил асептики і антисептики під час хірургічних операцій, щеплень, взяття крові та ін

Ензоотія інфекційного гепатиту носить сезонний характер, але частіше спостерігається навесні і влітку при появі молодняку. Спорадично ж захворювання зустрічається у будь-який пору року, що пов'язано в основному з загостренням латентного або хронічного перебігу хвороби під впливом яких-небудь несприятливих умов.

При виникненні хвороби в собаководчих розплідниках протягом ензоотіі інфекційного гепатиту спостерігається певна послідовність. У початковому періоді розвитку ензоотіі відзначають одиничні випадки остропротекающей хвороби. У Надалі за відсутності необхідних ветеринарно-санітарних заходів ензоотія поширюється, захоплюючи в перші 2-3 тижнів. значна кількість собак і поступово затухаючи до кінця 2-3-го місяця. Така динаміка не строго постійна і залежить від епізоотичної обстановки, ступеня первинного охоплення поголів'я і тривалості ензоотіі.

Захворювання і летальність коливаються також в значних межах і залежать від стану опірності організму та умов утримання тварин.

За даними іноземної літератури, самки-вірусоносії протягом ряду років можуть заражати своїх цуценят, а також самців-виробників за умови тісного контакту з ними, особливо під час спаровування.

У перехворіли собак незалежно від тяжкості перенесеного інфекційного процесу настає тривалий, практично довічний імунітет. Антитіла з'являються на 15-21-й день і. досягають максимуму на 30-й день.

Симптоми

При природному зараженні інкубаційний період триває від 3 до 9 днів, іноді довше; при експериментальному зараженні - 6-8 днів.

Хвороба зазвичай починається з поступово наростаючою млявості: собаки стають малорухомими, більше лежать, важко встають, при русі хода хитка, знижується апетит, а потім вони відмовляються від корму. З'являються характерні ознаки гепатиту: блювота з домішкою жовчі, односторонні або двосторонні кератити і тонзиліт.

В надалі тварини швидко худнуть, у них розвивається анемія слизових оболонок очей і ротової порожнини, у деяких - желтушность склери. Сеча приймає темно-бурого забарвлення, що також часто є характерною ознакою гепатиту. Тварини болісно реагують на пальпацію в області печінки, стають ніби обережними у рухах. При цьому часто приймають позу сидячій собаки, широко розставивши передні лапи.

Особливої уваги при гепатиті заслуговує температурна реакція. У перші дні хвороби температура звичайно нормальна, але на 4-6-й день вона швидко підвищується до 41-41,7 ° С і тримається на такому рівні майже до загибелі тварини. У період лихоманки носове дзеркальце у собак сухе і вони відчувають підвищену спрагу. Відзначається розлад серцево-судинної системи: число серцевих ударів зростає до 90-110 за хвилину і вище, серцевий поштовх посилений, а пульс при тяжкому перебігу хвороби ослаблений, іноді аритмічний. Дихання прискорене до 40-50 в хвилину. При прослуховуванні легких чути хрипи.

Різко виражена лейкопенія (3-2 тис. лейкоцитів), що змінюються в період зниження температури значним лейкоцитозом (до 30-35 тис). Лейкоцитарна формула майже завжди зазнає закономірні зміни. У перші дні спостерігається відносне збільшення відсотка нейтрофілів зі зникненням еозинофілів і зрушенням вліво до юних, зниження відсотка лімфоцитів до 7-15, моноцитоз. Відзначається токсична зернистість нейтрофілів, у багатьох тварин у крові з'являються плазматичні клітини. У гострий період хвороби значно прискорюється ШОЕ - до 20-30 мм, рідше до 60 і досягає 70 - 80 мм протягом 24 ч.

Подібні зміни картини крові відображають стан організму тварини в ході його боротьби з інфекцією. Зменшення кількості лейкоцитів та еозинофілів, а також різко виражений зсув вліво - несприятливі показники, що свідчать про злоякісному перебігу хвороби. І навпаки, різке збільшення числа лейкоцитів і поява нормального числа еозинофілів свідчать про одужання тварини.

Тривалість хвороби різна - від кількох днів до 2-3 тижнів. Гинуть Cобаки, перебуваючи звичайно в глибокому коматозному стані і абсолютно не реагуючи на зовнішні роздратування. спостерігаються посмикування окремих груп м'язів, судоми і мимовільні рухи кінцівок.

При хронічному перебігу гепатиту у собак симптоми хвороби виражені неявно і носять невизначений характер. Іноді вони проявляються зниженням або тимчасовою втратою апетиту, розлади діяльності шлунково-кишкового тракту (проноси, змінюються запорами) і прогресуючим схуднення. Хронічного перебігу хвороби властиві рідкісні короткочасні підйоми температури тіла. Напади можуть бути різні як за інтенсивністю, так і за тривалістю загострення. Іноді спостерігається тяжкий перебіг хвороби. Ремісії між приступами лихоманки не мають особливої закономірності, температура підвищується з інтервалом у кілька днів, тижнів і навіть на місяць. Найчастіше напади лихоманки супроводжуються відхиленнями з боку серцево-судинної системи, різного ступеня анемій слизових оболонок, являніем гастроентериту.

Хронічно хворі самки найчастіше абортіруют або приносять нежиттєздатних щенят. У хроніків відзначають довго не проходять кератити одного або обох очей.

Патологоанатомічні зміни

В органах при інфекційному гепатиті собак вони надзвичайно різноманітні і залежать від тривалості і тяжкості хворобливого процесу.

При гострому перебігу хвороби трупи собак зазвичай мають задовільну вгодованість. При розтині знаходять поширений (іноді геморагічний) набряк підшкірної клітковини, зобної і підшлункової залоз. Характерним є набряк стінки жовчного міхура і його ложа.

Більше ніж у 40% випадків в черевній порожнині зустрічається прозорий желтобатий або кров'янистий ексудат, що має вигляд чистої крові. На вісцеральної очеревині кишечнику і на печінці можуть бути фібринозно-геморагічні накладення. Печінка збільшена, з виразним часточковий малюнком, в одних випадках темно-червона, повнокровна, в інших - світлого жовтувато-коричневого або яскравого охряно-жовтого кольору, іноді з дрібним нерівномірним крапом під капсулою і на поверхні розрізу.

Більше ніж у 90% випадків впадає в око значний драглисті набряк стінки жовчного міхура. Селезінка приблизно в 50% випадків збільшена і повнокровна. У шлунку зазвичай буває тільки слиз, нерідко темно-коричневого або майже чорного кольору. На слизовій оболонці шлунка можливі геморагії, іноді ерозії.

В кишечнику частіше знаходять незначні зміни, але іноді слизова оболонка тонкого і товстого відділів потовщена, вкрита великою кількістю слизу і множинними крововиливами.

Постійна ознака інфекційного гепатиту - драглисті набряк і повнокров'я вилочкової залози, в більшості випадків з множинними точковими крововиливами в ній. Навколо вилочкової залози прилеглі тканини сильну набряклість, набряк може поширюватися на шию, нижню поверхню грудей і середостіння.

Селезінка набрякла, вишнево-червоного кольору, кровенаполнена, пульпа на розрізі соковита, зішкребок рясний. Іноді вона буває не збільшена, червонувато-сірого або сірувато-малинового кольору.

Нирки здебільшого збільшені, капсула напружена. але знімається легко. Паренхіма пронизана точковими і полосчатим крововиливами. На розрізі малюнок згладжений, межа між кірковим і мозковим шарами згладжена. Часто бруньки бувають застійно гипереміровані, а мозковий шар їх темно-червоний.

Підшлункова залоза збільшена, кровенаполнена, сірувато-жовтого кольору. На поверхні точкові крововиливи, часто проникають в глиб тканини.

Ступінь зміни інших органів залежить від тривалості хвороби. Так, у серцево-судинної системи спостерігають серозний перикардит, в легенях -- ущільнення і окремі ділянки ателектазу, в головному мозку в окремих випадках може бути помітна гіперемія, зрідка точкові крово-виливу в області підкоркових вузлів і нижчих відділів стовбура.

При затяжних, хронічних течіях інфекційного гепатиту відзначають явища анемії і сильне виснаження тварин.

Дегенеративні зміни паренхіматозних органів виражені в самій різного ступеня у вигляді зернистого білкового і жирового переродження. В окремих випадках вони особливо різко виражені в серці, печінці, нирках і іноді в скелетних м'язах. Печінка збільшена, ущільнена зі своєрідним малюнком мускатного, жирова дистрофія виражена сильно.

Особливий інтерес при вірусному гепатиті собак представляють гістологічні зміни в печінки. Печінка при гострому перебігу хвороби кровенаполнена, великі судини її розширені. У просвітах кровоносних судин відзначається підвищене скупчення еритроцитів, серед них чимало ядерних елементів крові, а також клітин проліферуючих ендотелію, іноді згорнувся фібрин. Еритроцити і серозний випіт виявляються також в просвітах Діссе, в результаті нього виникає різке обрис часточкової малюнка.

Відзначають виражений периваскулярний набряк і геморагічну інфільтрацію. Структура печінкових балок в зоні ураження порушена. Більшість клітин збільшено, цитоплазма розріджена, містить. безліч різних за величиною крапель жиру. Окремі клітини зменшені, з ущільненої, різко ацидофільної цитоплазмою, пікнотіческім ядром. Відзначають також дифузні дистрофічні зміни печінкових клітин, аж до їх некрозу, головним чином у центральних та середніх зонах часточок.

При тривалому перебігу хвороби патологічні зміни зводяться до сильної або помірною дистрофії. При важких зміни тканину печінки недокрівної, поряд з вогнищевими некрозами бувають великі некрози з загибеллю значних ділянок паренхіми. Характер дегенеративних змін складається з паренхіматозного, зернистих-жирового переродження, нерідко з явищами клітинного розпаду. Поширеність та інтенсивність змін бувають неоднакові не тільки у різних хворих собак, але і в одного і того ж тварини в різних ділянках органу.

В селезінці і лімфатичних вузлах спостерігають повнокров'я і ретикулярну гіперплазію пульпи. Часто відзначають некробіотичні зміни в центрі фолікулів.

В нирках можна бачити повнокров'я клубочків, набухання клітин ендотелію капілярів клубочків. В ниркових канальцях помітні дистрофічні зміни ендотелію, який у більшості випадків набряклий, межі між клітинами згладжені.

В шлунку і тонкому відділі кишечника є крововиливи і вогнищеві некрози слизової оболонки.

В головному мозку відзначають ін'єкцію судин м'якої мозкової оболонки, в деяких випадках - діапедезні крововиливи. Іноді можна спостерігати круглоклітинна інфільтрацію м'якої мозкової оболонки, в нервових клітинах - важкі дистрофічні процеси, часто закінчуються лізисом нейронів.

При гістологічному дослідженні для інфекційного гепатиту характерні внутрішньоядерні включення типу Рубарта. Найчастіше вони зустрічаються в печінкових клітинах Купфера. в ендотелії судин, в ретикулярних клітинах всіх органів, особливо селезінки, нирок і лімфатичних вузлів. У більшості випадків внутрішньоядерні тільця можуть бути еозинофіли-ними або пофарбованими у нейтральний колір. Форма їх кругла або овальна. Структура гомогенна. Тим включенням і ядерної оболонкою, як правило, є оптично порожня зона, в якій у окремих клітин добре видно тонкі хроматіновие тяжі.

Для гістологічного дослідження при розтині тварин окремо з різних часток печінки беруть кілька шматочків товщиною не більше 1 см, які фіксують у 10 %-му нейтральному формаліні не менше 2-3 днів. Після фіксації зі шматочків вирізують пластинки товщиною 4-5 мм, ретельно відмивають їх проточною водою та на заморожуюче мікротому роблять гістологічні зрізи товщиною 6-7 мкм. Фарбують їх гематоксілінеозіном за загальноприйнятою методикою. Сформовані тільця Рубарта розташовуються найчастіше в центрі ядер печінкових клітин і мають розмір від 0,5 до 0,75 мкм. Спочатку вони оксифільні, пухкі, з розмитими нечіткими краями, а надалі базофільні, з чітко окресленими краями.

Діагноз

Інфекційний гепатит діагностують на підставі епізоотичних, клінічних та патологоанатомічних даних, а також вірусологічних досліджень і біопроб.

В як досліджуваного матеріалу у хворих собак в період гострого перебігу хвороби беруть сироватку крові, а в полеглих тварин - асцітную рідина або печінку. Суспензію з печінки готують загальноприйнятим методом і заражають чутливих тварин або культуру тканини, приготовану з нирок цуценят собак. Експериментально гепатит можна відтворити у собак, лисиць та песців, використавши для цієї мети тварин 4-6-місячного віку, попередньо перевірених на інфекційний гепатит.

Хвороба нед?? роізводітся закономірно і в типовій формі при зараженні в передню камеру очі або у вену. У заражених тварин симптоми хвороби проявляються на 6 - 7-й день.

В зараженій культурі тканини нирок собак вірус розмножується з характерними цитопатичної змінами: появою окремих округляється рефрактільних клітин, які поступово відриваються від скла. У міру розвитку інфекції число клітин, що зазнали дегенерації, збільшується і утворюються великі порожнечі в монослое. По краях збереглися острівців уражені клітини концентруються, утворюючи великі конгломерати, які нагадують грона винограду. Специфічність цитопатичної змін підтверджується в реакції нейтралізації. У культурі клітин після зараження через 20-30 год утворюються характерні внутрішньоядерні включення, які добре виявляються при фарбуванні препаратів або методом флюоресцирующим антитіл.

Реакція преципітації в гелі

Для діагностики інфекційно-ного гепатиту широко використовують реакцію преципітації в агарових гелі. Простота постановки реакції, її висока чутливість і сувора специфічність дозволяють поста-вити діагноз протягом 24-48 год, а також встановити антигенне спорідненість різних штамів.

Реакція може бути застосована для лабораторної діагно-стики у випадках остропротекающего захворювання, оскільки преципітуючих антиген виявляється у хворих тварин на 2-3-й день після зараження в різних органах і тканинах, а також для виявлення перенесеного раніше процесу, тому що антитіла у перехворіли собак можуть зберігатися кілька років.

Для постановки реакції преципітації вимагаються наступні компоненти: Тестуюча система, що складається з антигену вірусу інфекційного гепатиту собак, специфічної гіперімунна сироватки проти вірусного гепатиту, контрольного позитивного антигену, контрольного негативного антигену.

Механізм реакції в гелі полягає в наступному: що знаходяться роздільно в гелі антигени та антитіла дифундують один до одного, і на місці їхнього зіткнення (зустрічі) утворюється смужка преципітату, що вказує на позитивний результат.

В як випробуваного антигену використовують 10%-у суспензію печінки хворих тварин. Специфічну гіперімунна сироватку одержують шляхом імунізації собак або використовують імунну сироватку реконвалесцентів. Реакція проходить при температурі 37 ° С протягом 48-72 год Сироватку в лунки агару додають дрібно, через кожні 12 год

Реакція вважається позитивною, якщо між випробуваним антигеном і гіперімунна сироваткою в агарі з'являється смужка молочного кольору, за інтенсивністю виявлення рівна свідомо відомому антигену і гіперімунна контрольної сироватці. Тим нормальною сироваткою і антигеном смужок не повинно бути.

Нечітко виражені (розпливчасті) смужки преципітату розцінюються як сумнівна реакція, а утворення зон навколо лунок є неспецифічної реакцією.

Іммунолюмінесценція

Цим методом, застосовуючи непрямий метод люмінесцирує антитіл, можна виявити специфічний антиген в зрізах, мазках, відбитки, в зараженій культурі тканини. З цією метою на фіксований в охолодженому до 20 ° С ацетоні препарат наносять специфічну антисироватки собаки або гіперімунна сироватку коні в п'яти розведеннях від 1:10 до 1:160 і витримують у вологій камері при 20 ° С в протягом 20 хвилин, ще двічі по 10 хв промивають фізіологічним розчином і просушують. При позитивній люмінесценції в зоні ядра видно що світяться грудочки антигену в перші 24-48 ч. З розвитком внутрішньоядерних включений спостерігають флюоресцирующим світіння антигенних комплексів. Інтенсивність світіння оцінюється за четирехкрестовой системі. Специфічне смарагдово-зелене світіння зазвичай чітко контрастує на тлі слабкої флуоресценції цитоплазми клітин. Флюоресцирующим гранули зазвичай концентруються у великі гранулярні освіти, які в подальшому можна бачити як однорідну флюоресцирующим масу. Найчастіше флюоресцирующим маса концентрується в центрі ядра, відділяючись від ядерної оболонки нефлюоресцірующім обідком.

Широко в лабораторно-діагностичної роботи при діагностиці інфекційного гепатиту собак застосовується метод неспецифічної флуоресценції. З цією метою на нативний препарат під покривне скло наносять краплю акридину помаранчевого. Препарат негайно дивляться. Всередині-ядерні включення фарбуються на тлі зелено-жовтих ядер і оранжево-червоною протоплазми.

Лікування

Специфічного методу лікування інфекційного гепатиту собак немає. Оскільки при цієї хвороби в патологічний процес втягується в основному печінку, хворим собакам вводять вітаміни B1, B2, фолієву кислоту та ін Вітамін B12 рекомендується хворим тваринам вводити внутрішньом'язово протягом 4-5 днів, дорослим собакам по 400-500 мкг, молодим - по 250-300 мкг. Одночасно протягом 10-15 днів слід давати з кормом фолієву кислоту з розрахунку 0,05-0,06 мг на 1 кг маси тварини. Під час лікування собакам рекомендують також вводити в раціон вітамін C у дозі не менше 0,5 г, оскільки він сприяє глікогенізаціі печінки, підвищує її антитоксичну функцію, посилює регенерацію печінкових клітин. Тіамін і рибофлавін дають у дозі по 0,01 г, оскільки вони беруть участь у вуглеводному, жировому і білковому обмінах. Вітамін B12 в організмі знижує жирову інфільтрацію і сприяє підвищенню функціональної здатності печінки.

Часто використовують групу вітамінів. З цією метою в раціон включають комплекс вітамінів - Ундевіт або Пушнова.

Хороші результати дає специфічна сироватка від імунізованих собак або коней, яку вводять хворим у дозі 0,5-1 мл на 1 кг маси.

Профілактика і заходи боротьби

В випадку появи хвороби проводять загальні ветеринарно-санітарні заходи, в основу яких має бути покладений принцип комплексності: а) попередження заносу інфекції; б) своєчасне діагностування; в) проведення заходів, спрямованих на ліквідацію хвороби.

Одним з найважливіших профілактичних заходів є поголовне обстеження сироватки крові тварин на вірусний гепатит з реакції дифузної преципітації в агарових тілі.

Завозити собак необхідно тільки з благополучних по гепатиту розплідників, попередньо піддавши їх ретельному клінічному обстеженню. Попередження можливого перенесення інфекції забезпечується своєчасною ізоляцією хворих і підозрілих щодо захворювання собак, дезінфекцією клітин 10-15%-им розчином свіжогашеним вапна або 2%-им розчином їдкого натру, а також іншими дезінфікуючими засобами, які широко застосовуються у ветеринарній практиці.

Специфічна профілактика

Вакцину проти гепатиту готують в культурі клітин нирок собак, інактівіруя вірус формаліном. За кордоном для приготування живої вакцини використовують штам Федетіла і Емері, отриманий шляхом послідовного пасирування вірусу в культурі клітин нирки собаки і нирки ембріона свині. Продукція, що випускається вакцина безпечна для будь-якого віку тварин, викликає слабку реакцію і створює міцний тривалий імунітет.

Список літератури

Для підготовки даної роботи були використані матеріали з сайту http://www.zoosite.ru/