Міністерство освіти і науки України

Одеський Національний Університет ім. І. І. Мечникова

Біологічний факультет

Кафедра мікробіології, вірусології і імунології

"Біологічна характеристика збудників вірусних гепатитів трансфузійний"

Курсова робота студента IV курсу заочного відділення

Богуша Андрія Миколайовича

Науковий керівник

Доцент Панченко Микола Микитович

ОДЕСА - 2003

Зміст

Введення ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... 3

1. Огляд літератури ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... .... ... ... ... ... 5

1. Історична довідка ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... .... ... ... .-

2. Вірус гепатиту В ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... .. 6

1. Форми HBV, що зустрічаються в крові ... ... .. ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... -

2. Структура HBsAg ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... 7

3. Структура вірусних нуклеокапсид ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... .. 8

1. Природа HBeAg ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... 9

2. Роль HBxAg ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... .10

4. Фізична та генетична структура вірусної РНК ... ... ... ... ... ... -

5. Механізм реплікації вірусів ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... 11

6. Чутливість HBV до фізико - хімічним факторам ... ... ... .. 12

3. Вірус гепатиту D ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... 13

1. Шляхи передачі HDV ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ..-

4. Вірус гепатиту С ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... 15

1. Генетична неоднорідність HCV. ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... .-

2. Епідеміологія HCV ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... 16

3. Чутливість HCV до зовнішніх факторів ... ... ... ... ... ... ... ... ... 18

5. Вірус гепатиту G ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... 19

1. Епідеміологія HGV ... ... ... ... ... ... ... ... ... .. ... ... ... ... ... ... ... ... ... .. 20

6. Вірус гепатиту TTV ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... 21

1. Систематизація гепатиту TTV ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... .... ... ... 22

2. Аліментарне зараження TTV ... ... ... ... ... ... ... .. ... ... ... ... ... ... ... ..-

3. Взаємозв'язок гепатиту TTV з географічним регіоном ... ... ... .....-

4. Епідеміологія TTV ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... .23

5. Роль гепатиту TTV у розвитку гепатотропними інфекції ... ... ... ... .. 24

Висновок ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... .... .25

Список літератури ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... ... .26

Введення

Вірусні гепатити складають велику групу інфекційних захворюваньлюдини, що характеризуються симптомами загальної інтоксикації іпереважним ураженням печінки. Захворювання мають схожу клінічнукартину, але розрізняються етіологією, епідеміологією, патогенезом і результатами.
До збудників вірусних гепатитів відносять віруси різних таксономічнихгруп, усіх їх відрізняє здатність переважно викликати специфічніураження клітин печінки. В даний час виділяють вісім типівзбудників вірусного гепатиту, які з урахуванням епідеміологічнихособливостей можна умовно віднести до двох категорій. Вірусні гепатити зпарентеральними (кровяно - контакти) механізмом передачі (гепатити B, C,
D, G і ТТV) та гепатити з ентеральному (фекально - оральним) механізмомпередачі (гепатити А, Е і імовірно, F), передаються харчовим, воднимі контактним шляхами. Але думку експертів ВООЗ найбільшу небезпекупредставляють гепатити з парентеральним механізмом передачі, які частішевикликають хронічні процеси в печінці. Серед різноманітних етіологічнихфакторів хронічного гепатиту провідне значення мають віруси В, С і D.
Дослідженнями, проведеними в 1994 році Ивашкина В. Т., встановлено, що
64% хворих на хронічні захворювання печінки і 60,8% цирозів з'явилисяпрямим наслідком попереднього інфікування вірусами гепатитів В і С.
Хронічний процес може розвинутися після будь-якого відомого клінічноговаріанти гострих вірусних гепатитів, однак провідне значення у формуванніхронічної інфекції належить безжовтяничну, безсимптомним, інапаратнимформам і носія вірусів В і С. Привертають до формуванняхронічного гепатиту алкоголізм, зловживання деякими ліками,неповноцінне харчування [7,10].

В даний час, як ніколи раніше стоїть проблема посттрансфузійнихгепатитів і Служби крові. Істотне зниження якості життя в Україні,ослаблення державної підтримки донорства та роботи з населеннямпризвели до скорочення числа донорів і до стійкої тенденції в бікзбільшення платних добровольців, а також до загального збільшення вікудонорів і до практики найму донорів, які видаються за родичів. Наслідкомданій ситуації є те, що сьогодні ні одна людина під чассерйозного хірургічного втручання не застрахований від зараженнягепатитом. Виходом з подібної проблеми може служити: розробка нових,більш ефективних і доступних методів серодіагностики, удосконаленняколишніх і створення нових генетично модифікованих вакцинних препаратіві, звичайно ж, абсолютно протилежний підхід до донорства.

З огляду на усю викладену вище інформацію, дану тему вважаю актуальноюі такою, що заслуговує подальшого розвитку.

Метою цієї роботи було ознайомлення з даними вітчизняних ізарубіжних авторів про біологічні властивості, механізми патогенезу вірусів
- Збудників парентеральних гепатитів.

1. Огляд літератури

1. Історична довідка

С. П. Боткін в 1888 р. вперше висловив припущення про інфекційнуприроді «катаральної жовтухи» людини. Вірусна природа хвороби буладоведена в 1937 р. у США Дж. Фінделем і Ф. Мак Коллюмом. Це відкриттяпідтвердили П. Г. Сергєєв і Е. Тареев, в 1940 р. при вивченні жовтяниці вщеплених проти лихоманки Паппатачі. У 1965 р. В. Блюмберг виділив такзваний «австралійський антиген», що виявився поверхневим антигеномвірусу гепатиту В (HBsAq), а в 1970 р. - Д. Дейн виявив вірус гепатиту В вкрові і клітин печінки. У 1973 р. З Фейнстоуну у фекаліях хворого вдалосяідентифікувати збудник гепатиту А. У 1977 р. М. Різетто відкрив вірус
- Паразит D (дельта - вірус), що викликає дельта інфекцію тільки за наявностіу хворого HBsAq.

Наприкінці 80-х років групі американських фахівців вдалося виділити іідентифікувати геном вірусу С і в 1989 р. розробити тест-систему ІФА.
На вірус гепатиту Е перша в 1980 р. звернув увагу М. Гуро, а в 1982 р.
С. С. Балаян, який мав напруженим імунітетом до ВГА заразив себематеріалом, отриманим від дев'яти хворих повторно захворілих на віруснийгепатитом (перша гепатит у них був пов'язаний з ВГА), і захворів. Так,експериментально було доведено існування етіологічно самостійногозбудника, який остаточно був ідентифікований у 1987 р. Вірусгепатиту G був виділений в 1995 р. науковою групою фірми "Abbot" від хворогохронічний гепатит С. Останнім вірусом, який отримав науковукласифікацію на сьогоднішній день, є збудник гепатиту ТТ,який у 1997 р. виявили японські дослідники [10].

Вірус гепатиту F зараз є предметом дискусій і суперечок міжвченими.

2. Вірус гепатиту В.

HBV поширений по всьому світу. Чи є найпоширенішимпочатком хронічних захворювань печінки, у тому числі гепатоцеллюмернойкарциноми у людини [4].

Відкриттю HBV передувало виявлення в 1965 році в кровіавстралійського аборигена так званого австралійського антигену,що представляє собою поверхневі капсидних білки вірусу гепатиту Влюдини. Пізнішими дослідженнями було встановлено аналогічні віруси іу тварин (бабаків, земляних і лісових білок, кенгуру, чапель, пекінськихкачок, гримучих змій). HBV в останні роки віднесено до сімейства -
Hepadnaviridae [6].

1.2.1 Форми HBV, що зустрічаються в крові.

Поверхневий антиген HBV (HBsAg) був відкритий в 1963 році придослідженні поліморфізму сироваткових білків людини [10,15].

Першими корпускулярним формами HBsAg, які встановила електроннамікроскопія були невеликі сферичні частки, діаметром від 16 до 25 нм,названі надалі (22 нм) частками, а також ниткоподібні іпаличковидну частинки, які мають 22 нм у ширину і кілька сотеньнанометрів у довжину. Вони складаються з білка, вуглеводів і ліпідів, не містять
ДНК і зараз розглядаються як неповна форма оболонкового білка вірусу
[1].

У 1970 році Дейн описав велику більш складну частку, яка містить
HBsAg. Вона являє собою повний віріон HBV, діаметром 42 нм, маєліпідосодержащій зовнішній шар (оболонку) товщиною 7 нм і електроноплотнуюсферичну внутрішню серцевину (нуклеокапсид) діаметром 28 нм.
Поверхня віріона має антигенні детермінанти HBsAg, спільні з неповнимиформами вірусу. Зовнішня оболонка віддаляється обробкою неіоннихдетергенамі, такими як NP-40, після чого залишаються серцевинні частинки,містять HBсAg, хімічно відрізняються від HBsAg. Серцевина вірусумістить також вірусну ДНК з ковалентно приєднаним поліпептидом,протеїн і третій антиген, асоційований з інфекційно HBV -
(HBeAg), присутній в прихованій формі [5,15].

Введення шимпанзе 1 мл деяких нерозведений HBsAg реактивнихсироваток, отриманих від хворих з хронічними HBV, після антивірусноготерапії, не викликало у них інфекції. Висновок: у таких хворих HBsAgциркулює тільки в складі неповних часток, але не в складі повнихвіріонів. Однак, сироватки деяких хворих були заразні в розведеннях 10 -
7 [2,12].

1.2.2 Структура HBsAg.

Це складний антигенний комплекс. У цих частках може визначаться п'ятьантигенних детермінант.

Группоспеціфіческая детермінанта а - спільна для всіх препаратів HBsAg.
Ще є дві пари подтіпових детермінант: d або y, або w, або r --взаємовиключні один одного. Описано антигенна гетерогенність w --детермінант і додаткові детермінанти, такі як q або x або g [15,7].
Ідентифіковано 8 підтипів HBsAg: ayw1, ayw2, ayw3, ayw4, ayr, adw2, adw4,adr [11]. Незвичайні комбінації підтипів детермінант виділяються на Далекому
Сході. Спостерігається нерівномірний географічний розподіл підтипів
HBsAg серед зараженого населення. У Північній Америці, Європі та Африціпереважають підтипи adw і ayw, а в Південно - Східній Азії і на Далекому
Сході - підтип adr на ряду з adw і ayw. Підтип ayr менш поширений всвіті, але він ідентифікований у декількох ізольованих груп населення
Океанії [15,3].

Доведено, що вірус - специфічним антигеном є HBsAg,імунізація яким забезпечує захист від HBV.

Для визначення х/с HBsAg сферичні ниткоподібні частки можна очиститигельфільтарціей, швидкісним зональним центрифугуванням в градієнтіщільності CsCl. При центрифугування в градієнті щільності CsCl цічастинки відділяються від вірусу завдяки відмінностей в їх плавучих щільностях.
Плавуча щільність (22 нм) - сферичних частинок підтипів adw і ayw дорівнює
1,20 г/см3 в CsCl і 1,17 г/см3 в сахарозі. Це свідчить прозначному вмісті в них ліпідів приблизно 30%. Вищаплавучу щільність повних віріонів приблизно 1,28 г/см3 для віріонів знуклеокапсид, що містить ДНК і 1,24 г/см3 для віріонів з порожньоюсерцевиною, відображає внесок нуклеїнової кислоти в нуклеокапсид. Ліпіднийаналіз дає суміш ліпідів [5,7,3,15].

Середня молекулярна маса HBsAg/adw дорівнює 3,7 * 106 - 4,6 * 106. приізоелектричної фокусуванні препаратів (22 нм) - частинок HBsAg виявляєтьсядекілька популяцій з різними значеннями pI від 3,65 до 5,3. Середнійкоефіцієнт сідіментаціі для HBsAg варіює від 39 S до 54 S. Визначеннясереднього питомого коефіцієнта екстинкції 1% розчину очищеного білка HBsAgпри 280 нм лежить в межах від 37,3 до 60,0 [13].

Методом електорофореза в ДСС - ПААГ в очищених препаратах (22 нм) --частинок HBsAg adw -, ayw - і adr - підтипів виділено 7 або більшеполіпептидів з молекулярною масою від 25000 до 100000. У зв'язку з тим, щозовнішня оболонка віріонів HBV містить HBsAg і ліпіди (частково взяті вклітини господаря), припустили, що вона хімічно схожа на 22 нм частку
HBsAg [5,7,15].

1.2.3 Структура вірусних нуклеокапсид.

Серцевина віріона несе серцевинних антиген HBV (HBcAg), якийвиявлений у крові, як внутрішній компонент віріона. Він іноді визначаєтьсяв сироватці в ранній період віремії до появи антитіл до HBсAg.
Дослідження показали, що значна фракція HBсAg - частинок, виділенихз віріонів і менша фракція їх виділена із зараженої печінки, маєвисоку плавучу щільність в CsCl (1,38 г/см3) і містить ДНК і ДНК --полімеразну активність [1,13,15]. Встановлено, що високоочищенісерцевини, отримані з віріонів і HBсAg - частки, виділені з печінки,містять кілька унікальних поліпептидів від 19 до до 38 к. Поліпептиди 19 доможе реагувати з антитілами е - антигену HBV (анти - HBe) [14,15].

1.2.3.1 Природа HBeAg

ідентифікований в 1972 році; фізично і антигенно відрізняється від HBsAgі HBсAg, важко піддається очищенню, являє собою комплекс антигенів. Уогаровом гелі дається до 3 ліній преципітації: е1, е2, е3. в сироваткаххворих HBV визначаються як зв'язується з (IgG) HBсAg з молекулярноюмасою 300 до, так і менший «вільний» HBeAg з молекулярною масою 30 - 35к. Вільна форма здатна до дисоціації на менші поліпептиди змолекулярною масою 15,5 к. Особливо слід зазначити, виражену кореляціюприсутності HBeAg в сироватці хворих з високою концентрацією фізичнихвірусних частинок. Є дані, що HBeAg і віріони продукуються разом підчас інфекції, крім цього відомо, що HBeAg є компонентомвіріона, з якої активно вивільняється при руйнуванні її детергентом
[5,15].

Інформація про HBeAg закладена в С - гені. Численні факти,отримані при вивченні HBV дозволили зробити висновок про зв'язок HBeAg зінфекційного та наявністю вірусу. Виявилося, що інфекційні сироватоккрові з HBeAg в мільйон разів вище, ніж з анти - Hbe. Проте, цей зв'язок неабсолютна. Виявлено мутантні форми HBV, при яких блокується синтез
HBeAg. При цьому, не дивлячись на наявність анти - Hbe в сироватці крові вдаєтьсятестувати ДНК - HBV. Дослідження останніх років, пов'язані з вивченняммутантних форм HBV, дозволили по-новому поглянути на значення HBeAg впатогенезі HBV. Припускають, що у матерів носіїв HBV HBeAg, проходячичерез плаценту, викликає розвиток імунної толерантності, що приводить допрогресування у хронічний гепатит [7,15].

1.2.3.2 Роль HBxAg

Вважають, що х - антиген є як регуляторним білком, що підсилюєсинтез вірусних білків, так і можливо, білком, включеним в структуру HBV.
HBxAg відіграє особливу роль у розвитку первинної гепатоклітинна карциноми. Р
- Ген, ДНК - полімерази - фермент, інформація про якого закладена в ДНК HBV.
Він має ферментативної активністю як РНК - залежна ДНК - полімеразаі необхідний для добудови внутрішньої короткої ланцюга ДНК HBV в процесі їїреплікації [13,15].

1.2.4 Фізична та генетична структура вірусної ДНК.

віріони HBV мають маленьку кільцеву, частково дволанцюжкові молекулу
ДНК. Одноланцюжкові ділянки варіюють по довжині, складаючи в різнихмолекулах від (15 до 60%. Таким чином, ДНК складається з довгого ланцюга Lпостійної довжини ((3220 підстав) у всіх молекулах і короткою (S),яка в різних молекулах варіює у довжину від 1700 до 2800 підстав.
ДНК полімерази добудовує одноланцюжкові ділянки вірусної ДНК до повністюдволанцюжкової молекули, яка містить приблизно 3200 BР. Синтез ДНКпочинається на 3 'кінці короткої ланцюга, яка в різних молекулах знаходитьсяна різних ділянках в межах специфічної області ДНК і закінчуєтьсяпо досягненні 5 'кінця короткої ланцюга, розташованого в суворо визначеніймісці. Довга ланцюг не є замкнутим колом: в точці,розташованої приблизно на відстані 300 bp від 5 'кінця короткоїланцюги, існує розрив. За допомогою нагрівання при певних умовах,яка викликає виборчу денатурацію 300 - нуклеотидної області між
5 'кінцем короткої ланцюга і розривом довгого ланцюга, кільцева ДНК може бутиперетворена на лінійну форму з одноланцюжкові липкими кінцями. Лінійнаформа може бути знову переведена в кільцеву шляхом реассоціаціікомплементарних одноланцюжкові кінців. За мабуть, 5 'кінці обох, якдовжиною, так і короткою ланцюгів ДНК HBV блоковані таким чином, щопопереджено їх фосфорилювання полінуклеотіназой. Хімічна природаланцюга ДНК, виділеної з віріонів ковалентно приєднана до поліпептиди, щозапобігає її фосфорилювання [7,15].

1.2.5 Механізм реплікації вірусів.

Після проникнення вірусу в клітини печінки в клітинних ядрахформуються замкнуті кільцеві вірусні ДНК, що складаються з 3200 bp. Вониможуть функціонувати як матриці для синтезу вірусної мРНК і синтезу плюс
РНК повної довжини, новосинтезованих вірусна ДНК - полімераза і білок --запал для синтезу мінус - ланцюга ДНК збираються в комплекс з мажорнихструктурним поліпептидом в серцевини вірусу і утворюють серцевину абонуклеокапсид вірусу. Потім усередині нуклеокапсиду синтезується мінус - ланцюгвірусной ДНК. У цьому процесі використовується білкова запал і РНКматриця, що по мірі синтезу ДНК деградує під дією РНК ази Н.на матриці мінус - ланцюга ДНК кільцевої конформації синтезується плюс - ланцюгвірусної ДНК. Потім частки серцевини збираються в повні віріони з HBcAgі ліпідосодержащімі оболонками клітинної мембрани. У випадку HBVформування вірусу і виділення його з клітки можуть, відбуватиметься, очевидно,на будь-який ступені після збирання серцевини, так як віріони (частки Дейна)що містять молекули гібридів ДНК - РНК, а також частково одноланцюжковікільцеві ДНК виявляються в крові. Ендогенне ДНК полімерази в віріонакаталізують включення нуклеотидів в мінус - ланцюга ДНК гібридів РНК - ДНК ів плюс - ланцюга ДНК частково одноланцюжкові молекул [15].

1.2.6 Чутливість HBV до фізико - хімічним факторам.

Характеризується значною стійкістю, при t =-20Со зберігаєтьсядо 20 років, не інактивується при заморожування - відтаванні, зберігаєтьсяпри 56 Зі близько доби, а при 60 Со - 30 хвилин. Антиген стійкий додії протеолітичних ферментів і органічних розчинників. Піддією ефіру, хлороформу, 1,5% формаліну, 2% розчину фенолу НЕінактивується кілька годин. При t = 100 Зі треба кілька хвилин, щобвбити вірус. У сироватці зберігається 6 місяців при 30 - 32 Со. післявисушування вірус зберігає життєздатність при 25 Зі близько тижня. Припроцедурі фракціонування плазми по Кону, більша частина HBV, HBeAg, ДНК --полімерази зберігається в першому фракції (фібриноген, фактор - вісім) абоу фракції три (протромбіновий комплекс), тоді як велика частина HBsAgпереміщається до фракції чотири (плазматичних білків), а меншекількість у фракції три і п'ять (альбумін). Після прогрівання HBV до 60Зпротягом 4 годин вірус не інактивується, 10 годин при 60 Зі ліквідуєйого. При 98 З інфекційності сироватки частково усувається через 1 хвилинуабо повністю через 20 хвилин. Сухий жар 160 З руйнує інфекційностіза годину. В іншій серії дослідів HBV на протязі 10 хвилин обробляли при 20
З одним з п'яти дезинфікуючих препаратів (гепатохлорідом натрію + 500 мгвільного активного хлору на 1 літр; Cidex СХ - 250 + 2% водний розчинглутаральдегіда, рН - 8,4; Sporicidin рН - 7,9 + 0,12% - ний глутаральдегіді 0,44% - ний фенол; 70% - вим ізопропіловим спиртом; Weskodine,розведеним 1:213 і містить 80 мг активного йоду на 1 літр), а потімвводили одному шимпанзе. У жодного з п'яти не було відмічено ознакзахворювання. На кінець зазначено, що обробка ВЕТА - пропілактоном + УФ --променями зменшує титр HBV в плазмі приблизно в 10 млн. разів [14,15].

1.3 Вірус гепатиту D

Вперше виявив Різетто в 1977 році в гепатоцитах під час спалахусироваткового гепатиту у Південній Європі. Пізніше стали виявляти повсюдно.

Збудником захворювання є дефектний вірус з розмірами віріона
35 - 37 нм. Систематизовано до складу Deltavirus сімейства Togaviridae.
Внутрішній компонент частки складається з РНК з відносною молекулярноюмасою 500.000. простежується чіткий зв'язок між HBV і DAg. DAg єсаттелитов HBV; HBsAg якого завжди є зовнішньою оболонкою вірусугепатиту D. Таким чином, повноцінний вірус D складається з РНК, внутрішньогоантигену (YDAg) - власне вірусу гепатиту В і його зовнішньої оболонки,що складається з HBsAg. Геном гепатиту D кодує лише один відомий продукт --фосфопротеін, що володіє антигенними властивостями [2].

Вірус гепатиту D термостійкий, УФ - опромінення інфекційну активністьне зменшує. Надійно побивається при автоклавуванню в режимах, аналогічнихдля HBV. Гине при кип'ятінні не раніше, ніж через 5 хвилин [14].

1.3.1 Шляхи передачі HDV

Передається D-інфекція парентерально, із зараженою кров'ю. Часто воназустрічається у хворих на гемофілію, у осіб, які мають контакт з кров'ю.
Резервуаром HDV є інфікована людина. Заражає доза для D -гепатиту істотно менше, ніж у HBV і складає всього 10-11 млвіруссодержащей крові. Вірус HDV за вмістом у біологічних рідинахпоступається HBV, але всі вони вважаються потенційно небезпечними. Можливо такожпередача HDV при статевих контактах (гетеросексуальні (50%,гомосексуальні більше 90%). Є можливість передачі HDV від матері додитині, велика при пологах, менша - при годівлі грудьми [10].

Серед тварин резервуар поки не виявлено. Поширення HDVкорелює з рівнем виявлення HBsAg. Серед носіїв HBV близько 5% (від
0,1% до 20 - 30%), населення інфіковано HDV. Найбільша зараженість вкраїнах екваторіального і тропічного клімату. Ендемічної зоною HDVє Італія і країни Близького Сходу. За даними С. О. Вязова цейгепатит широко поширений і в СНД і частіше виявляється при тяжкиххронічних захворюваннях печінки [10,14].

4. Вірус гепатиту С

Виявлений у людей, які захворіли на гепатит після переливання крові або їїпрепаратів, де були відсутні маркери HBV. Це дало підстави стверджувати,що існує ще один або кілька збудників вірусних гепатитів зпарентеральним механізмом передачі [3].

HCV систематизовано в сімейство Flaviviridae, рід Hepavirus. Віріонявляє собою вірус сферичної форми, діаметром 55 - 65 нм. Геном HCVпредставлений однонітіевой + РНК, протяжністю близько 10000 нуклеотидів. HCVвикликає захворювання тільки у людини, але в експериментальних умовахінфекційний процес можна відтворити лише у вищих мавп.
Характеризується високим ступенем мінливістю генома (відомо 10 - 14генотипів і більше 50 підтипів вірусу), за деякими джерелами відомобільше 90 субтипов і множинних варіантів вірусу, що позначається якквазіди. Зареєстрована територіальна нерівномірність циркуляціїгенотипів HCV [6].

Ряд біологічних характеристик HCV має схожість з властивостями ВІЛ таслужить підставою для вивчення можливостей патогенетичної ролі HCV вураженні кровотворної системи. До таких біологічним характеристикамвідносяться:

1. Високий рівень спонтанних мутацій;

2. Здатність до тривалої персистенції в імунокомпетентних клітинах кровотворної системи, що обумовлює тривалий виживання і дессіменацію HCV в організмі господаря і закономірні імунні порушення з появою значної кількості аутоантігенов [7].

1. Генетична неоднорідність HCV.

Суттєвою особливістю HCV є його генетична неоднорідність,відповідна особливо швидкої замещаемості нуклеотидів. У результатіутворюється велика кількість різних генотипів і субтипов. Вони відрізняються одинвід одного іншою послідовністю нуклеотидів. Найбільш консервативні С --протеїн, а в неструктурної області NS5 - протеїн і РНК - залежна РНКполімераза. З іншого боку, білки зовнішньої оболонки Е2/NS1 і Е1 особливоваріабельні. По початку розмежовували 4 - 6 різних генотипів HCV інфекціі.вподальших класифікаціях розмежовують 11 генотипів і субтипов HCV,згідно з останніми даними Bukh J. Виділяють вже 30 різних субтипов. Особливобагато субтипов HCV реєструються в Африці і Південно-Східної Азії. Цепобічно підтверджує існування HCV в цих регіонах вже протягомдекількох століть. Припускають, що в Європі і Північній Америці HCVз'явився пізніше, чому відповідає істотно менше число різнихсубтипов. Для клінічної практики досить розмежовувати 5 субтипов
HCV: 1а, 1в, 2в, 2а, 3а [10].

Встановлено істотні географічні відмінності у поширеннірізних генотипів. Так, в Японії, на Тайвані, частково Китаї,реєструються переважно генотипи 1в, 2а, 2в. тип 1в навіть називаютьяпонським. У США переважає 1а - американський генотип. У європейськихкраїнах переважає генотип HCV 1а, в Південній Європі помітно зростає часткагенотипу 1в. в Росії частіше реєструється генотип 1в, далі з порядку спаданнячастотою 3а, 1а, 2а [6,9].

2. Епідеміологія HCV.

HCV як і HBV і HDV відносяться до антропонозним трансмісивних кров'янимвірусних інфекцій. Механізм зараження - парентеральний, шляхи передачі --множинні - штучні та природні. Припускають і інші, ще невстановлені шляхи зараження HCV - інфекції, у тому числі і аерозолю.
Проте, таке припущення фактичних підтверджень не має. Джереломінфекції є хворі HCV, перш за все з хронічним перебігом, іхронічні лотентние носії HCV. Це визначає апріорну близькістьепідеміологічної характеристики HCV, HBV і HDV [10,11].

До теперішнього часу точно документовані два шляхи передачі HCV:парентеральний і вертикальний. У разі парентерального зараження,потрібно відносно велика доза інфікованої HCV-крови (10-2 - 10-1мл). за оцінками експертів понад 50% випадків HCV пов'язані з парентеральниммеханізмом передачі [12].

участь хворого мало місце зараження при парентеральних маніпуляціях умедичних установах, особливо гостро ця проблема стоїть у приватнійстоматологічній практиці. Широке використання гемотрансфузій довведення контролю за донорами сприяло поширенню захворюванняпід час використання крові та її препаратів. Хоча сучасні методи їхвиготовлення «гарантують» інактивацію вірусу гепатиту. Очевидним є ризикпередачі HCV через ін'єкційне обладнання. Введення одноразових шприціві голок катетер безумовний прогрес у боротьбі з HCV. У країнах, якіпродовжують повторно використовувати погано простерилізованих медичніінструменти, буде продовжаться розповсюдженням HCV. Після забезпеченняповної безпеки донорської крові більшість випадків HCV будеобумовлене недотриманням санітарно - гігієнічних правил наркоманами,що вводять наркотики внутрішньовенно (повторне використання нестірільнихшприців і голок, нестерильні фільтрація вводяться препаратів ...). Високийрівень HCV серед наркоманів, які почали вводити наркотикипарентерально зовсім нещодавно, свідчить про дуже "високоїефективності "цього шляху передачі HCV.

Описано декілька випадків професійного зараження гепатитом С умедичних працівників з передачею HCV при випадкових уколах використанимиголками, хоча такі випадки спостерігаються дуже рідко у порівнянні, наприклад,з професійним зараженим медпрацівників HBV. Серологічне спостереженняза медперсоналом, з яким сталися нещасні випадки, показали, щосероконверсії при зараженні HCV відбувається відносно нечасто від 0 до
10%. Не має переконливих доказів ефективності пасивноїімунопрофілактики після нещасного випадку, тому особлива увага повиннаприділятися дотриманню універсальних запобіжних заходів і використаннюіндивідуальних захисних засобів. Впоєне імовірна передача HCV приАкупунктура, таттуаже і будь-якому пошкодженні шкірних покривів нестірільниміінструментами. Результати більшості досліджень показують, що єнизька ймовірність передачі інфекції від жінки, у якої виявленіантитіла до HCV, до новонародженої дитини. Прийнято вважати, що HCV можерозвиватися лише у 10% випадків, якщо цю дитину народила HCV --позитивна мати. Ступінь ризику різко зростає при наявності у жінки
ВІЛ - інфекції. В який час відбувається інфікування дитини - упренотальном періоді, під час пологів або в постнотальном - невідомо.
Дослідження показали також наявність HCV в грудному молоці, але переконливихданих про його передачу в даному випадку немає. У крові ж концентрація HCVскладає приблизно 100 віріонів на мл [14].

Що стосується передачі HCV статевим шляхом, то існує соціальназакономірність. Гомосексуалісти - чоловіки заражаються, приблизно 95 -
99%, звичайні гетеросексуальні пари - менше 10%. Результати більшостідосліджень, проведених у країнах Європи та Північної Америки, середнормальних пар також показали дуже низьку передавання HCV. Крім того,дослідження методом "випадок - контроль" продемонстрували лишнезначну підвищений ступінь ризику інфікування збудником HCV улюдей, які мають множинних статевих партнерів [10,12].

3. Чутливість HCV до зовнішніх чинників.

Відомо, що HCV стійкий до нагрівання до 50 Со, але надійноінактивується розчинниками ліпідів (хлороформом). УФ - опромінення такожзначно впливає на HCV. В зовнішньому середовищі не стійкий, однак ступінь йогостійкості до інактивації значно вище, ніж у ВІЛ [6,7].

5. Вірус гепатиту G

HGV було виділено з крові хворих на гепатити ні А ні В групою вчених
Abbot Laboratories в 1995 році. HGV відноситься до інфекцій з парентеральниммеханізмом передачі. Можливий також статевий і вертикальний шлях доінфікування. На користь гепатотропними HGV свідчить виявлення
РНК HGV в клітинах печінки, а також розвиток гострого і фульмінантногогепатиту слідом за трансфузії крові або її продуктів [10], [7].
Таксономічний положення HGV залишається нез'ясованим. Його умовно відносять досімейства Flаviviridae. Геном утворений несегментірованной молекулою + РНК,і має довжину 9103 до 9392 (в різних ізолятів вірусу)нуклеотидів. Складається з двох структурних HGV свідчить роррррр ічотирьох неструктурних ділянок, що кодують білки з функціями, аналогічнимифункціями відповідних білків HCV. Особливістю HGV є присутністьдефектного серцевинного (core) Білка або повна його відсутність. На 5 'і 3'нетрансліруемих ділянок є елементи, необхідні для регуляціїжиттєдіяльності вірусу. Встановлено, що відбуваються поблизу 5 'ділянкивставки і випадання нуклеотидів зрушують відкриту рамку зчитування РНК --вірусу, що призводить до появи дефектного (core) білка або ж повного йоговідсутності. Висловлюються припущення про використання HGV - капсиднихбілків інших, можливо ще не відкритих вірусів, що виконують в даномувипадку роль структурних поліпротеїну [12].

Ще одна особливість HGV полягає у відсутності в генах, що кодуютьзовнішні глікопротеїни, Гіперваріативна області. Також, як HCV, ВІЛ таінші РНК - що містять віруси. Віруси HGV володіють двома рівнямиваріабельності геномної РНК. Перший полягає у відмінностях між віруснимигеномами, тими, які циркулюють в одному організмі квазіди. Другий заснований навідмінності між варіантами вірусів, виявленими в різних організмах, --генотипи. Різні квазіди HGV володіють різною тканинної специфічністю
[11].

При класифікації віріонів HGV за розбіжності типів застосовується рівеньрозбіжності нуклеотидної послідовності. ? 30%, а субтипу поділяють принаявності 15% розбіжностей. Відмінності між варіантами HGV повної нуклеотидноїпослідовності генома становить 10 - 15% і варіює в залежності відділянки геному від 5 до 30%. У зв'язку з цим прийнято розділяти тількигенотипи HGV і позначати їх цифрою. До теперішнього часу прийнято виділяти
5 генотипів HGV. Дослідження ділянки РНК HGV ІІ та експериментальнеекспрессірованіе кодованих їм білків визначено наявність п'яти білків змасою, в межах 20 70 кD. Ці білки виконують функції протеази, Геліказиі РНК - залежної РНК - полімерази [10,12,16].

1. Епідеміологія HGV.

Встановлено закономірність зустрічальності генотипу вірусу від територіївиявлення.

HGV1 - Західна Африка

HGV2 - Північна Америка, Європа, Азія, Північна Африка

HGV3 - Південно-Східна Азія

HGV4 - Південна Африка.

Джерелами розповсюдження HGV є хворі гострим, хронічним
HGV та носії. Серед осіб, що вводять собі наркотики внутрішньовенно, HGVвиявляється у три рази частіше, ніж у інших наркоманів.

При HGV можливий і статевий шлях зараження. Відзначено збільшення відсоткавиявлення HGV в залежності від кількості статевих партнерів, від 8 до 21% (уосіб з наявністю більше 100 партнерів). Гомосексуалісти - чоловіки схильніризику на 95% [19].

Можна вважати доведеним існування «вертикального шляху передачі»
HGV від матері до дитини. HGV заражене, приблизно 1% населення. Інфекціяхарактеризується тривалою персистенцією до 8 років з переходом 36% ухронічну форму [16,21].

6. Вірус гепатиту ТТV

У 1997 році японські вчені на чолі з T. Neshirawa за допомогою варіантиреакції ампліфікації генів (репрезентативного диференціального аналізу),призначена для пошуку ще невідомих вірусів, досліджували сироваткикрові, зібрані від п'яти пацієнтів. Був виділений клон розміром в 500підстав раніше невідомого вірусу. З огляду на що він виділений від людей зпосттрансфузійним гепатитом його позначили як TTV (transfusion --transmited virus), тобто, вірус, що передається при переливанні [9,10]. Приподальшому дослідженні TTV по молекулярному клонування і характеристицівстановлено, що він (ізолят ТА278) містить лінійну одноланцюжкові ДНК,протяжністю 37 - 39 підстав [16]. При пошуку гомологіїпослідовностей ДНК TTV з ДНК інших вірусів не виявлено тихпослідовностей, які були достовірні гомологічних. При аналізівиявлені два відкриті рамки зчитування (ORF), що позначеніті як ORF1 і ORF2,які відповідно до кодують 770 а. к. і 202 а. к.

фракціонування вірусу в градієнті щільності сахарози зтривалої обробкою, що містить вірус - матеріалу твини - 80 і безнеї виявлено, що в обох випадках пік щільності TTV відповідав 1,26г/см3. Ці дані вказують на відсутність у вірусу ліпідної оболонки.
Важливі результати отримані при виявленні ДНК TTV з тканини печінки. Вірусвиявлений в біопсійного матеріалі п'яти пацієнтів. ДНК TTV у них виявлено всироватці крові. При чому, в печінкової тканини концентрація ДНК TTV виявиласявище. Це говорить про гепатропності TTV. Крім гепатоцита TTV вдалосяідентифікувати в мононуклеарами периферичної крові у чотирьох чоловік звосьми, у сироватці крові яких було ДНК TTV [18].

1. Систематизація гепатиту TTV.

Порівняння властивостей TTV з відомими ДНК - містять вірусами далопідставу припустити, що він найбільш близький до вірусів, що входять досімейство Circoviridae і в сімейство Parvoviridae. Отримані дані недозволили встановити до якого з цих родин належить TTV. Однак, вкористь парвовірусов можуть служити встановлені наступні факти: парвовірусгусей (GPV) може бути етіологічним агентом смертельного гепатиту гусей,а парвовірус людини B19 раніше розглядався як причина кількохвипадків гепатиту [19,20].

2. Аліментарне зараження TTV

Відомо, що деякі парвовіруси ссавців, такі, якпарвовірус кішок і вірус ентериту норок, мають фекально - оральний механізмпередачі. Ця інформація і висока імовірність того, що TTV - парвовірус,дозволила Окамото припустити і експериментально довести наявність цьоговірусу у фекаліях хворих на гепатит, що асоціюється з TTV. Він буввизначено у трьох з п'яти пацієнтів, у крові яких була позитивна ПЛР,що свідчать про TTV. Причому, в одному випадку титр TTV у фекаліях буввище, ніж у сироватці крові: 105 і 104. плавучу щільність в градієнті CsCl вірусів, виділених із фекалій та сироватки крові, виявилася близькою (1,35 і
1,32 г/см3) [10,16].

3. Взаємозв'язок гепатиту TTV з географічним регіоном.

Отримані результати дозволили обгрунтувати гіпотезу про те, що TTVможе передаватися як парентерально, та і фекально - орально. Аналізуючинуклеотидні послідовності різних ізолятів вірусу виділили двігрупи вірусів (генотипи), ДНК яких відрізняється один від одногопослідовностями більш ніж на 30%. Вони отримали позначення G1, G2.
Усередині кожного генотипу (при відмінності 11 - 15%) виділили субтипу G1a, G1b і
G2a, G2b. При подальшому аналізі нових ізолятів вірусу виявлено третійгенотип вірусу G3, а також раніше невідомий субтип 1С. Прифілогенетичному аналізі ДНК TTV 190 ізолятів вірусу, виявлених в Азії,
Африці і Південній Америці, встановлено наявність додаткових субтипов - 2с,
2d, 2e, 2f. У сироватці крові хворих на гепатит невідомої етіологіїзареєстрований четвертий генотип TTV. Узагальнюючи дослідження згенотипування можна зробити наступні висновки: найбільш широкопредставлені субтипу 1а і 1в; відсутній взаємозв'язок того чи іншогогенотипу з географічно