Мікрофлора повітря

Дефіцит вологи та поживних речовин, сонячна радіація перешкоджаютьрозмноженню мікроорганізмів в атмосферному повітрі. Мікроби потрапляють доповітря з поверхні грунту та рослин, з відходами виробництва, із твариннихорганізмів. Мікрофлора атмосферного повітря є вторинною та досить бідною завидовим складом. Вона залежить від інтенсивності сонячної радіації, вітру,опадів, пори року.

При чханні, кашлі, розмові із верхніх дихальних шляхів людини в повітрявикидається безліч краплінок слизу з епітеліальнімі клітинами тамікроорганізмами. Зважені в повітрі краплинки утворюють стійкий мікробнийаерозоль, дрібнодісперсні фракції якого здатні проникати навіть в середніта нижні відділи респіраторного тракту людини.

Повітряно-крапельним шляхом відбувається передача збудників т. з.респіраторних інфекцій - грипу та корі, туберкульозу, кашлюку, дифтерії,краснухи, паротиту. Мікробний аерозоль може стати причиною розвиткуалергічних захворювань, особливо за наявності в повітрі цвільовіх грибів таактиноміцетів.

Розповсюдження мікробів за участі повітря може реалізовуватись й іншимшляхом, якщо викинуті з респіраторного тракту краплинки вісіхають наповерхнях і перетворюються на бактеріальній пив. Доведено, що в білковомусубстраті деякі бактерії виживають довше і такий бактеріальній пив можеінтенсивно переміщуватись з повітряними потоками.

Мікробіологічні дослідження повітря мають за мету контроль стануповітряного середовища замкнених приміщень: операційних, асептичного палат іблоків, боксів аптек, дитячих закладів і бактеріологічних лабораторій.

Для дослідження мікрофлори повітря використовують наступні методи:
1. Звичайна седіментація - т. з. чашковій метод Коха з пасивним Осадженнямікробів на поверхню щільного поживного середовища за певний час, зазвичай
5-10хв.
2. Примусова седіментація мікроорганізмів повітря з використаннямспеціальних приладів - імпакторів типу приладу Кротова (мікроби осаджуютьна поверхню щільних поживних середовищ) та імпінджерів типу приладу
Дьяконова (при продуванні повітря мікроби поступають в рідкі поживнісередовища). Ці методи найбільш надійні, бо дозволяють давати кількіснухарактеристику забрудненості повітря мікроорганізмами та вивчати їх видовийсклад.
3. Фільтраційній метод - повітря продувають крізь воду або мембранніфільтри з наступним мірнім висівом на поживні середовища.

Критеріями оцінки мікробіологічного стану повітря замкнених приміщень є:а) Загальне мікробне число (ЗМЧ) - кількість бактерій в перерахунку на 1м3повітря, що виросли при посіві на поверхню поживного агару. Посівиінкубують добу при 370с, потім ще добу при температурі ~ 200С.б) Індекс санітарно-показових бактерій - кількість в перерахунку на 1м3повітря умовно-патогенних мікробів дихальних шляхів - гемолітічніхстрептококів, золотистого стафілокока, грамнегативних бактерій,дріжджеподібніх та цвільовіх грибів.

Велике значення для профілактики гнійних ускладнень має мікробна чистотаповітря в таких місцях, як, наприклад, операційні приміщення, для яких ЗМЧв 1м3 повітря не повинно перебільшувати до операції 500, а після - 1000.

Мікрофлора ротової порожнини

Ротова порожнина людини являє собою унікальну екосистему з багатствомхарчових ресурсів, постійною вологістю, оптимальними значеннями рН ітемператури, що створюють сприятливі умови для адгезії, колонізації тарозмноження мікроорганізмів.

Однак наявність в ротовій порожнині слини та її бактерициднихкомпонентів (імуноглобулінів, лізоціму, ферментів), а також потужногоепітеліального покриву, обмежує можливість оральних мікроорганізміввикликати патологічні зміни.

В наш час описано кількасот видів мікроорганізмів, що складаютьнормальну мікрофлору ротової порожнини. До її складу входять бактерії,віруси, гриби та найпростіші.

Серед мікробів ротової порожнини зустрічаються автохтонні (постійні) тааллохтонні види - іммігранти з інших біотопів хазяїна (носоглотки,кишечнику та ін.) та заносна мікрофлора із зовнішнього середовища.
Автохтонне мікрофлора поділяється на облігатну, яка постійно мешкає вротовій порожнині, та тимчасову - транзиторне, до складу якої частішевходять патогенні або умовно-патогенні бактерії.

Основна маса грампозитивних коків ротової порожнини представленагетерогенної групою стрептококів, які приймають активну участь у процесах,що призводять до вражень твердих тканин зуба і пародонта (Streptococcusmutans, S.sanguis, S.mitis, S.salivarium). Вони відрізняються за здатністюферментуваті вуглеводи, утворювати перекис водню, синтезувати полісахариди.
Ці види зустрічаються у ротовій порожнині в різних кількіснихспіввідношеннях, які залежать від дієти, гігієни ротової порожнини та іншихфакторів.

Друга група грампозитивних коків - пептококі, які активно розщеплюютьсяпептони та амінокислоти. Найчастіше вони зустрічаються в асоціаціях зфузобактеріямі та спірохетамі при різних захворюваннях ротової порожнини.

грамнегативні анаеробні коки представлені родом Veillonella, якіприймають активну участь в розщепленні лактату, пірувату, ацетату. Зарахунок катаболізму лактату утвореного стрептококом вейлонеллі можутьздійснювати протікаріозну дію.

Таблиця 1. Бактерії, що входять до складу зубного нальоту

Грампозітівні палички представлені родом Lactobacillus, характерноюознакою представників якого є розщеплення вуглеводів з утворенням великоїкількості молочної кислоти, зберігаючи життєздатність у кислого середовищі.
Це явище є одним з факторів, що сприяють розвитку карієсу зубів людини.

грамнегативні анаеробні та мікроаерофільні бактерії частіше за всевідносяться до бактероїдів, які не мають каталази і ферментують цукри догазів, а пептони - з утворенням амінокислот. До них належать три роди:
Bacteroides, Fusobacterium, Leptotrichia.

Bacteroides melaninogenicus та B.gingivalis характеризуються низькоюсахаролітічною активністю, але глюкозу розщеплюються з утворенням сумішікислот, причому рН середовища залишається досить високим (~ 6.0). Черезнаявність великої різноманітності протеолітичних ферментів мають великепатогенетичне значення.

Рід Фузобактерії, що представлений веретеноподібнімі паличками складаєразом з бактероїдамі автохтонне мікрофлору ротової порожнини. Утворюють зпептони або глюкози молочну кислоту.

Представники роду Leptotrichia (L.buccalis) мають вигляд попарнорозташованих зернистих паличок, часто ніткоподібної форми. Ферментуютьглюкозу з утворенням великої кількості молочної кислоти, що призводить дозниження рН (~ 4.5).

Представники роду Actinomyces кінцевими продуктами розщеплення глюкозимають молочну, оцтова, мурашиний та янтарної кислоти, характеризуютьсяслабкою протеолітічною активністю, приймають участь в утворенні зубногокаменю, зубних бляшок.

Бактерії роду Корінебактерії мають здатність знижувати окисно-відновнійпотенціал, створюючи таким чином умови для розвитку анаеробів.

Спірохеті, що мешкають в ротовій порожнині, відносять до трьох родів:
Treponema, Borrelia, Leptospira, представники яких відрізняються один відодного за біохімічними та ін. особливостями.

В ротовій порожнині зустрічаються й мікоплазми (M.orale, M.salivarium),які гідролізують аргінін та не ферментують глюкозу.

Практична частина

Найпоширенішим методом дослідження мікрофлори повітря є чашечний метод (м -д Коха), суть якого полягає у культивуванні (при певних умовах)мікроорганізмів, що осіли на щільне середовище (МПА, КА) чашки Петрі.
Кількість колоній, що виросли на середовищі визначається безпосереднімипідрахунками. Колонія не завжди є результатом поділу однієї клітини. Узв'язку з цим фактом виникає необхідність виражати кількістьмікроорганізмів в КУО (колонієутворюючіх одиницях) на 1м3 повітря. Цеспіввідношення знаходить свою реалізацію у формулі Омелянського (для методу
Коха):

;при тому, що х - кількість мікробів в 1м3 повітря;а - кількість колоній в чашці Петрі;в - площа чашки Петрі;t - час експозиції;
5 - час за розрахунками Омелянського;
100 - площа, на яку відбувалось осадження;
1000 - досліджуваний об'єм повітря.

Об'єктами досліджень стали приміщення буфету та кафедри мікробіології.
В результаті підрахунків з'ясовані наступні значення КУО:а) для мікробіологічної аудиторії;б) для буфету.

При дослідженні отриманих колоній їх розрізняють за такими ознаками, як:форма, Консистенція, розмір, край, колір, профіль, поверхня.

Дослідивши вищевказані ознаки складаємо таблицю № 1.

Наступними завданнями практичних робіт були роботи по виділенню чистихкультур мікроорганізмів методом штриха, що віснажується, перевірка їходнорідності світловою мікроскопією з додаванням емерсії і т.д.

Таблиця 1. Морфолого-культуральні властивості мікроорганізмів.

Мікрофлора зубного нальоту та ротоглотки

При дослідженні мікрофлори зубного нальоту відбір зразку проводивсястерильною зубочисткою, готувався препарат, який після фарбуваннярозглядався з імерсією.

При вивченні мікрофлори зіву проби брались ватним тампоном, попередньозмоченою у фізрозчіні. Після цього проводився висів проби на МПА газоном зодночасним використанням методу стандартних паперових дисків насиченихрозчином антибіотиків для перевірки чутливості культури до їх дії.
Результатом є утворення зон затримки росту, діаметр яких залежить відчутливості мікроорганізму та, відповідно, активності антибіотика.

Таблиця 3.

Морфологія клітин зубного нальоту та ротоглотки.

Паралельно з методом стандартних паперових дисків використовували методблоків, при якому використовують поверхневі культури продуцентівантімікробніх речовин. Результати чутливості мікроорганізмів внесли донаступної таблиці:

Таблиця 4.
Чутливість мікрофлори ротоглотки до антибіотиків та метаболітівактиноміцетів.

Висновок

В результаті проведення курсу практичної мікробіології з ознайомленняекологічних ніш мікроорганізмів, їх складу у різних біотопах, фізико -хімічних та біологічних властивостей, патогенезу та важливих кориснихфункцій опанували комплекс цінних методик, а саме:а) Визначення КУО за методом Коха та з використанням методик Омелянського;б) отримання чистих культур методом штриха, що віснажується;в) вивчення специфічних морфологічних та фізіолого-біохімічних особливостейвиділеної культури;г) визначення мікрофлори зубного нальоту та ротоглотки;д) опанування важливого в медицині метода визначення активності певнихантибіотиків та екзометаболітів актиноміцетів на бактеріальні колонії.
Київський національний університет ім. Тараса Шевченка

Біологічний факультет

Звіт з мікробіології

Студента ІІІ курсу

Групи біохімії

Фролова Артема

Київ 2002

План:

І. Теоретична частина

1. Мікрофлора повітря

2. Мікрофлора ротової порожнини

ІІ. Практична частина

1. Методологія

2. Таблиці

3. Пояснення та хід роботи

ІІІ. Висновок.