Дослідження сечі

Ярославська Державна Медична Академія

Кафедра пропедевтики внутрішніх хвороб педіатричного факультету

Ярославль, 1997

Порядок дослідження

1. Паркан матеріалу.

2. Дослідження фізичних властивостей.

3. Дослідження хімічних властивостей.

4. Мікроскопічне дослідження осаду.

5. Бактеріологічне дослідження.

Паркан матеріалу

Лабораторне дослідження сечі повинно проводитися у всіх хворих незалежно від характеру їх захворювання. Для клінічного аналізу необхідно 100 - 200 мл першої ранкової сечі, яку збирають в чисту суху скляний посуд. Перед забором сечі необхідний туалет зовнішніх статевих органів або взяття сечі катетером. На посуд з сечею наклеюють етикетку з зазначенням прізвища та ініціалів хворого, номери палати та відділення, діагнозу і характеру дослідження (загальний аналіз, дослідження на цукор і ацетон і т. д.). Кількісне визначення складових частин сечі (наприклад, цукру при цукровому діабеті) виробляють з добової кількості сечі. Сечу збирають за добу до одного посуду, вимірявши загальна кількість, направляють на дослідження 100 - 150 мл сечі.

Для бактеріологічного дослідження достатньо 10 мл сечі, зібраної в стерильну пробірку, стерильним катетером.

Для виявленні лейкоцитурією (метод Каковского - Аддіс) сечу збирають за 10 - 12 годин, тобто з 21 години до 9 годин. Отриману сечу ретельно розмішують і вимірюють її кількість. На дослідження направляють кількість, вибраного за 12 хвилин, яке визначають за формулою:

Y

X =-----------------,

t * 5

де:

Х - кількість сечі за 12 хвилин,

Y - об'єм сечі, яка вимірюється в мл,

t -- час, за який зібрана сеча, 1/5 години - 12 хвилин.

Проба по 3імніцкому. При звичайному режимі питне сечу збирають протягом доби за кожні 3 години, перша порція сечі о 6 годині ранку виливається. На кожну пляшку наклеюється етикетка із зазначенням прізвища, палати, номера порції і проміжку часу, за який зібрана порція (6 ч. - 9 ч., 9 ч. - 12 ч., і т. д.). Всі 8 порцій направляють на дослідження.

Дослідження фізичних властивостей

Дослідження фізичних властивостей сечі включає в себе визначення кількості, кольору, прозорості, запаху і питомої ваги сечі. Кількість виділеної за добу сечі (діурез) у нормі складає в середньому 50 - 80% випитої рідини і коливається від 1000 до 2000 мл. Вимірювання роблять за допомогою мірної посуду по нижньому меніска (рівнем рідини). Колір сечі у нормі коливається від світло-жовтого до насиченого жовтого і обумовлений містяться в ній пігментами: урохромом А, урохромом Б, уроетріном, урорезіном та ін Визначають колір простим оглядом, після попереднього відстоювання в світлі, що проходить на білому фоне.3апах свежевипущенной сечі здорової людини своєрідний, слабкий ароматичний, який, як вважають, залежить від вмісту в ній мінімальних кількостей летких ефірних кислот. При тривалому стоянні, в результаті лужного бродіння, сеча набуває аміачний різкий неприємний запах. Запах гниючих яблук при наявності в сечі ацетоновій тел. Прийом деяких харчових продуктів і ліків додають сечі свій запах.

Прозорість (каламутність). Нормальна свежевипущенная сеча прозора. Мутність можливо викликана: солями, клітинними елементами, бактеріями.

Посуд, обладнання та реактиви:

- циліндр на 10 - 15 мл.

- хімічні пробірки.

- пальник.

- 10% розчин оцтової кислоти, розчин лугу (NaОН ).

Хід дослідження:

У циліндр ємністю 10 - 15 мл наливають сечу, відстоюють і через шар сечі читають друкований текст. Ступінь каламутності позначають наступним чином: прозора сеча -- друкований текст читається легко; слабка ступінь каламутності - легко читається середній і великий друкований текст; помірна - букви розрізняються нечітко; велика -- букви невиразні. Причину помутніння визначають таким чином. У пробірку наливають 2-3 мл сечі, нагрівають. Зникнення помутніння вказує на наявність уратів; посилення - на наявність фосфатів. Останні розчиняються після додати 2-3 крапель 10% оцтової кислоти, Зникнення помутніння від додавання декількох крапель лугу говорить про присутність кристалів сечової кислоти. Питома вага залежить від кількості розчинених у сечі щільних речовин. У нормі питома вага сечі 1012 - 1025.

Посуд і обладнання:

- циліндр ємністю в 50 - 100 мл,

- урометр з поділками від 1000 до 1050 ...

Хід дослідження:

сечу наливають у циліндр, уникаючи утворення піни. Якщо піна утворюється, то її слід видалити фільтрувальної папером. Обережно занурюють урометр в рідина; верхня частина урометра повинна бути сухою і урометр не повинен торкатися стінок циліндра. Коли урометр перестав занурюватися, його злегка штовхають зверху, інакше він опускається менше, ніж належить. Після припинення коливань по нижньому меніска рідини по шкалою урометра відзначають питома вага. При малій кількості сечі, її слід розвести дистильованою водою (1 мл сечі 1 мл води - розведення в 2 рази, 1 мл сечі 2 мл води - в 3 рази і т.д.). Визначивши питому вагу, дві останні цифри питомої ваги множать на ступінь розведення. Необхідно при визначенні питомої ваги враховувати температуру навколишнього середовища, так як урометри вивірені при температурі 15'С. Вимірюючи питома вага, слід вносити поправку: на кожні 3 ' вище 15 'необхідно додати 0,001, і на кожні 3' нижче 15 'віднімати 0,001.

Реакція сечі в нормі при змішаній їжі кисла або слабокисла. Орієнтовний спосіб визначення реакції сечі за допомогою синьою і червоною лакмусовим папірців. У кислому сечі синя лакмусовий папір червоніє, в лужному - червона синіє; в нейтральній обидві папірці не змінюють свого кольору.

Дослідження хімічних властивостей:

Перш ніж приступити до хімічного дослідження, необхідно профільтрувати сечу.

Хімічне дослідження містить у собі визначення в сечі білка, цукру, ацетону і ацетоуксусной кислоти, жовчних пігментів і уробіліну.

Визначення білка:

Якісні реакції на білок засновані на його осадженні реактивами або нагріванням. При наявність білка в сечі утворюється велика або менша ступінь помутніння. Умови визначення білка: 1) - сеча повинна мати кислу реакцію. Лужну сечу підкислює, додаючи 2 - 3 краплі оцтової кислоти. 2) - сеча повинна бути прозорою. Помутніння усувається фільтруванням через паперовий фільтр. Якісну пробу слід проводити у двох пробірках, од на - контроль.

Оцінка: У нормі білка в сечі не міститься.

Якісні проби

Проба з сульфосаліціловой кислотою

Реактиви:

- 20% розчин сульфосаліціловой кислоти.

Хід дослідження:

У пробірку наливають 4 - 5 мл сечі і додають 8 -- 10 крапель реактиву. За наявності білка в сечі, в залежності від кількості його, може бути помутніння чи випадає хлопьевідний осад. Проба вважається однією з найболючіших, є позитивною при наявності білка в сечі в кількості -- 0,015%.

Проба з оцтової кислотою

Реактиви:

- 10% розчин оцтової кислоти.

Хід дослідження:

У пробірку наливають 8 - 10 мл сечі, нагрівають верхній шар сечі до кипіння і додають 8 - 10 крапель оцтової кислоти. При наявність білка в нагрітої частини сечі утворюється помутніння або пластівці кисле білка.

Кількісне визначення білка. (спосіб Робертса - Стольнікова):

Принцип методу: Якщо при нашарування сечі на азотну кислоту на межі двох рідин утворюється тонке біле кільце між 2-й і 3-й хвилинами, то в досліджуваної сечі міститься 0,033% o білка.

Реактиви:

-- концентрована азотна кислота,

Хід дослідження:

У пробірку наливають 1 - 3 мл азотної кислоти і обережно по стінці нашаровуються таке ж кількість сечі. Помічають час після нашарування. Якщо кільце на кордоні рідин (розглядати його слід на чорному фоні) утворюється відразу або раніше 2-х хвилин після нашарування, сечу необхідно розвести водою. Після чого проводять повторне визначення білка в розведеною сечі. Розведення виробляють до тих пір,

поки біле кільце при нашарування на азотну кислоту розведеною сечі не з'явиться між 2-й і 3-й хвилинами. Кількість білка обчислюють шляхом множення 0,033% o на ступінь розведення.

Визначення цукру (глюкози)

Якісна проба (проба Гайнеса)

Проба заснована на властивості глюкози відновлювати гідрат окису міді в гідрат закису міді (жовтий колір) або закис міді (червоний колір).

Реактиви:

реактив Гайнеса (суміш розчинів сірчанокислої міді, їдкого натру і гліцерину).

Хід дослідження:

У пробірку наливають 3 - 4 мл розчину Гайнеса, додають 8 - 10 крапель сечі і нагрівають до кипіння. За наявності цукру колір сечі змінюється від коричнево-зеленого до червоного, залежно від кількості цукру.

0ценка: У нормі цукру в сечі немає.

Кількісне визначення цукру сечі

поляриметричними метод:

Принцип методу полягає у використанні властивості глюкози обертати площину поляризації вправо. За кутку обертання поляризованого променя можна визначити кількість глюкози.

Хід визначення:

Сеча повинна бути прозорою, не містити білка, кислої реакції. Для цього сечу підкислює слабкою оцтової кислотою, кип'ятять, охолоджують і фільтрують. Трубку поляриметри заповнюють профільтрованої сечею без бульбашок повітря, накривають шліфованим склом, загвинчують щільно, насухо витирають і поміщають в апарат.

Визначення проводять через 2 - 3 хвилини після заповнення трубки, так як коливання частинок рідини заважає дослідженню. Оптично активний розчин глюкози, відхиляючи промінь, змінює інтенсивність світла в окуляр; відновити освітленість можна, повернувши аналізатор на певний кут. Кут відхилення виражається в градусах шкали приладу. Кут відхилення в 1 градус відповідає 1% глюкози при довжині трубки 18,94; якщо довжина 9,47 - отриманий результат помножити на 2.

Визначення ацетоновій тел (проба Ланге)

До ацетоновій тіл відносяться ацетон, ацетоноуксусная кислота і оксимасляная кислота. У сечі зустрічаються разом, тому їх роздільне визначення клінічного значення не має. У нормі в сечі не містяться.

Реактиви:

- суміш нітропрусідного натрію з сірчанокислим амонієм;

- розчин аміаку.

Хід визначення:

У пробірку насипають трохи, так щоб було вкрите дно нітропрусідной суміші, і доливають 5 мл сечі, збовтують і обережно нашаровуються 2 мл аміаку. Фіолетово-червоне кільце, що з'явилося на кордоні двох рідин, свідчить про наявність у сечі ацетону.

Визначення білірубіну (проба Розіна)

Якісна реакція заснована на перетворенні білірубіну під впливом окислювачів (йоду) в білівердін зеленого кольору.

Реактиви:

- розчин Люголя або 1% спиртовий розчин йоду.

Хід визначення:

На 3 - 4 мл сечі обережно нашаровуються 1 - 2 мл 1% спиртового розчину йоду або розчину Люголя. За наявності жовчних пігментів (білірубіну) на кордоні рідин з'являється зелене кільце.

Оцінка: У нормі білірубін у сечі не міститься.

Визначення уробіліну (проба Флоренс)

Реактиви:

-- концентрована сірчана кислота;

- ефір;

-- концентрована соляна кислота.

Хід визначення:

До 10 мл сечі додають 3 - 4 краплі концентрованої сірчаної кислоти, змішують, доливають 2 - 3 мл ефіру, пробірку закривають гумовою пробкою і обережно змішують, не збовтуючи. В іншу пробірку наливають 2 мл концентрованої соляної кислоти. Піпеткою відсмоктують з першої пробірки ефірний шар і нашаровуються його на соляну кислоту. На кордоні рідин при наявності уробіліну утворюється червоно-фіолетове кільце різної інтенсивності.

Мікроскопічне дослідження

Приготування препарату:

У центріфужную пробірку наливають 10 - 15 мл сечі і центріфугіруют при 1000 - 1500 об/хв. 10 хвилин. Після центрифугирования пробірку швидко перекидають для видалення надосадову рідини, потім переводять у вихідне положення, щоб осад залишився на дні. Пастерівському піпеткою осад розмішують, невелику краплю осаду поміщають на предметне скло і накривають покривним. Мікроскопія проводиться спочатку під малим, а потім під великим збільшенням.

Елементи сечового осаду

Розрізняють організований (еритроцити, лейкоцити, епітеліальні клітини, циліндри) і неорганізований осад (солі).

Організований осад:

Еритроцити можуть бути незмінені у вигляді дисків жовтувато-зеленуватого кольору, що містять гемоглобін, і змінені (вилужені), вільні від гемоглобіну, безбарвні, вони мають вигляд одноконтурних або двоконтурних кілець. У нормі містяться одиничні еритроцити в препараті. Лейкоцити виявляються в сечі у вигляді невеликих зернистих клітин правильної округлої форми сірого кольору. Лейкоцити в сечі представлені нейтрофілами і містяться в невеликій кількості в нормальній сечі до 2000000 на добу). Видозмінені лейкоцити, так звані клітини Штернгеймера-Мальбіна. Для виявлення їх після центрифугування до осаду додають 1 - 2 краплі фарби, запропонованої Штернгеймером і Мальбіним, розмішують, краплю беруть на предметне скло, покривають покривним і мікроскопіруют. Клітини Штернгеймера-Мальбіна в 2-3 рази більше звичайних лейкоцитів, блідо-сині з блідо-синім або блідо-фіолетовим ядром, у цитоплазмі помітно рух гранул.

Клітини епітелію:

Плоский епітелій - великі (у 3 - 4 рази більше лейкоцитів), широкі полігональні клітини з одним ядром і дрібнозернистою цитоплазмою. Зустрічаються групами і пластами. Наявність цих клітин в сечі не має особливого діагностичного значення.

Клітини круглого епітелію - досить великі, правильної округлої або овальної форми з гомогенної або дрібнозернистою протоплазми і невеликим ядром. У нормальній сечі - Поодинокі.

Нирковий епітелій - невеликі круглі або кубічні клітини з великим пузиріковідним ядром і злегка зернистою протоплазми. У нормальній сечі не виявляються.

Циліндри - білкові або клітинні освіти канальцевого походження, мають циліндричну форму. У нормальній сечі може бути невелика кількість тільки гіалінових циліндрів (2000 за добу).

Гіалінові циліндри - зліпки білка, ніжні, бліді, майже прозорі освіти, прямі і покручені, кінці їх закруглені або неправильно обламаний.

Зернисті циліндри - короткі широкі -- складаються із зерен різної величини, мають темний, часто жовто-коричневий колір.

Фляки, циліндри - дуже товсті, короткі з жовтуватим кольором воску, добре контуріровани.

Епітеліальні циліндри мають чіткі контури, складаються із клітин ниркового епітелію.

еритроцитарні циліндри - жовтого кольору, складаються з маси еритроцитів. Ціліндроіди схожі на гіалінові циліндри, але не мають поздовжньої смугастість, контури їх неправильні, кінці роздвоюються.

Крім того, в осаді можуть бути: сперматозоїди, бактерії, дріжджові та інші грибки.

Неорганізований осад:

У кислому сечі зустрічаються:

Сечова кислота - Кристали різноманітної форми (ромбічної, шестигранною, у вигляді діжок, брусків тощо), забарвлені в червоно-бурий або жовтувато-бурий колір. Мікроскопічні кристали в осаді сили мають вигляд золотистого піску.

урати -- аморфні сечокислі солі - дрібні жовтуваті, часто склеєні групами зернятка. Мікроскопічно урати мають вигляд щільного цегляно-рожевого осаду.

Оксалати -- безбарвні кристали у формі поштових конвертів - октаедрів.

сірчанокисла вапно - тонкі, безбарвні голки або розетки. У лужної і нейтрального сечі зустрічаються:

Фосфати -- аморфні маси солей сіруватого кольору (дрібнозернисті). Мікроскопічно -- осад білого кольору.

Тріпельфосфати - Безбарвні яскраві кристали у вигляді гробових кришок або довгих призм.

сечокислий амоній - жовті непрозорі кулі з шипами на поверхні.

Функціональні проби нирок і кількісний метод визначення формених елементів

Проба по Зимницьким

У кожній з 8-ми отриманих порцій заміряють кількість сечі за допомогою мірного циліндра в визначають питома вага за раніше розібраної методикою. У нормі кількість сечі за суттю - 1000 - 1500 мл, кількість сечі в кожній порції 70 - 250 мл; денний діурез - 2 частини, нічний - 1 частина; коливання питомої ваги - 1012 - 1025.

Проба по Каковскому - Аддіс

Принцип дослідження полягає у визначенні числа формених елементів (еритроцитів, лейкоцитів, циліндрів) в добовій кількості сечі за допомогою

лічильної камери.

Посуд і обладнання:

Рахункова камера.

Градуйована центріфужная пробірка.

Мерная обіцянки.

Мікроскоп.

Хід дослідженні:

Кількість сечі, відповідне обсягу, виділеного за 1/5 години (за 12 хвилин), наливають у центріфужную пробірку і центріфугіруют при 2000 об/хв. протягом 5 хвилин. Піпеткою відсмоктують надосадову рідина, залишаючи 0,5 мл осаду. Осад змішують і піпеткою заповнюють лічильну камеру Горяєва. Вважають окремо лейкоцити, еритроцити, циліндри. Досліджуваний осад можна змішати з 1-2 краплями фарби

Штернгеймера в Мальбіна для виявлення наявності в сечі клітин Штернгеймера - Мальбіна. Підрахунок клітин відбувається під великим збільшенням в 100 будь-яких великих квадратах. Отримане кількість клітин 1 ММЗ множать на 60 000, дізнаються кількість формених елементів, виділених із сечею за добу. Для нормаль ної сечі кількість еритроцитів до 1 млн.; лейкоцитів до 2 млн., циліндрів до 2000.

бактеріоскопічне дослідження

бактеріоскопічне дослідження проводять, головним ПРО6 разом, з метою виявлення мікобактерій туберкульозу.

Хід дослідження:

Ранкову порцію сечі, зібрану в стерильний посуд, відстоюють. Утворений осад збирають піпеткою в центріфужную пробірку і центріфугіруют. З осаду готують мазки, добре висушують, фіксують над полум'ям і фарбують по Цилю Нільсену (див. розділ) і потім мікроскопіруют.

Мікобактерії туберкульозу, що мають вид паличок, пофарбовані в червоний колір і виразно виділяються на синьому тлі препарату.

Список літератури

Для підготовки даної роботи були використані матеріали з сайту http://study.online.ks.ua/