Ефективність впливу озону на перебіг перитоніту і процес спайкообразованія в експерименті

Незважаючи на великі успіхи в абдомінальній хірургії, проблеми перитоніту і спайковою хвороби до сих пір не втратили своєї актуальності [1, 2, 3, 9].

Останнім часом в медицині став, широко застосовуватися озон [4, 5, 6]. Однак практично немає робіт, присвячених впливу озону на перебіг перитоніту і спайкообразованія.

Метою нашого дослідження було вивчення впливу озону на розвиток перитоніту і спайкообразованія в експерименті.

Матеріали та методи

Експериментальні дослідження проводилися на 38 білих щурах породи Вістар, масою 140-160 р. Моделювання гострого розлитого перитоніту проводилося за методикою І.М. Байбекова і В.А. Хорошаева (1991) [7, 8].

Щури були розділені на 2 групи по 19 у кожній. Тваринам 1 (контрольної) групи, після розвитку у них розлитого перитоніту, проводилася серединна лапаротомія та осушення черевної порожнини від гною стерильними серветками. У нижньому кутку рани залишали поліхлорвінілових трубку і ушивати черевну порожнину.

Тваринам 2 групи, після осушення черевної порожнини від гною, її обдувало сухий озоно-кисневої сумішшю протягом 3-х хвилин. Озоно-кисневу суміш отримували за допомогою апарата отри-01, концентрація озону 5,8 мг/л. У них, також залишали дренажну трубку і ушивати черевну порожнину.

На 2 і 3 добу після операції щурам 2 групи через дренажну трубку в черевну порожнину вводили по 10 см3 сухий озоно-кисневої суміші ж концентрацією озону, після чого у тварин обох груп видаляли дренажні трубки.

На 3, 7 і 14 добу після операції тварин виводили з експерименту шляхом миттєвої лекапітаціі. Світлооптичному і електронномікроскопіческому дослідженню піддавалися зразки сальника, діафрагмальної частини очеревини, тонкого кишечника з брижі і спайки.

Препарати для світлооптичному дослідження готувалися по загальноприйнятою методикою.

Для трансмісійної електронної мікроскопії (ТЕМ) матеріал, фіксований в 2,5% розчині гдютарового альдегіду на 0,1 М фосфатному буфері (рН-7, 2) і в 1% розчині четирехокісі осмію, після дегідратації та просочення заливали в суміш Епона і аралдіта. Напівтонких і ультратонкі зрізи виготовляли на ультрамікротоме "Reichert Jung" (Reichert, Австрія) і фарбували, відповідно, метиленовим синім і основним фуксином або уранілацетатом і цитрату свинцю (Каруп В.Я., 1986). Ультратонкі зрізи досліджували в електронному мікроскопі Н-600 (Hitachi, Японія).

Для скануючої електронної мікроскопії (СЕМ) зразки після дегідротаціі висушували методом критичної точки в апараті "НСР-2" (Hitachi, Японія). З частини матеріалу, залитого в смолу, робили зрізи товщиною 6-8 мкм. Їх наклеювали на покривні скла або алюмінієву фольгу, і після видалення смоли в насиченому розчині гідроксиду натрію висушували в абсолютному етанолі, напилюють золотом і досліджували в СЕМ.

Через 3 дні після операції у тварин контрольної групи макроскопічно петлі кишечнику роздуті, є мутний випіт, поверхня очеревини тьмяна з гнойнофібрінознимі накладеннями. Відзначається наявність вираженого спайкового процесу. Спайки легко рвуться й розташовані переважно між петлями тонкої кишки.

При гістологічному дослідженні у великому сальнику виявлені набряк і виражена поліморфно-клітинна інфільтрація, з переважанням поліформно-ядерних нейтрофільних лейкоцитів. Судини розширені, в просвіті багатьох з них тромби. Аналогічна картина має місце в брижі тонкої кишки і діафрагмальної частини очеревини.

Скануюча електронна мікроскопія (СЕМ) очеревини показує різке розширення міжклітинних щілин, і навіть розбіжність мезотеліоцітов. На поверхні мезотеліом розташовуються пасма фібрину, перитонеальні макрофаги й гладкі клітини. Поверхня багатьох мезотеліоцітов з невеликими ерозіями.

трансмісійна електронна мікроскопія (ТЕМ) показує виражене розширення просвіту мікросудин. Цитоплазма ендотеліоцитів проточила, вакулізірована. Під мезотеліоцітамі визначається скупчення транссудату.

При гістологічному дослідженні спайок встановлено, що їх основу складає пухка сполучна тканина, що складається з ніжних колагенових волокон, між якими розташовуються фібробласти. Є також макрофаги та лімфоїдні клітини.

При електронно-мікроскопічному дослідженні спайок їх поверхня місцями вистелена мезотеліоцітамі продовгуватої форми, апікальною поверхня яких вибухає в просвіт черевної порожнини. На поверхні цитоплазматичної мембрани клітин є велика кількість мікроворсинок.

Через 7 діб після операції в черевній порожнині кількість випоту зменшується. Набряклість очеревини збережена, мають місце міжкишкових абсцеси. Спайкові процес поширений по всій черевної порожнини. Спайки переважно розташовуються між петлями тонкої кишки, вони більш грубі.

світлооптичному дослідження очеревини показали, що запальні зміни менш виражена, рідше зустрічаються розширені судини з тромбами. Виявляються ділянки очеревини з порушеною мезотеліальної вистилки.

СЕМ та ТЕМ дослідження показують, що в зонах з порушеною мезотеліальної вистилки, мезотелеоціти мають уплощенная форму з досить великими ядрами і ядерцем. У цитоплазмі клітин зустрічаються нечисленні мітохондрії і профілі зернистою ендоплазматичної мережі.

При гістологічному дослідженні встановлено, що основу спайок становить пухка сполучна тканина, що складається з тонких пучків коллагенових' волокон, між якими розташовуються фібробласти і нечисленні кровоносні капіляри. Фібробласти мають довгасту форму, ядра їх великі, гіперхромні. Кровоносні судини вистелені ендотеліальними клітинами з овальними ядрами. З боку вісцеральної очеревини в товщу спайок вростають клітини гладеньких м'язів, джерелом яких є середня оболонка кишки. Крім вищеописаних структур в товщі спайок виявляються нечисленні макрофаги, лімфоцити та поодинокі нейтрофільні лейкоцити. Поверхня спайок вистелена мезотеліальних клітинами.

На 14 добу в черевній порожнині є випад на незначній кількості, в ряді випадків виявляються інкапсульованими міжкишкових абсцеси. Мікроскопічна мезотеліальної вистилка очеревини відновлює свою цілісність. Однак клітини залишаються набряклими, куполоподібної зміненими. Ендоплазматична мережа зерниста і вакуолізірована. Розширення капілярів, явища стазу і сладжірованіе еритроцитів виражені в меншою мірою.

Спаечний процес в черевній порожнині залишається вираженим. Спайки грубі, різної форми в деяких місцях вони пережимають петлі кишечника. При гістологічному дослідженні спайок відзначається збільшення змісту колагенових волокон, пучки їх більш товсті і грубі, кілька зменшується вміст фібропластов. Останні приймають витягнуту форму з видовженими ядрами. Виявляються макрофаги, поодинокі лімфоцити і гладком'язові клітини. Поверхня спайок вистелена сплощеним мезотелеонітамі.

У контрольній групі падіж тварин склав 52,6%

У другій групі тварин, яким застосовувався озон, на 3 добу після операції в черевній порожнині макроскопічно розташування петель кишечнику не порушено, наявний випіт напівпрозорий і в невеликій кількості. Очеревина злегка потовщена, гладка, на її поверхні визначаються нечисленні пасма фібрину. Відзначається наявність лише поодиноких тонких, коротких спайок, які легко рвуться і не деформують кишечник.

світлооптичному дослідження показали, що запальні зміни виражені в значно меншому ступені. Цілісність мезотеліальної вистилки менш порушена, ніж у тварин контрольної групи. Поодинокі утворилися спайки представлені ніжними пучками колагенових волокон і фібробластами. Поодинокі утворилися спайки представлені ніжними пучками колагенових волокон і фібробластамію. Тут не зустрічається гладком'язових клітин.

На 7 добу макроскопічно очеревина чиста, блискуча, випоту немає. Мають 1-2 спайки, які легко рвуться і не деформують кишечник.

При світлооптичному дослідженні різних відділів очеревини наголошується невелика інфільтрація поліморфно-клітинними елементами з домінуванням лімфоцитів. Виявляються незначні переваскулярние інфільтрати і помірне потовщення стінок судин без тромбів. В стінці тонкої кишки помірна інфільтрація виявляється лише в стромі ворсинок і між ними. Ворсинки правильної форми без десквамації клітин. У епітеліальної вистилки ворсинок переважають призматичні клітини.

Серозна оболонка тонкої кишки без виражених ознак запалення й ушкодження. Кровоносні судини мають звичайну структуру.

СЕМ та ТЕМ також свідчать, що озонотерапія приводить до значної редукції патологічних змін ультраструктур, викликаних експериментальним перитонітом. На поверхні мезотеліоцітов визначаються довгі і тонкі мікроворсинки. У цитоплазмі мезотеліоцітов розташовуються досить численні мітохондрії і поодинокі профілі зернистою ендоплазматичної мережі. Підлягають судини помірно розширені. Ендотелеоціти з рівною просветний поверхнею і вузької цитоплазмою.

Основу спайок становить пухка сполучна тканина, представлена тонкими, пухко розташованими колагеновими волокнами, фібробластами і кровоносні капіляри. У порівнянні з аналогічним терміном в контрольній групі кількість фібробластів і кровоносних капілярів істотно нижче.

На 14 добу макроскопічно в черевній порожнині випоту немає, очеревина чиста, петлі кишечника лежать вільно. Виявлені одиничні спайки короткі, тонкі, легко рвуться. У 78,9% тварин спайки не виявлені. Світлооптичному, СЕМ та ТЕМ дослідження показали, що очеревина має звичайну структуру.

Будова спайок істотно відрізняється від такого в контрольній групі, в наявності ознаки, що вказують на зниження синтетичної активності фібробластів: розміри клітин зменшені, знижено їх кількість, зміст колагенових волокон також зменшено.

Наші дослідження показують, що застосування озону є досить ефективним при експериментальному перитоніті і зменшує інтенсивність процесу спайкообразованія. Озон може бути рекомендовано в клінічній практиці для лікування та профілактики аналогічної патології.

Список літератури

1. Баїра Г.А. Спаєчна непрохідність кишечника.// В кн., Термінова хірургія дітей,, Санк-Петербург, 1997. С. 189-200

2. Баїра Г.А. Рошаль Л.М. Гнійна хірургія у дітей /-М. -1991 С. 41-48

3. Женчевскій В.А. Спаєчна хвороба-М. : Медицина. 1989, стор 10-15.

4. Перетягін С.П. Озонотерапія// Методичні рекомендації. Н. Новгород. -1996 С.14

5. Сеппо А. і співавт. Окислювальні препарати і озон як дезінфіцурующіе та антибактеріальні засоби. Таллінн, -1996 Том 1, с. 73-78.

6. Салімов Ш.Т. і співавт. Озонотерапія в комплексному лікуванні гнійно-запальних захворювань у дітей.// Актуальні питання дитячої хірургії. Республіканський збірник наукових праць. Андижан, - 1997, с. 157-160.

7. Хорошаев В.А. Байбеков І.М. Ворожейкин В.М. Морфологія мезотеліацітов капсули печінки в нормі і при експериментальному перитоніті.// Бюлетень експериментів біології та медіціни.-1988, - № 9, С.374-377.

8. Хорошаев В.А. Патоморфологічні особливості очеревини при гострому розлитому перитоніті.// В кн. "Перитоніт",-Новосибірськ, -1994 С. 34-36.

9. Цуман В.Г. Машков А.Є. Косарєв В.А. и др.// Хірургія. -1994. - № с.23-25

Для підготовки даної роботи були використані матеріали з сайту http://goldref.ru/