Пташиний грип
Лобанова Т.П.,
Кіхтенко Н.В., Відділ науково-технічної інформації ГНЦ ВБ
"Вектор", Кольцово Новосибірської обл.
1. Загальна інформація
Віруси
грипу типу А можуть інфікувати декілька видів тварин, включаючи птахів,
свиней, коней, тюленів і китів. Віруси грипу, які інфікують птахів,
називають "вірусами пташиного грипу". Вірус пташиного грипу зазвичай не
передається людині безпосередньо від птахів і не циркулює серед людей. Вірус грипу
А може бути розділений на субтипу на підставі їхніх поверхневих протеїнів --
гемаглютиніну та нейрамінідази. Всього відомо 15 субтипов геамагглютініна і 9
субтипов нейрамінідази. Однак з 135 пар комбінацій у природі зустрічаються
тільки 46 (1), і лише 22-25 з них знайдені серед вірусів грипу,
ідентифікованих у популяції птахів, а саме: Н1N1 - H2N2 - H2N3 - H3N2 - H3N8
- H4N2 - H4N4 - H4N6 - H4N8 - H5N1 - H5N2 - H5N9 - H6N1 - H6N2 - H6N5 - H6N9 --
H7N1 - H7N2 - H7N3 - H7N7 - H9N2 - H9N8 - H10N7 - H11N9 (1,2).
Птахи
відіграють особливу роль, оскільки всі субтипу гемаглютиніну виявлені серед диких
птахів, які вважаються природними господарями вірусу грипу А. При цьому тільки
три субтипу гемаглютиніну (Н1, Н2 і Н3) і два типи нейрамінідази (N1 і N2)
широко циркулюють серед людей.
Пташиний
грип зазвичай не викликає захворювання серед диких птахів, проте серед домашніх
птахів викликає важке захворювання і загибель. Віруси пташиного грипу, як
правило, не інфікують людей, однак відомі випадки захворювання і навіть загибелі
серед людей під час спалахів 1997-1999 та 2003-2004 року. Мабуть, людина
є кінцевою ланкою в передачі вірусу пташиного грипу, тому що до цих пір не
зафіксовано випадків передачі цього вірусу від людини людині.
2. Характеристика пташиного грипу у птахів
2.1 Резервуар та шляхи перенесення
Водоплавні
птахи є природними господарями вірусу грипу, переносять його в кишечнику і
виділяють в навколишнє середовище зі слиною, респіраторних і фекальним матеріалом.
Найбільш звичайний шлях поширення вірусу - фекально-оральна трансмісія.
Більшість
вірусів грипу не викликають ніяких симптомів або викликають дуже слабкі симптоми
хвороби у диких птахів, проте коло симптомів у птахів широко варіює в
залежно від штаму вірусу і види птахів. Інфекція подібними вірусами грипу А
(наприклад, деякі штами Н5 і Н7), може викликати широко розповсюджується
хворобу і загибель серед деяких видів диких і особливо домашніх птахів, таких
як кури та індички.
Вважається,
що первинним резервуаром вірусів грипу є різні перелітні птахи,
що належать до загонів Anseriformes (дикі качки та гуси) і Charadriiformes
(чаплі, сивки і крячки). З 1961 р. по теперішній час у Північній Америці,
Європі, Індії, Японії, Південній Африці та Австралії вірус грипу птахів був виділений,
по крайней мере, у 90 представників 12 загонів птахів, у тому числі 40 - з
наявних 149 видів птахів, що належать до загону Anseriformes (ніяких
ознак захворювання, асоційованого з інфекцією вірусом грипу птахів
відмічено не було), і в, принаймні, 20 видів птахів з ряду
Charadriiformes (3). Останні поширені по всьому світу і в основному
представлені птахами, що мігрують на далекі відстані. Інші види птахів не
представляють інтересу як довгострокові резервуари вірусу грипу.
Водні
птахи є резервуаром всіх п'ятнадцяти підтипів вірусу грипу А типу. У
диких качок вірус грипу розмножується переважно в клітинах, які вистилають
шлунковий тракт, при цьому жодних видимих ознак захворювання вірус не
викликає і у високих концентраціях виділяється з фекаліями. Вірус пташиного грипу
успішно виділяли зі свіжих фекальних мас, а також з неконцентрірованной
озерної води. Це говорить про те, що водоплавні птахи переносять вірус грипу
з високою ефективністю через фекальні маси і водойми (4).
Авірулентная
природа інфекції, що викликається вірусом пташиного грипу у качок і болотних птахів, може
бути результатом адаптації до даного господареві протягом кількох сотень
років. Таким чином, був створений резервуар, що забезпечує безсмертя вірусу
грипу, і, отже, качки та болотні птахи безсумнівно грають важливу роль в
природної історії вірусів грипу. До теперішнього часу зареєстровано
участь вірусів грипу пташиного походження в епідемія грипу у таких
ссавців як котики (5), кити (6), свині (7), норки (8) і коні (9),
так само як і у свійської птиці (10). Випадки перенесення вірусів грипу в популяцію
свиней були відзначені в 1970, 1996 та 2004рр. (11). Оскільки свині можуть хворіти
як пташиний, так і людським грипом, це ще одна можливість для подолання
міжвидового бар'єру вірусом пташиного грипу.
Показано,
що авірулентний вірус, постійно циркулює в природі серед диких
водоплавних, може стати на високопатогенний для домашньої птиці в результаті
циркуляції серед домашніх курей (12).
Вивчення
родоводів вірусів грипу в різних видах птахів показало, що віруси грипу
птахів у Євразії та Америці еволюціонували незалежно. Таким чином, міграція
між цими двома континентами (широтна міграція) практично не грає ролі в
трансмісії вірусу грипу, у той час як птахи, що мігрують по довготі,
мабуть, вносять вирішальний внесок у триваючий процес еволюції вірусу
грипу (13).
Чотири
основні шляхи міграції птахів, перелітають на значні відстані, в
особливості ржанок, перетинають територію Росії (вказані з заходу на схід):
східноафриканської-Євразійський
Центральноазіатський-Індійський
Східноазіатський-Австралійський
Западнотіхоокеанскій
Найбільше
значення для Росії мають Центральноазіатський-Індійський і
Східноазіатський-Австралійський шляхи міграції, оскільки вони включають перельоти
з Сибіру через Киргизію в Малайзію через Гонконг і в Китай через Західну
Сибір.
Епізоотія в країнах Східної Азії
В
даний час спостерігається епізоотія пташиного грипу в країнах Східної Азії.
Дані щодо захворювання на пташиний грип в Азії представлені в Табл.1.
Таблиця
1. Дані щодо захворювання на пташиний грип серед тварин в Азії (дані на 2
лютий 2004; OIE)
Країна
Тип вірусу
Дата
Корея
H5N 1
грудня 2003
В'єтнам
H5
січня 2004
Японія
H5N1
січня 2004
Китай (Тайпей)
H5N2
січня 2004
Таїланд
H5
січень-лютий 2004
Камбоджа
H5N1
січня 2004
Гонконг (SARPRC)
H5N1
січня 2004
Лаос
H5
січня 2004
Пакистан
H7
січня 2004
Китай
H5N1
січня 2004
Індонезія
H5N1
січня 2004
Більше
докладно опис випадків захворювання, діагностики та протиепідемічних
заходів серед домашньої птиці дано нижче.
Таблиця
2. Характеристика спалахів захворювання пташиним грипом серед тварин у
січні-лютому 2004 року в Азіатському регіоні (за даними OIE).
Японія
Вид
тварин: Птахи
сприйнятливих
тварин: 34,640
Тварин
загинуло: 14,985
Знищено
тварин: 19,655
Додатки
з епідеміології: Джерело і шляхи передачі інфекції невідомі.
Таїланд
(Banlam
Sub-District, Bandplamah District, Supanburi Province), 1 ферма
Вид
тварин: Кури-несучки у віці близько 8 місяців в одному вентильованому
приміщенні (традиційна практика)
Тип
вірусу: Н5
сприйнятливих
тварин: 66,350
Випадки
захворювання: 8,750
Тварин
загинуло: 6,180
Знищено
тварин: 60,170
Як
поставлений діагноз: Клініка, лабораторні дослідження загиблих тварин (методи
інгібування гемаглютинації (РТГА), преципітації на агарових гелі, виділення
вірусу, внутрішньовенне тестування патогенності вірусу)
Додатки
з епідеміології: Джерело і шляхи передачі інфекції невідомі. Інфікована
ферма охоплює 8 приміщень, шість з яких побудовані над ставком для
розведення риби. Поруч знаходяться дві інші маленькі ферми, але в них інфекція
не виявлено. Ферми оточені рисовими полями.
Заходи
контролю: Локалізація і придушення спалаху, карантин, пересувний контроль
усередині країни, скринінг, району, вакцинація заборонена
Корея
(Eumsung
district, Chungcheong-buk province, в центральній частині країни), 2 ферми,
другий спалах в 2,5 км від першого.
Вид
тварин: Одна ферма з розведення курчат-бройлерів (26000 курчат у віці 47
тижнів) і одна ферма з розведення каченят (3300 каченят у віці 43 тижнів)
Тип
вірусу: Н5N1
сприйнятливих
тварин: 29,300
Випадки
захворювання: 24,300
Тварин
загинуло: 21,000
Знищено
тварин: 8,300
Як
поставлений діагноз: Інгібіція гемаглютинації (РТГА), ПЛР, Інгібіція
нейрамінідази, цитопатичної ефект
Додатки
з епідеміології: Джерело і шляхи передачі інфекції невідомі. Поблизу першим
ураженої ферми часто спостерігалися перелітні птахи на сусідньому кукурудзяному
поле. І були взяті на дослідження зразки від качок з ферми, яка знаходиться в 3 км від
перший зараженої ферми.
Заходи
контролю: Локалізація і придушення спалаху на перший ураженої фермі,
знищення на сусідній фермі з виробництва яєць і другого зараженої качиної
фермі, поховання кормів, фекалій і столових яєць на першому зараженій фермі,
поховання яєць, призначених для висиджування (67000 яєць типу А). Карантин,
скрініг, зонування: обмеження були накладені на ферми в радіусі 10 км від
перший ферми. Дезінфекція і велике спостереження в радіусі 10 км зони,
вакцинація заборонена
Бангладеш
Вид
тварин: Випадки загибелі птиці ніяк не пов'язані з пташиним грипом. Однак
прийняті додаткові заходи безпеки: додатковий сіро-моніторинг
птахоферм.
Як
поставлений діагноз: Клінічні та лабораторні дослідження полеглої птиці
Індонезія
Вид
тварин: Всього зареєстровано 127 спалахів у 11 провінціях. Настрашене в
основному кури-несучки і виробники. Настрашене кури-бройлери, качки, перепела і
молоді курчата.
Тип
вірусу: H5N1
сприйнятливих
тварин: 20,200,000
Тварин
загинуло: 4,700,000
Як
поставлений діагноз: преципітації в агарових гелі, інгібування гемаглютинації
(РТГА), внутрішньовенне тестування патогенності вірусу, RT-PCR, сіквенсів ДНК
Додатки
з епідеміології: Джерело невідомий. Шляхи розповсюдження: пересування живої
свійської птиці, продукти з домашньої птиці та побічні продукти, піддони для яєць
та обладнання.
Заходи
контролю: Карантин, контроль пересування всередині країни, змінена політика.
Локалізація і придушення спалаху, вакцинація, зонування
Індонезія
Вид
тварин: З листопада 2003 року по 25 січня 2004 року в країні загинуло близько 4,7
мільйонів курей і 40% з них було інфіковано пташиним грипом і хворобою
Нью-Касла
Китай
Вид
тварин: Північний, Південний і Центральний Китай, всього 12 вогнищ
Тип
вірусу: H5N1
Заходи
контролю: Після першого спалаху була перекрита уражена область, знищено
все поголів'я домашньої птиці в радіусі трьох кілометрів і оголошено карантин у
радіусі 5 кілометрів. Були запущені і інші превентивні заходи.
Китай
(місто
Тайпей, додаткова інформація)
Як
поставлений діагноз: У кожному осередку 3 курки досліджувалися після загибелі
Додатки
з епідеміології:
Заходи
контролю: Локалізація і придушення спалаху, карантин, контроль пересування на
всій території, скринінг, контроль резервуара дикого поголів'я птиці.
Вакцинація заборонена.
Камбоджа
Вид
тварини: 1 птахоферма (Pong Peay village, Sangkat Phnom Penh Thmei, Khan
Russei Keo, Phnom Penh), вражені кури-несучки
Тип
вірусу: H5N1
сприйнятливих
тварин: 7,500
Випадки
захворювання: 3,300
Тварин
загинуло: 3,300
Знищено
тварин:
Як
поставлений діагноз: Клінічні та лабораторні дослідження, RT-PCR
Додатки
з епідеміології: Джерело невідомий.
Заходи
контролю: Локалізація і придушення спалаху. Дезінфекція і карантин
інфікованої ферми. Контроль за пересуванням тварин
Гонконг
Вид
тварин: Одна спалах в Gold Coast, New Territories, звичайний сокіл
(сапсан, peregrine falcon)
Тип
вірусу: H5N1
Випадки
захворювання: 1
Тварин
загинуло: 1
Як
поставлений діагноз: Клінічні та лабораторні дослідження загиблих тварин.
Інокулірованіе курячих ембріонів, РТГА з використанням специфічної сироватки
з Англії), RT-PCR, сіквенсів ДНК.
Додатки
з епідеміології: Зазвичай це рідкісні і зимові візитери Гонконгу, постійно в
Гонконзі перебуває від 10 до 50 соколів. Ведеться постійний моніторинг диких
птахів. За 2003 рік було взято на аналіз більше 6000 мазків і не було виявлено
жодного випадку на місцевих птахофермах і серед диких птахів з березня 2003 року.
Місцеві птахоферми знаходяться під постійним контролем сістеи безпеки,
включаючи серологічне і вірусоогіческое тестування. Крім того, кожна ферма
має свій план з біобезпеки, який включає забезпечення захисту птахів від
будь-яких втрат. На всіх фермах все поголів'я вакцинується вакциною H5N2 і в
кожної партії курей залишається 60 невакцинованих особин для контролю і
моніторингу протягом всього життя стада.
Заходи
контролю: Проведено широке обстеження оптових ринків живої птиці, пташиних
парків і популяцій диких птахів в усьому Гонконзі. Розповсюдження вірусу не
виявлено.
В'єтнам
Вид
тварин: З 8 січня 2004 по 24 січня 2004 року виявлено 445 нових
вогнищ.
Тип
вірусу: H5N1
сприйнятливих
тварин: 2,890,511
Знищено
тварин: 2,890,511 (скоріше, це не забиті, а загиблі тварини)
Заходи
контролю: Локалізація і придушення спалаху. Карантин. Контроль пересування
всередині країни. Скринінг.
Лаос
Вид
тварини: 1 птахоферма (village of Nonsavang, close to Vientiane). настрашене
кури-несучки
Тип
вірусу: H5N1
сприйнятливих
тварин: 3,000
Тварин
загинуло: 2,700
Знищено
тварин: 300
Як
поставлений діагноз: Клінічні та лабораторні дослідження загиблих тварин
РТГА
Додатки
з епідеміології: Джерело інфекції невідомий.
Заходи
контролю: Локалізація і придушення спалаху. Карантин. Контроль пересування.
Активна програма безпеки і вибракування, Регіональна координація
Пакистан
Вид
тварин: 3 вогнища в штаті Karachi, провінція Sindh. Настрашене кури-несучки на
комерційних фермах.
Тип
вірусу: Н7
сприйнятливих
тварин: 6,400,000
Випадки
захворювання: 2,500,000
Тварин
загинуло: 1,200,000
Знищено
тварин: 500,000
Як
поставлений діагноз: Клінічні та лабораторні дослідження загиблої птиці.
Уражені кури були блідими і виснаженими, у них спостерігалися симптоми
респіраторного захворювання і дуже низька продуктивність. Яйця були
неправильної форми і без шкаралупи. У несколькіз випадках спостерігалася кривошия.
Лабораторні дослідження загиблих тварин: геморагічні ураження на
мигдалеподібних залозах преджелудка і сліпої кишки. Незапліднених яйця
геморрагічни. Спостерігалося кілька ентеритів і перитоніту. Нирки роздуті,
селезінка збільшена. Діагностичні методики: Інокуляція на курячих ембріонів,
іммунодіффузія в агарозном гелі, РДА та РТГА, преципітації в агарових гелі.
Додатки
з епідеміології: Джерело невідомий. Спосіб розповсюдження: прямий контакт,
неправильна утилізація загиблих птахів і перенесення дикими птахами. Зграї
вакцинували полівалентної вакциною, що зберегла свої протективного властивості.
Чи не повідомлялося ні про один випадок на бройлерних птахофермах, втім, повний
моніторинг ситуації ще не закінчений.
Заходи
контролю: Все, що залишилися, птиці на заражених фермах були піддані карантину
і провакцинували проти пташиного грипу. Були прийняті зоосанітарних заходів і
обмежено переміщення тварин. Взято під контроль резервуар диких птахів.
Зонування. Продовжено дослідження ареалу для пошуку джерела інфекції.
2.2. Клінічні прояви та
імунітет у птахів
Незважаючи
на високу летальність вірусу грипу H5N1, більшість домашніх курей у Гонконгу
не виявляли жодних клінічних ознак хвороби. У цей же самий час у
популяції курей циркулював вірус грипу H9N2. При вивченні ролі вірусу H9N2 в
захисту курей від летальної вірусної інфекції H5N1 виявилося, що сироватка від
курей, інфікованих вірусом H9N2, не дає перехресних реакцій з вірусом H5N1 в
реакції нейтралізації і реакції інгібування гемаглютинації. Більшість курей,
інфікованих вирусом грипу H9N2 за 3-70 днів до контрольного зараження
вірусом H5N1, виживали при контрольному зараженні, однак інфіковані птиці
виділяли вірус грипу H5N1 у випорожненнях. Адаптивний перенесення Т лімфоцитів або
Т-клітин CD81 від інбредних курей (B2/B2), інфікованих вірусом грипу H9N2, до
нативним інбредних курям (B2/B2) захищав їх від летального вірусу H5N1. In vitro
цитотоксичності аналіз показав, що Т-лімфоцити або Т-клітини CD81 від курей,
інфікованих вірусом грипу H9N2, розпізнають клітини-мішені, інфіковані
як вірусом пташиного грипу H5N1, так і H9N2 в залежності від дози. Це
показує, що перехресний клітинний імунітет, індукований вірусом грипу
H9N2, захистив домашніх курей від летальної інфекції H5N1 в Гонконгу в 1997 році,
проте не запобіг виділення вірусу з фекаліями. Крім того, це
доводить, що перехресний клітинний імунітет може змінити результат інфекції
пташиного грипу у свійських птахів і створити ситуацію збереження вірусу пташиного
грипу H5N1 (14).
Проводилося
та порівняння різних вакцин. Три вакцини - вакцина на основі інактивованої
цілого вірусу, вакцина на основі гемаглютиніну вірусу пташиного вірусу,
отриманого з бакуловіруса, і вакцина на основі рекомбінантного гемаглютиніну
вірусу пташиного грипу - були протестовані на їхню здатність захищати курчат
проти високопатогенного вірусу пташиного грипу Н5. Вакцини й контрольні
віруси (або їх білкові компоненти) були отримані з польових штамів вірусу
пташиного грипу різного походження і включали штами, отримані з 4
континентів, 6 видів господарів і протягом 38-літнього періоду. Вакцини захищали від
прояву клінічних симптомів і зменшували кількість вірусу, що виділяється
птахом, і титр вірусу, що виділяється за введенням гемаглютиніну контрольного
вірусу пташиного грипу Н5. Імунізація цими вакцинами повинна знизити
поширення вірусу пташиного грипу через респіраторний і травний
тракт і зменшити передачу інфекції від птиці до птиці. Хоча найбільш значуще
зменшення виділення вірусу через респіраторний тракт результат, коли
вакцина була найбільш схожа з контрольним вірусом, генетичний дрейф вірусу
пташиного грипу не повинен впливати на основну захист, як і у випадку
людського грипу (15).
Інфекція
серед домашньої птиці може бути неочевидною або викликати респіраторні
захворювання, зменшення несучості або швидке фатальне системне
захворювання, відоме як високопатогенний пташиний грип. Нейтралізуючі
антитіла до білків гемаглютиніну та нейрамінідази забезпечують первинну захист
проти хвороби. Різні вакцини нейтралізують викликають вироблення антитіл,
включаючи вбиті цельновіріонние вакцини і рекомбінантні вакцини на основі
вірусу вакцини. Мабуть, антигенний дрейф вірусу у випадку пташиного грипу
відіграє меншу роль при невдалому вакцинації в порівнянні з грипом
людини. Цитотоксичних Т-лімфоцітний відповідь може зменшувати виділення вірусу
в навколишнє середовище в разі нізкопатогенного пташиного грипу, але забезпечує
спірну захист проти високопатогенного пташиного грипу. Вірус грипу може
безпосередньо впливати на імунну відповідь інфікованих птахів, проте роль МХ гена,
інтерферонів та інших цитокінів у захисті проти пташиного грипу залишається
невідомою (16).
3. Характеристика пташиного грипу у людини
3.1. Випадки захворювання
пташиний грип серед людей
1997
- У Гонконгу, вірус пташиного грипу (H5N1) інфікував як курей, так і людей.
Це був перший випадок, коли виявилося, що вірус пташиного грипу може
безпосередньо передаватися від птахів людині. Під час цього спалаху 18 осіб (9 дітей
та 9 дорослих) були госпіталізовані і 6 з них (1 дитина та 5 дорослих)
загинули. Для ліквідації спалаху було знищено 1,5 мільйона курей з метою
знищення джерела вірусу. Вчені визначили, що вірус поширився
безпосередньо від птахів до людини, хоча не виключалася можливість перенесення і від
людини до людини.
1999
- У Гонконгу, вірус пташиного грипу А H9N2 інфікував двох дітей. Обидві дитини
одужали, інших випадків захворювання зареєстровано не було. Дослідження
показали, що джерелом інфекції була домашня птиця, від якої вірус
безпосередньо передався людині. Однак можливість передачі вірусу від людини до
людині повністю не виключалася. Крім того повідомлялося про кілька випадків
інфекції вірусом H9N2 серед людей в материковій частині Китаю у 1998-1999 роках.
2003
- Два випадки інфекції пташиного грипу H5N1 відбулися в Гонконгської сім'ї,
що приїхала з Китаю. Одна людина загинула, інша видужав. Де і як відбулося
зараження цієї сім'ї, не встановлено. Інший член цієї родини загинув від
респіраторного захворювання в Китаї, але тестування цього випадку проведено не
було. Про інші випадки захворювання не повідомлялося.
2003
- Два випадки інфекції вірусом пташиного грипу H7N7 серед робітників птахоферм і
членів їх сімей були встановлені в Нідерландах під час спалаху пташиного грипу
серед свійської птиці. Вірус був виявлений у 86 людей, які доглядають за
зараженою птицею, та 3 осіб - членів їх сімей (17). Симптоми найчастіше
обмежувалися інфекцією очей з деякими симптомами респіраторних захворювань,
однак 1 пацієнт загинув (ветеринар, який відвідував уражену ферму). Є декілька
можливих випадків передачі вірусу від людини людині.
2003
- Встановлена інфекція H9N2 у дитини в Гонконзі. Дитина була госпіталізована
та видужав.
2004
- Спалах пташиного грипу H5N1 серед людей:
Країна
Дата
Опис захворювання
Китай
січня 2004
Загибель 8 чоловік за останні кілька тижнів
Таїланд
23.01.2004
Забойщик птиці, один з шести тайців, протестованих
на хворобу, помер від пневмонії
В'єтнам
23.01.2004
4 з 5 загиблих - діти, захворіли ще два хлопчика
Таїланд
26.01.2004
Загинув шестирічний хлопчик
Азія
29.01.2004
Було підтверджено 11 випадків захворювання на пташиний грип
серед людей, більшість з них серед дітей - 8 випадків у В'єтнамі та 3 - у
Таїланді. Все, крім трьох випадків, були фатальні - 6 у В'єтнамі і 2 в
Таїланді
В'єтнам
січня 2004
З 14 чоловік, хворіли на пташиний грип у Ханої і
прилеглих провінціях 11 з 13 дітей і мати однієї дитини померли
3.2. Епідеміологія захворювання (резервуар, механізм
передачі, сприйнятливість і імунітет, особливості епідеміологічного
процесу)
В
травні 1997р. 3-річний хлопчик у Гонконгу страждав від лихоманки, виразках в горлі і
кашлю. Його хвороба тривала близько 2 тижнів і він помер від пневмонії. З трахеальних
рідини було виділено вірус грипу А, однак він не міг бути тіпірован
стандартними реагентами. Це змусило думати про новий штамі. У серпні 3
лабораторії незалежно ідентифікували цей вірус як штам нового для людей
грипу А (H5N1). До захворювання хлопчик мав контакт з інфікованими курми.
Таким чином, це був перший підтверджений документально випадок інфекції
А вірусом пташиного грипу H5N1 у людини. До цього випадку вважалося, що вірус
пташиного грипу вражає тільки птахів. Потім інфекція цим же вірусом була
підтверджена у 17 інших пацієнтів у віці від 2 до 60 років. До січня 1998
року 6 осіб померли від хвороби. Прямих доказів передачі вірусу від
людини до людини немає: всі інфіковані (навіть живуть разом в одній кімнаті)
мали контакт з інфікованою птицею. Ніяких вакцин для цього штаму немає, і в
даний час вживаються спроби знайти кандидатна вакцинний штам для
розробки та виробництва комерційної вакцини (18).
Основні
відмінні риси вірусу зразка 2004 року коротко можна сформулювати
наступним чином:
Вірус
став більш вірулентним, що свідчить про мутації вірусу.
Вірус
подолав міжвидової бар'єр від птахів до людини, однак поки немає доказів
того, що вірус передається безпосередньо від людини до людини (всі хворі люди
мали прямий контакт із зараженою птицею).
Вірус
вражає й убиває в основному дітей.
Джерело
зараження й шляхи поширення вірусу не визначені, що робить ситуацію з
поширенням вірусу практично не контрольованою.
Заходи
щодо запобігання розповсюдження - повне знищення всього поголів'я птиці.
Спалах
пташиного грипу в Гонконгу з особливою виразністю продемонструвала роль
домашньої птиці як джерела інфекції для людини (19).
В
травні 2001 року вірус грипу А субтипу H5N1 був виділений з м'яса качок,
імпортованого до Північної Кореї з Китаю. Незважаючи на те, що цей ізолят НЕ
був настільки патогенів, як виділений в 1997 році, сам факт виділення
високопатогенного вірусу грипу H5N1 з домашньої птиці говорить про те, що
циркуляція вірусу в Китаї триває і може становити ризик переносу
вірусу від птахів до людини (20). Перманентна циркуляція вірусу пташиного грипу
типів H5N1 і H9N2, що подолали видовий бар'єр від птахів до людини в 1997 і
1999, потенційно може викликати пандемію серед людей (21). Однак, незважаючи на
те, що вірус пташиного грипу володіє деякими ознаками пандемічного
вірусу, він не має здатності швидко розповсюджуватися серед популяції
людей (22), що є необхідною умовою для виникнення пандемії.
Пташиний
вірус важко зупинити, оскільки вірус, очевидно, мутував з часу
останнього спалаху в Гонконгу в 1997 і 2003 роках. Мігруючі птахи можуть
поширювати його, що підтверджує той факт, що в Гонконгу був знайдений
загиблий звичайний сокіл (сапсан), який переносить цей вірус (23).
В
відміну від вірусу 1997 і 2003 року вірус H5N1 зразка 2004 року став більш
вірулентним, про що свідчить незвичайно велика кількість загиблої
домашньої птиці. Це збільшує ризик захворювання людей. Необхідно звернути
увагу і на збільшується небезпека охолодженого та замороженого м'яса
свійської птиці, оскільки вірус H5N1 може зберігатися протягом багатьох років при
температурі нижче-700С. Однак він знищується при якісному приготуванні
м'яса (24).
Локалізація
спалахів пташиного грипу залежить від точності ідентифікації способів
розповсюдження вірусу. Незвично те, що він первинно поширюється
перелітними птахами. З попереднього досвіду відомо, що відповідальними за
поширення пташиного грипу між фермами є люди і обладнання. У
1997 спалах у Гон-Конгу вдалося локалізувати завдяки тому, що було
знищено все поголів'я домашньої птиці в країні. В даний час вірус
поширився серед домашньої птиці по всій Азії, тому локалізувати спалах
набагато складніше (25).
За
порівнянні з попередніми спалахами, епідемія пташиного грипу 2004 року може
охопити набагато більше число ферм. Одночасно можлива трансмісія вірусу
через Азію, тому що не контролюються фактори, що викликають поширення
вірусу. ВООЗ відзначає, що майже одночасні спалаху пташиного грипу в Японії,
Північній Кореї, В'єтнамі, а тепер і в Таїланді та Камбоджі історично
безпрецедентні і існує побоювання, що цей новий, вірулентні штам вірусу
пташиного грипу може вразити весь світ.
Швидкість
еволюції вірусу пташиного грипу в природних господарів (водоплавні птахи,
сивки і чайки) і аберрантних господарів (кури, індички, поросята, коні і люди)
розрізняється. Швидкість еволюції, визначена для всіх трьох спалахів, була
схожої зі швидкістю, що спостерігається у ссавців, що є вагомим
доказом адаптації вірусу пташиного грипу до нових видів господарів (26).
Поки що, мабуть, пташиний грип не передається від людини до людини,
проте через епідемію серед домашньої птиці така передача стає все більше
вірогідною. Необхідна лише правильна рекомбінація між штамом H5N1 і
співіснуючих штамом грипу людини. Це може статися, якщо хто-небудь з
людей або інших тварин захворіє людським і пташиним грипом одночасно,
що дозволить вірусам обмінятися генами і утворити новий штам, який зможе
легко передаватися від людини до людини. До цих пір немає доказів, що
це відбулося, оскільки у всіх відомих випадках хвороби інфікування
відбувалося під час прямого контакту з курми. Дана ситуація небезпечна тим, що якщо
виникне пандемія, вона буде більш трагічна за наслідками, ніж пандемія 1968
року.
Пташиний
грип вражає в основному дітей - за повідомленнями агентства Рейтер на
26.01.2004г. з 7 жертв пташиного грипу 6 - діти. Чому це відбувається,
невідомо (27).
3.3. Клінічні прояви, патогенез
Симптоми
пташиного грипу в людини варіюють від типових грип-подібних симптомів
(лихоманка, кашель, біль у горлі та біль у м'язах) до інфекції очей, пневмонії,
гострого респіраторного захворювання, вірусної пневмонії й інших важких,
загрожують життю симптомів.
Патогенез
вірусу пташиного грипу вивчався на мишах, оскільки це один з найбільш широко
застосовуваних і вивчених моделей для дослідження патогенезу вірусів на
ссавців, проте в якості альтернативи пропонується вивчати вірус
пташиного грипу на тхора, для яких він також є патогенних (28).
Дослідження
патогенності пташиних і людських ізолятів вірусу H5N1 з Гонконгу на 6-8
тижневих мишей BALB/c показало, що як пташині, так і людські ізоляти
викликали у мишей захворювання, що характеризується гіпотермії, клінічними
симптомами, швидкою втратою ваги і 75-100% смертністю на 6-8 день після
інфікування. Три изолята не з Гонконгу не давали жодних клінічних
проявів. Один ізолят A/tk/England/91 (H5N1) викликав захворювання середньої
тяжкості і всі тварини, крім одного, одужали. Інфекція призводила до
поразки (від легкого до важкого) як верхніх, так і нижніх відділів
респіраторного тракту. Найчастіше вірус викликав некрози в респіраторному
епітелії порожнини носа, трахеї, бронхах і бронхіолах із супутнім
запаленням. Найбільш серйозні й великі поразки спостерігалися в легенях
мишей, інфікованих гонконгським вірусом пташиного грипу, у той час як у
мишей, інфікованих вірусами A/ck/Scotland/59 (H5N1) і A/ck/Queretaro/95
(H5N2), ураження були слабкими або не спостерігалися зовсім. Віруси A/ck/Italy/97
(H5N2) і A/tk/England/91 (H5N1) проявили проміжну патогенність, даючи
ураження респіраторного тракту від слабких до середніх. Крім того, інфекція,
викликана різними ізолятів вірусу, могла бути в подальшому визначена за
імунної відповіді мишей. Ізоляти НЕ гонконгського походження після
інфікування викликали продукування підвищених рівнів активного
трансформує фактора росту b, у той час як гонконгські ізоляти такого не
викликали (29).
При
зараженні мишей людським ізолятів вірусу грипу А H5N1, виділяються два
групи, що відрізняються за вірулентності. Використовуючи сучасні методи генетики,
було показано, що мутація в позиції 627 у білку РВ2 впливає на результат інфекції у
мишей. Більше того, висока расщепляемость гемагглютіна є необхідною
умовою летальності інфекції (30).
Більше
ранні дослідження також вказували на наявність двох груп вірусів: група 1,
для якої MLD50 знаходилася між 0.3 і 11 PFU, і група 2, для якої MLD50
була більше 103 PFU. Через день після інтраназально інокуляції мишам 100 PFU
вірусу групи 1, титр вірусу в легенях становив 107 PFU/g або на 3 log більше,
ніж для вірусів другої групи. Обидва типи вірусів реплікованих до високих
титрів (> 106 PFU/g) в легенях на 3 день і залишалися на цьому рівні протягом
6 днів. Більш важливим є те, що тільки віруси першої групи викликали системну
інфекцію, реплікованих в нереспіраторних органах, включаючи головний мозок.
Імуногістохімічної аналіз показав, що реплікація вірусів першої групи
відбувалася в нейронах головного мозку, гліальних клітинах і кардіальних
міофібрах.
Механізм
вірулентності, відповідальний за летальність вірусів грипу у птахів, діє
також і у господарів-ссавців. Те, що деякі віруси H5N1 не продукували
системної інфекції на моделях, свідчить про те, що множинні
фактори, які ще мають бути встановлені, вносять свій внесок у тяжкість H5N1
інфекції у ссавців. Крім того, здатність цих вірусів продукувати
системну інфекцію на мишах і виразні відмінності в патогенності серед ізолятів,
показує, що ця система є корисною моделлю для вивчення патогенезу
вірусу пташиного грипу на ссавців (31).
Крім
т?? го, показано, що одним з факторів, що впливають на патогенез вірусу
H5N1, є деструктивний вплив на імунну систему, що відрізняється у
летальних і нелетальних ізолятів вірусу H5N1 (32).
Біохімічні
аспектів, які впливають на вірулентність, адаптацію вірусу до нового господаря,
імунна відповідь і патогенез, присвячений цілий ряд робіт (33, 34, 35, 36, 37, 38,
39, 40).
3.4. Вакцини
Відразу
ж після спалахів 1997-1999 років почалися пошуки вакцини проти вірусу пташиного
грипу. Оскільки неадаптованих вірус H5N1 є патогенних для мишей,
саме ці тварини були використані як модель імунної системи ссавців
для дослідження летальної інфекції пташиного грипу.
Виробництво
вакцини проти вірусу грипу H5N1 в системі курячих ембріонів неможливо через
загибелі курячих ембріонів при зараженні цим вірусом і високому рівнем
біобезпеки, необхідним для роботи з цим вірусом і виробництвом вакцини
на основі цього вірусу. Для розробки вакцини на основі цілісного вірусу
використовувалися авірулентний вірус H5N4, виділений від мігруючих качок, вірус
H5N1 і авірулентний рекомбінантний вірус H5N1. Всі вакцини були інактивувати
формаліном. Інтраперітональная імунізація мишей кожної вакциною викликала
вироблення гемаглютинін-інгібують і вірус-нейтралізують антитіл, у той час
як інтраназально вакцинація без адьюванта індукувати як мукозальний, так і
сістеминй антитільний відповідь, який захищав мишей від контрольного зараження
летальним вірусом H5N1 (41).
Інтрамускулярное
введення вакцини, приготовленої на основі непатогенні штаму
A/Duck/Singapore-Q/F119-3/97 (H5N3), антигенно пов'язаного з людським вірусом
H5N1, у поєднанні з галуном або без них, призводило до повної захисту від
летального контрольного зараження вірусом H5N1. Захист від інфекції спостерігалась
у 70% тварин, яким вакцина вводилася сама по собі і у 100% тварин,
яким вакцина вводилася в поєднанні з галуном. Протективного ефект
вакцинації корелював з рівнем вірус-специфічних сироваткових антитіл. Ці
результати говорять про те, що у випадку пандемії можливе використання
антигенно пов'язаних, але не патогенних вірусів грипу в якості кандидатів у
вакцину (42, 43).
Дослідження
ДНК вакцин показали, що ДНК вакцина, що кодує гемаглютинін з A/Ty/Ir/1/83
(H5N8), який відрізняється від A/HK/156/97 (H5N1) в межах 12% в НА1,
запобігає загибелі мишей, але не захворювання при інфікуванні H5N1.
Отже, ДНК вакцина, зроблена на основі гетерологічного штаму Н5 НЕ
захищає мишей від інфікування вірусом пташиного грипу H5N1, але корисна при
захисту мишей від загибелі (44).
протигрипозні
вакцини, що індукують значний перехресний гетеросубтіпний імунітет,
можуть подолати обмеження ефективності вакцин, викликані антигенної
варіабельністю вірусу грипу А. Миші, які отримали триразовий інтраназально
імунізацію вакциною H3N2 у поєднанні LT (R192G), були повністю захищені при
летальний контрольному інфікуванні високопатогенним людським вірусом H5N1,
причому вірусних
