МІНІСТЕРСТВО ОСВІТИ І НАУКИ УКРАЇНИ

САМАРСЬКИЙ ДЕРЖАВНИЙ УНІВЕРСИТЕТ

КАФЕДРА ФІЗІОЛОГІЇ ЛЮДИНИ І ТВАРИН

ВПЛИВ ЦІАНО-І ТЕТРАЗОЛЬНИХ ПОХІДНИХ Цитозин і тимін НА

резистентність еритроцитів

Дипломна робота

Спеціальність 011600 - «Біологія» спеціалізація - «Фізіологія людини і тварин»

САМАРА 2002

Зміст

Вступ 3
1. Огляд літератури 5
1.1. Будова і функції еритроцитарної мембрани 5
1.2. Поняття резистентності та руйнування еритроцитів 8
1.3 Реакції червоної крові на вплив хімічних чинників 11
2. Експериментальна частина 15
2.1. Матеріали та методика дослідження 15
2.2. Результати дослідження 17

2.2.1. Вплив цитозину на резистентність еритроцитів 17

2.2.2. Вплив ціаноцітозіна на резистентність еритроцитів 22

2.2.3. Вплив цітозінтетразола на резистентність еритроцитів 28

2.2.4. Вплив тімінтетразола на резистентність еритроцитів 33
2.3. Обговорення результатів 39
Висновки 42
Список використаних джерел 43

Н А Л О Ж Е Н Н Я 51

Введення

При вивченні біологічної активності хімічних речовин особливезначення набувають відомості про вплив їх на систему крові, якає важливою складовою частиною внутрішнього середовища організму. Завдякисвоєї реактивності, вона відіграє основну роль в резистентності тарозвитку адаптації при дії на організм як різних зовнішніхподразників, так і при порушеннях внутрішнього середовища організму [23, 35, 86,
87].

Кров відповідає кількісними та якісними змінами свогоскладу на будь-які екзогенні і ендогенні впливу з метою підтримкигомеостазіса [6, 38].

Вивчення кількісних характеристик периферичної крові безсумнівнодає уявлення про вплив досліджуваних факторів на систему червоної крові,але без оцінки якісних змін не дозволяє повною міроюохарактеризувати реакцію останньої. Тим більше, що окремі хімічніречовини при діях у субтоксіческіх дозах можуть не викликати різкихзмін в кількості і морфології еритроцитів.

Згідно утвердилася думка цитоплазматична мембрана граєголовну роль в адаптації клітини до дії різних факторів [8, 44, 63].
А це означає, що вплив хімічних речовин на фізико-хімічнийстан мембран може істотно змінювати їх стійкість донесприятливих дій. Між тим відомо, що клітини, будучикінцевим пунктом складних адаптаційних реакцій, не тільки відображають загальнийрівень опірності організму, а й забезпечують його [5, 57, 58, 70,
80].

Справжня робота виконана в рамках спільних досліджень,проведених кафедрою фізіології людини і тварин і кафедри органічноїхімії Самарського державного університету, метою яких єсинтез і аналіз фізіологічної активності різних органічнихсполук, в т.ч. азолів і піримідинів. Інтерес до цих груп речовинобумовлений тією значною роллю, яку вони відіграють у процесахжиттєдіяльності, беручи участь у найважливіших метаболічних процесах,взаємодіючи з величезним числом ключових ферментних систем, вносячи вирішальнийвнесок у функціонування центральної нервової системи [9, 28, 33, 45, 53,
87]. Сьогодні багато похідні азолів і піримідинів - це різноманітнівисокоефективні лікарські засоби. [1, 2,10, 17, 36, 41, 43, 53, 62,
84, 85, 93, 95].

Завданням нашого дослідження було вивчення впливу на фізико -хімічні властивості еритроцитів цитозину, ціаноцітозіна і тетразольнихпохідних цитозину та тиміну.

1. Огляд літератури

1.1. Будова і функції еритроцитарної мембрани

Еритроцит володіє розвиненим мембранним комплексом і досконалимрецепторним апаратом [12, 18, 20, 42, 61, 92, 89, 99-101]. Мембранаслужить бар'єром проникності з підвищеним ступенем вибірковості,забезпечуючи таким чином підтримання клітинного гомеостазіса в умовахвеликих відмінностей хімічного складу цитоплазми клітин і середовища [42, 88, 99 -
101]. Перенесення речовин через мембрану здійснюється залежно від їххімічних властивостей різними способами: дифузією, шляхом проникненнячерез ліпідні ділянки, або взаємодіючи з вбудованими в мембранубілками переносниками [40, 59, 72, 92].

Мембрана еритроцитів відображає особливості біохімічного будовимембран різних тканин, а саме представляє пластичну молекулярнумозаїку, що складається з білків, липо-і глікопротеїнів і, можливо, чистоліпідних ділянок [88, 91]. У ліпідному Біслі містяться холестерин,фосфотіділсерін, фосфотіділетаноламін, фосфотіділхолін, сфінгоміелін,цереброзидів та інші ліпіди [12]. Ліпіди в мембрані еритроцита знаходятьсявиключно у вигляді бішару. У еритроциті людини таких ліпідів не менш
97%. Існує як трансмембранний, так і планарна гетерогенність їхрозподілу. Трансмембранний гетерогенність обумовлюється тим, щоамінофосфоліпіди розташовані в цитоплазматичної половині бішару, аінші фосфоліпіди в зовнішньому. Планарна гетерогенність виражається вте, що в біологічних мембранах присутні білки, з якими ліпідиможуть встановлювати більш сильні нековалентние взаємодії [12, 40].

Переважаючий по вагових параметрах холестерол своїми гідроксильнихгрупами примикає до полярних головок фосфоліпідних молекул і єфактором, що визначає плинність мембран і механічну міцність бішару
[59, 98].

Білки в еритроцитарної мембрані розташовані нерівномірно. Основначастина мембранних білків розташовується на внутрішній (цитоплазматичної)стороні мембрани й утворює мережу філаментів, яка служить для підтримкидвояковогнутой форми еритроцита. До таких білків належать: спектрін,глікофорін (рецепторний білок), каталітичний білок - "band 3 --глікопротеїн ", що є і інтегральним білком мембрани, що беруть участь втранспорті іонів. Поверхневий цитоскелет (строма) еритроцита включаєтакі білки, як сіндеін, анкірін, "band-3", "band-4.1", "band-2.1" [34,
40]. Крім того, глікофорін і білок смуги III є трансмембраннимбілками. Останній формує іонні канали [12, 15, 69, 70].

вуглеводна складова еритроцитарних мембран представлена у виглядіолігосахарідних ланцюгів, ковалентно приєднаних до білків (глікопротеїни) ів меншій мірі до ліпідів (гліколіпіди) і розташовуються на сторонімембрани, що контактує з цитоплазмою. Функція їх полягає встабілізації просторової структури глікопротеїну [60, 81].

Фактор стабільності ліпідного бішару визначається ліпідними порами.
Ці пори утворюються в місцях дефектів рідкокристалічною структуриліпідного бішару. Якщо ліпідна пора не перевищує деякий критичнийрозмір, то структура зберігається. Мінімальні розміри ліпідних пір можутьстати порівнянними з розмірами виборчих білкових каналів, що регулюють внормі іонну проникність клітинних мембран [3, 59, 60, 96].

Фактор цілісності мембрани визначається біохімічними процесами.
При розгляді ензимів основного енергетичного процесу в еритроциті --гліколізу - в першу чергу, виділяють каталазу і глюкозо-6фосфатдегідрогенази. Захисна роль каталази полягає в запобіганніокислення гемоглобіну до метгемоглобіну, а також оберігання гемоглабінавід розщеплення під дією перекису водню. Подібним ефектом володієглутатіонпероксидази. Еритроцити, позбавлені цих ферментів, стаютьдосить чутливими до дії радіації [56, 59, 94, 97]. Глюкоза-6 -фосфатдегідрогенази каталізує реакцію утворення НАДФ (Н); остання всвою чергу сприяє функціонуванню глутатіонредуктази, якарегулює рівень відновленого глутатіону. Глутатіон необхідний длянормального перебігу реакцій гліколізу. Система глутатіна розглядаєтьсяяк буферна, що захищає еритроцити від деструктивної дії окислювачів.
Порушення синтезу глутатіону, збільшення його розпаду, а також порушеннясистем регулювання його рівня призводить до гемолізу [39].

1.2. Поняття резистентності та руйнування еритроцитів

морфофункціональні характеристики, що забезпечують цілісністьеритроцитів, можуть змінюватися при дії ряду зовнішніх і внутрішніхфакторів. Нормальний еритроцит здатний до певної межіпротистояти дії осмотичних, механічних, хімічних,температурних впливів. Це характеризується поняттям резистентності. Цяздатність крові залежить від віку формених елементів і зменшується вміру їх старіння [13, 50, 78].

При зменшенні резістетності еритроцитів до мінімуму починаєтьсяпроцес гемолізу. Гемолізом називається процес руйнування мембранеритроцитів, що супроводжується виходом гемоглобіну в плазму крові. Плазмапри цьому забарвлюється в червоний колір ( "лакова кров"). Гемоліз можепроходити in vivo і in vitro.

Залежно від природи руйнівного агента розрізняють осмотичнийгемоліз (руйнування еритроцитів у гіпотонічних розчинах), механічний
(руйнування поза організмом під впливом сильних механічнихвпливів), хімічний (руйнування еритроцитів під впливом хімічнихсполук: кислот, лугів, солей і т.д.), температурний (під впливомтемператур, що відхиляються від оптимального діапазону). Гемоліз може бутивикликаний дією ультрафіолетового, іонізуючого, рентгенівського випромінювання
[27]. До етіологічним факторів, що викликають розвиток гемолітичногопроцесу, відносяться деякі медикаментозні засоби (хінін, хінідин,фенацетин, сульфаніламідні препарати тощо), бактеріальнітоксіни.Отдельние рослини (альпійська фіалка, жовтець, пилок бобових,горошок, дрік тощо), як і більшість медикаментозних препаратів можутьобумовити розвиток гемолітичного синдрому токсико-алергічноїпріроди.Не виключена роль і спадкового фактора при розвитку деякихвидів гемолітичних анемій [68].

Незалежно від типу гемолізу можна спостерігати, що розпаду еритроцитівпередує їх сферуляція і розбухання до певної межі,допустимого оболонкою клітини. Виходячи з цього фахівці стверджують, щорезультатом процесу гемолізу є перевищення внутрішньоклітинноїосмотичній концентрації над зовнішньої і розрив оболонки внутрішнімосмотичним тиском [56, 73].

За даними І. А. Терського та І. І. Гітельзона [21], при гемолізі еритроцитпроходить ряд етапів:

1. прегемолітіческая стадія;

2. стадія осмотичного гемоглобіноліза;

3. стадія хімічного гемоглобіноліза;

4. стадія повного руйнування клітинних структур, яка включає в себе

2 фази - фазу стромопороза і стромотоліза.

У прегемолітіческой стадії відбувається вихід іонів калію з клітини внавколишнє середовище а також сферуляція еритроцитів.

У стадії осмотичного гемоглобіноліза еритроцит набухає за межікритичного об'єму, що призводить до пошкодження поверхні і виходубільшої частини гемоглобіну в плазму. Хімічний склад еритроцита на даномуетапі не зазнає помітних змін, а електрохімічні і колоїдно -осмотичні властивості строми майже не відрізняються від властивостей непошкодженихеритроцитів [66].

Третя стадія - стадія хімічного гемоглобіноліза - характеризуєтьсяповним відщеплення гемоглобіну і переходом частини стеринів (близько 30-40%) унавколишнє середовище. Незважаючи на те, що на даному етапі гемолізу порушенняморфологічної цілісності не відбувається, змінюється хімічний складклітини, що призводить до зміни. електрохімічних і колоїдно -осмотичних властивостей еритроцитів.

У наступній стадії спостерігається руйнування клітинних структуреритроцитів. У ній розрізняють дві фази: o 1 фаза стромопороза, в якій морфологічна цілісність формених елементів ще зберігається, хоча клітини вже вільно пропускають електричний струм; o 2 фаза строматоліза, коли відбувається повний розпад строми еритроцитів.

Фахівцями було показано , що при хімічному гемолізі сферуляціі ірозбухання еритроцитів передує етап проникнення гемолітико вклітку [21,71,76]. Можливі два варіанти цього процесу: мембрана може бутипроникна і непроникна для гемолітико. У першому випадку гемолітиковільно проникає усередину клітини, порушує впорядкування протоплазматіческіхструктур і переводить більшу частину молекул в розчинений стан.
Розпадається також впорядкована упаковка гемоглобіну. Перехід в розчинмолекул гемоглобіну підвищує осмотичну активність внутрішньоклітинноговмісту, дрібні звільнені молекули і іони виходять назовні. Великіліпоїдному і білкові молекули залишаються в клітині, так як оболонка для нихнепроникна. У результаті цих процесів осмотичний тиск всерединіклітини збільшується. Далі гемоліз розвивається за осмотичного шляху.

Якщо ж оболонка клітини непроникна для діючого агента, допроцесу гемолізу додається ще один етап. Проникнення гемолітико вклітку передує пошкодження оболонки. У результаті цього мембранаеритроцитів втрачає непроникність для молекул лізину, після чогопроцес розвивається за раніше описаному шляху [21, 77].

1.3 Реакції червоної крові на вплив хімічних чинників

Відомо, що будь-які дії на організм знаходять своє відображення взміни системи крові, яка включає в себе як кровотворні органи,так і периферичну кров. Реакція на вплив різних агентів можеколиватися в різних межах від різко вираженого токсичного достимулюючого ефекту, а досліджувані характеристики можуть як істотновідхилятися від норми, так і не виходити за її межі.

Незалежно від хімічної природи перший патогенним ланкою впливухімічних чинників є мембраноповреждающій ефект, що супроводжуєтьсяпорушенням функції каскаду мітохондріальних і ферментів --оксігеназ, гідролаз, що беруть участь у детоксикації та елімінації патогенногопочатку [30, 90]. Багато агенти впливають на білки мембран, сприяючиїх окислення, денатурації і, як наслідок, освіта пір в ній.
Наприклад, етанол сприяє денатурації білків мембрани, "Геміні" викликаєяк швидкий, так і повільний гемоліз, окислюючи мембранні білки [3, 59].
Ртуть та її органічні сполуки викликають пошкодження мембрани за рахунокблокади сульфогідрільних груп білкових молекул, що входять до складубіомембран [22]. Переважна більшість гемолітичних агентів викликаєпошкодження мембрани, порушуючи розташування молекул ліпідів в ній. Таколеіновокіслий Na і жовчні кислоти пошкоджують оболонку еритроцита,розчиняючи в ній лецитин, при цьому пошкоджуються більш глибокі частинимембрани [59]. Активні форми O2, H2O2, органічні перекисувзаємодіють з ліпідами мембран, утворюють перекису ліпідів, що призводитьдо структурних порушень і зміни проникності [2]. Ретиноїдиіндукують перехід еритроцитарних ліпідів з біслойной фази вгексагональну. Отже, стійкість еритроцитів порушується [52]. Прикарбомілірованіі мембран еритроцитів ціанат зв'язується з фосфотіділхоліномі фосфотіділсеріном, таким чином розмір пір і їх кількість зростає.
Адреналін викликає процес перекисного окислення ліпідів [14]. Структурніі функціональні зміни мембрани еритроцитів були виявлені придії толуолу і виражалися в ослабленні зв'язків між ліпідними ібілковими компонентами [37].

І. І. Гітельзон та І. А. Терсков [21] показали, що катіони Mg2 + і вменшою мірою Ca2 + збільшують стоікость еритроцитів, а Na + і K +практично не змінюють її. З аніонів SO42-дуже різко збільшуютьсстойкость еритроцитів, а PO43-знижують її. Дослідженнями А. К. Гулевської
[26] показано, що при попередньому низькотемпературному впливіспостерігається наступний ефект: Na +, Ca2 +, Mg2 + сорбіруясь на мембрані,змінюють її проникність для води та іонів, а також механічні властивості.
Іони K + і Ca2 + знижують стійкість мембрани.

Антігемолітіческім діям мають 2-гідроксіламоніевие солі арил-,тіо-і арілсульфонілуксусной кислот [59]. Л. Грінбері і А.М. Аллахвердієввиявили підвищення резистентності еритроцитів після додавання Форміат
Na та обробки промахіном.

Лікарські препарати також були досліджені на гемолітичноїдію. Н. М. Мітрохін зі співробітниками [4] досліджували речовини, що застосовуютьсяв медичної практики. Вони встановили, що більше 70% дослідженихпрепаратів викликають деформацію еритроцитів. Катіони викликаютьпереважно стоматоліз клітин. Таким механізмом дії володіютьдимедрол, аміназін, промедолу гідрохлорид та деякі інші препарати.
Аніони викликають ехіноцітоз еритроцитів. Такий вплив характерно для всіхбарбітуратів, карцеіна, медінала.

В останні роки фахівці приділяють велику увагу розробцікоштів, модулюють імунні реакції організму. Стало очевидним, щопозитивну дію різних лікарських речовин можна пояснити їхздатністю підвищувати загальну опірність організму або йогонеспецифічний імунітет, а також впливати на специфічні імунні реакції
[65]. Відображенням неспецифічної резистентності є система крові.
Остання грає роль Ефектор і бере участь завдяки особливій реактивності вреалізації адаптаційно-трофічних впливів для збереження сталостівнутрішнього середовища організму [21, 23-25, 51, 74, 86].

Підвищення загальної опірності організму зазначено під впливом рядустимулюючих препаратів. До речовин, виявляє цю здатність,відносять похідні піримідинових підстав [41, 49] У літературі євідомості про те, що сполуки даного класу сприяють синтезунуклеїнових кислот, білків, збільшують активність імунної системи.

Похідні піримідинів є антиоксидантами. Механізм їхантиоксидантного ефекту пов'язаний з придушенням перекисного окислення жирнихкислот, а також з порушенням утворення супероксидних радикалів. Даніпрепарати володіють захисним ефектом на цитоплазматичної і субклітинномурівні по відношенню до вільних радикалів, які продукують активованимиклітинами (макрофагами, нейтрофілами). Лікувальними препаратами цієї групиє Пентакс, метилурацил, оротовая кислота, сафінор та ін [77, 90].

Поруч дослідників була вивчена також здатність азолівстимулювати імунологічні процеси і підвищувати загальну опірністьорганізму. У практиці знайшли застосування в зв'язку з цим дибазол, левамізол іін [7, 41, 49]. Проте наголошується дозозалежне ефекту, тому що припідвищення доз можливо не імуно-стимулюючу а імуно-депресивнийдію [16].

Поряд з позитивним впливом азольні з'єднань не можна не звернутивиймання на наявність побічних ефектів від їх застосування. Серед останніхвиділяють гематологічні - анемія і біохімічні - гіпонатріємія ігіперліпідіемія [17].

Таким чином, при дії різних хімічних речовин на живийорганізм виникає виражена у відповідь реакція з боку червоної крові,причому, характер і сила їх впливів вельми різноманітні.

2. Експериментальна частина

2.1. Матеріали та методика дослідження

Вплив похідних піримідинових підстав на стійкістьеритроцитів до дезінтегруються фактору вивчали методом кислотнихерітрограмм.

Досліджували властивості сполук, що мають наступне хімічнабудову:

Спостереження проводили in vivo. Було поставлено дві серії експериментів,у яких використовували 36 нелінійних щурів вагою 200-250г. У кожній серіїбуло сформовано дві дослідні та одна контрольна група.

У першій серії дослідів щурам однієї дослідної групи п'ятикратновнутрішньочеревно з інтервалом у 48 годин вводили по 1 мл розчину цитозину вразової дозі 1 мг/100 г маси тварини, іншої групи розчинціаноцітозіна в тій же дозі таким чином, що сумарна доза вводитьсяречовини в обох групах склала 5 мг на 100 г маси тварини. У другійсерії дослідів в аналогічних умовах особинами однієї дослідної групиинъецировали цітозінтетразол, інший - тімінтетразол.Крисам обохконтрольних груп вводили фізіологічний розчин у рівному обсязі.

Кров для аналізу брали в ранкові години перед годуванням тварин зкінчика хвоста до початку введення розчинів досліджуваних речовин - вихіднізначення, через 2,5 і 24 години після кожного введення, а потім на 3, 5, 7 і
14 добу після закінчення ін'єкцій. Для проведення дослідження 20 мкл кровізмішували з 20 мл фізіологічного розчину, отримуючи таким чином суспензіяеритроцитів у розведенні 1:1000.

Усі дослідження проводилися при кімнатній температурі.

Вимірювання оптичної щільності суспензії еритроцитів справляли нафотоелектроколориметр КФК-2 УХЛ 42 при червоному світлофільтрі. В кюветуробочої ширини 10 мм вливали 2 мл суспензії еритроцитів з окремої проби ідодавали до неї в якості гемолітико 2 мл 0,004 н HCl. Після цього кюветупоміщали в кюветодержатель приладу. З моменту введення в суспензіяеритроцитів гемолітико величина светопропускания досліджуваного розчинупочинала зміняться у зв'язку з руйнуванням клітин крові. Кожні 30 секундвідзначали показання приладу за шкалою екстинкції (Ео). Вимірювання вели доотримання двох співпадаючих показань, тобто до завершення гемолізу (ЕN). Урезультаті одержували ряд відбувають екстинкції, кожна з якихвідповідала ступеня гемолізу до моменту відліку. За значеннями оптичноїщільності обчислювали відсоток зруйнованих еритроцитів за кожні 30 секунд,беручи різниця Ео-ЕN за 100%.

Рівень значущості відмінностей визначали по таблиці стандартних значенькритерію Стьюдента.

2.2. Результати дослідження

2.2.1. Вплив цитозину на резистентність еритроцитів

Результати проведених досліджень показали, що цитозин прибагаторазових введеннях тваринам не зробив істотного впливу на вихідніякісні характеристики еритроцитів. Про це дозволяють судити данітаблиць 1 і 2 (Додаток), в яких представлені усереднені показникиоптичної щільності суспензій які руйнуються під час гемолізу еритроцитівособин дослідної та контрольної групи. Як видно з таблиці, в окремі термінипротягом тривалого періоду спостережень мали місце коливанняфункціонального стану еритроцитів у порівнянні з вихідним рівнем утварин обох груп. Звертає на себе увагу ідентичний характер інезначні межі зрушень показників у контрольних і піддосліднихособин.

Про фізико-хімічному стані еритроцитів, що зазнали діїгемолітико, до і на тлі введення тваринам цитозину дозволяють судитикислотні ерітрограмми (мал. 2.1, 2.2).

Первісне розподіл за ступенями стійкості до гемолітикоеритроцитів інтактних щурів відображає вихідна ерітрограмма. Згіднографіком, процес руйнування еритроцитів починається через 1,5 хвилини післядодавання до їх суспензії гемолітико, найбільшої інтенсивності досягає до 3,5хвилинах і закінчується через 7,5 хвилин.

Як відомо, склад еритроцитарної популяції неоднорідний. УВідповідно до хронологічним віком еритроцитів положення початковійчастині кривої визначається вмістом у периферичній крові старихмалостойкіх клітинних форм, середньої частини - основної маси среднеустойчівихклітин, і її кінцевої частини - наявністю стійких молодих форменихелементів [20, 38].

Рис. 2.1. Кислотні ерітрограмми крові щурів на тлі п'ятикратноговведення цитозину в разової дозі 1 мг/100 г маси

1-5 - послідовність введення

вихідна гістограма через 2,5 години через 24 години

Рис. 2.2 Кислотні ерітрограмми крові щурів в відставлені терміниспостереження після п'ятикратного введення цитозину

1-4 - на 3, 5, 7 і 14 добу відповідно

вихідна гістограма досвідчена крива

Рис. 2.3 Кінетика гемолізу крові щурів на тлі п'ятикратного введенняцитозину в разової дозі 1 мг/100 г маси

1-5 - послідовність введення

вихідна гістограма через 2,5 години через 24 години

Рис. 2.4. Кінетика гемолізу еритроцитів щурів на тлі п'ятикратноговведення цитозину в разової дозі 1 мг/100 г маси

1-4 - на 3, 5, 7 і 14 добу відповідно

вихідна гістограма після закінчення введений речовин < p> Аналіз ерітрограмм на тлі п'ятикратного введення тваринам цитозину НЕвиявив помітного перерозподілу еритроцитів за ступенем їх стійкості додезінтегруються агенту. В усі терміни спостереження інтенсивність їхруйнування під дією соляної кислоти і загальна тривалість лізисумало розрізнялися з вихідними показниками і майже повністю збігалися зтакими у контрольної групи.

Відсутність вираженого ефекту дії цитозину на резистентністьеритроцитів відображають також криві кінетики гемолізу, які характеризуютьдинаміку руйнування клітин крові під впливом гемолітико (ріс.2.3, 2.4).
Крива процесу гемолізу у інтактних щурів характеризується S-подібноїформою. Вона повільно наростає у своїй початковій частині, потім крутопіднімається вгору в інтервалі від 2,5 до 5,5 хвилин, після чого переходить доплато і закінчується на 7,5 хвилині.

Як видно з наведених графічних матеріалів, на тлі п'ятикратноговведення розчинів піримідину і протягом двох тижнів після припиненняін'єкцій форма кривої практично не відрізняється від вихідних характеристик.

2.2.2. Вплив ціаноцітозіна на резистентність еритроцитів

У серії дослідів з багаторазовим введенням тваринам ціаноцітозінавиявлена здатність останнього певним чином змінювати базовівластивості еритроцитів. Усереднені дані з динаміки показників оптичноїщільності суспензій які руйнуються еритроцитів у тварин цієї групипредставлені в таблиці 3 (додаток). Порівняльний аналіз дослідженькрові дослідних і контрольних особин показали, що ціановое похіднепіримідинового підстави зробило помітний вплив на функціональнийстан еритроцитів. При відносно слабких коливаннях стійкості догемолітико формених елементів крові контрольних щурів, яким тривалийчас ін'екціровалі фізіологічес-

Рис. 2.5. Кислотні ерітрограмми крові щурів на тлі п'ятикратноговведення ціаноцітозіна у разовій дозі 1 мг/100 г маси

1-5 - послідовність введення

вихідна гістограма через 2,5 години через 24 години

Рис. 2.6. Кислотні ерітрограмми крові щурів в відставлені терміниспостереження після п'ятикратного введення ціаноцітозіна

1-4 - на 3, 5, 7 і 14 добу

початкова крива досвідчена крива

кий розчин, відзначені досить виражене та закономірне посиленнярезистентності еритроцитів, обумовлене вплив ціаноцітозіна. Динамікуякісних змін клітин крові під впливом досліджуваної речовинидозволяють простежити кислотні ерітрограмми на ріс.2.5, 2.6.

Як видно з ерітрограмм, зміна їх положень щодопервісного вказує на тенденцію до посилення стійкості еритроцитівдо гемолітико. Це знаходить відображення в зсуві ерітрограмм в бік більшихчасових значень. Вже на тлі перших трьох ін'єкцій розчинівціаноцітозіна вершина кривої зміщується з 3,5 до 4,0-х хвилин, а приподальших введеннях до 5,0 хвилин (p