| |
| |
| |
| |
| 2. ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА ЧАСТИНА |
| |
| 2.1. Методи досліджень |
| |
| 2.1.1. Отримання мікробної суспензії |
| |
| Поживний агар, який готується згідно прописи, заливають заздалегідь по |
| 5-10 мл в пробірки, які залишають похилими в спеціальному штативі до |
| повного застигання середовища. Бактеріологічної петлею відбирають клітини |
| мікроорганізмів і вводять петлю в пробірку з скошеним агаром до дна. Злегка |
| торкаючись бактеріологічної петлею поверхні середовища, проводять від дна пробірки |
| вгору зигзагоподібну лінію, тим самим, засіваючи культуру мікроорганізмів. Після |
| посіву пробірки поміщають в термостат (30 (С) на 1 добу (по закінченню цього терміну |
| пробірки витягують з термостата) і заливають у них по 2.0-3.0 мл |
| фізіологічного розчину (ФР). Обережно відокремлюють мікробну культуру від агару |
| поступовим струшуванням і погойдуванням пробірки. Отриману суспензію зберігають у |
| холодильнику. |
| |
| |
| 2.1.2.| середу |
| |
| Мікробну суспензію розводять в стерильному фізіологічному розчині, при цьому |
| використовуючи один і той же коефіцієнт розведення. |
| Посів здійснюють з 5-ого, 6-го і 7-ого розведень переносячи 0, 1 мл |
| суспензії на поверхню поживного агару в чашках Петрі. Потім суспензію |
| шпателем рівномірно розподіляють по живильному агар. Висів з кожного |
| розведення здійснюють стерильною піпеткою. Після посіву чашки поміщають в |
| термостат (30 (С) на добу. |
| Кількість життєздатних клітин в 1 мл суспензії розраховують за наступною |
| формулою: |
| |
| M = a * 10z/V; (2.1 |
|) |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| |
| | | | | | | БГТУ 02.00.ПЗ |
| | | | | | | |
| І | Кількість | Лі | № | Підпис | Дат | |
| з |. уч | ст | док. | ись | а | |
| м |. | | | | | |
|. | | | | | | |
| | Ковальова | | | Експериментальна частина | Стадія | Лист | Листів |
| Розробити | ч А. | | | | я | | |
|. | | | | | | | |
| Н.конт | | | | | |
| р. | | | | | |
| Утв. | | | | | | P>
де M - кількість клітин в 1 мл вихідної суспензії; а - кількість колоній, які виросли на чашках
Петрі; p>
Z - порядковий номер розведення суспензії; p>
V - об'єм суспензії, взятої для висіву на чашку Петрі, мл. p>
Величину оптичної щільності вимірюють за допомогою фотоколориметр
ФЕК-56м. Для вимірювання світлорозсіювання вибирають світлофільтр, який забезпечує максимум пропускання світла даної суспензією. У результаті дослідів отримали, що максимум пропускання світла забезпечує довжина хвилі 540 нм. P>
2.1.3. Вивчення сорбції металів мохом p>
Для експерименту на аналітичних вагах зважують зразки моху масою 200 +0,5 мг і поміщають їх в скляні флакони з пригвинчуються кришками об'ємом 100 мл. Потім в ці ж флакони заливають по 50 мл розчину металу різної концентрації (для експерименту були вибрані наступні концентрації металів: 0,1;
0,02; 0,005; 0,0001; 0,00002; 0,00001 моль/л) , які готують шляхом послідовного розведення вихідного розчину солі металу (0,1 моль/л). Флакони закривають і залишають на 24 години при кімнатній температурі (18 +2 (С) при періодичному перемішуванні. Після чого мох із суспензії фільтрують через паперовий фільтр у колби для титрування і титрують за наступними методиками. P>
2.1.3.1 . Визначення міді комплексонометріческім методом p>
Як джерело міді використовували сульфат міді. p>
Іони міді утворюють з ЕДТА комплекси блакитного кольору з константою стійкості 6,3 * 1018 (іонна сила 0,1: 20 (С). аналізований розчин розбавляють водою до позначки в мірної колби. Рівноважні розчини з вихідною концентрацією 0,100 моль/л після фільтрування у кількості 48 мл розбавляють водою в мірної колбі до 100 мл. Після перемішування відбирають піпеткою аліквотную частина розчину в конічну колбу, додають 20 мл дистильованої води, 5 мл буферного розчину, на кінчику металевого шпателя 20-30 мг індикаторної суміші, розчиняють її та титрують розчином ЕДТА 0,0500 М до зміни забарвлення з зеленувато-жовтого кольору в чисто-фіолетове. Вимірюють обсяг ЕДТА і вводять 1 краплю 2 М розчину NH4ОН, якщо колір розчину залишається фіолетовим, титрування припиняють; якщо від додавання аміаку забарвлення змінилася на жовту або жовто-зелене, продовжують титрування розчином
ЕДТА до стійкої фіолетового забарвлення. p>
Як буферного розчину використовують ацетатний буфер (ацетат амонію, 50% розчин) з pH6. Титрування ведуть на холоду (при кімнатній температурі 18 +2 (С). p>
Як металлоіндікатора використовують мурексід (суміш з хлоридом натрію у співвідношенні 1:100). p>
Масу визначається речовини розраховують за формулою (2.2 .): p>
m = (V1 * Vж * c1 * M)/(V2 * 1000) (2.2) p>
де - V1 - об'єм розчину ЕДТА, який пішов на титрування; p>
V2 - обсяг аналізованого рівноважного розчину
(аліквотная частина); c1 - молярна концентрація ЕДТА; p>
M - молярна маса визначається речовини; p>
Vж - об'єм мірної колби, з якої відбирали аліквотную частину. p>
2.1.3.2. Визначення кадмію комплексонометріческім методом p>
Як джерело кадмію в роботі використовували ацетат кадмію. p>
Відбирають аліквотную частину аналізованого розчину з мірної колби місткістю 100 мл, додають 2-3 мл буферного розчину з pH 10
(аміачний буферний розчин: 67г NH4Cl та 570 мл 25%-ного NH3 в 1 л розчину), 15 мл води, перемішують і додають на кінчику шпателя 20 -
30 мг суміші індикатора еріохромового чорного Т і хлориду натрію.
перемішують до повного розчинення індикаторної суміші та титрують розчином ЕДТА 0,0500 М до зміни забарвлення розчину з винно-червоного у блакитну. p>
Масу визначається речовини розраховують за вищезазначеним формулою
(2.2). p>
2.1.4. Визначення кінетики сорбції металів мохом p>
У скляні флакони поміщають навішування по 200 +0,5 мг моху, зважені на аналітичних терезах. Додають по 50 мл розчину металу 0,02 моль/л і ретельно перемішують. Через 5, 10, 20, 30, 60 і 120 хв мох відфільтровують з аналізованих розчинів. Фільтрат міді та кадмію оттітровивают розчином ЕДТА за вищеописаною методикою. p>
2.1.5. Вивчення сорбції металів мікроорганізмами p>
В мірну колбу на 50 мл спочатку додають 1 мл мікробної суспензії, потім доводять об'єм до мітки досліджуваним розчином металу. p>
Після цього вливають вміст мірної колби у флакони на 100 мл з пригвинчуються кришками. Флакони залишають на 24 години, у закінчення яких розчини центріфугіруют при 8000 об/хв протягом 10 хвилин. Далі розчин, відокремлений від мікроорганізмів, оттітровивают розчином ЕДТА за вищеописаною методикою. p>
2.1.6. Визначення кінетики сорбції металів мікроорганізмами p>
У мірну колбу на 50 мл спочатку додають 1 мл мікробної суспензії, потім доводять об'єм до мітки досліджуваним розчином металу.
Після цього вливають вміст мірної колби у флакони на 100 мл з пригвинчуються кришками. p>
Через 5 , 10, 20, 30, 60 і 120 хв відфільтровують культуру мікроорганізмів на мікробному фільтрі і фільтрати оттітровивают розчином ЕДТА. p>
2.1.7. Вивчення сорбції металів у системі мох-суспензія мікроорганізмів p>
У скляні флакони поміщають проби моху 200 +0,5 мг попередньо зважені на аналітичних терезах. Потім в ці ж скляні флакони додають 50 мл розчину металу різної концентрації. І потім додають 1 мл мікробної суспензії. Після цього систему при періодичному перемішуванні залишають на 24 години . Через добу досліджувані розчини фільтрують на мікробному фільтрі і титрують розчином ЕДТА за методиками зазначених у пп. 2.1.3.1. і 2.1.3.2 .. p>
2.1.8. Визначення кінетики сорбції металів мікроорганізмами, адсорбованими на моху
У скляні флакони з пригвинчуються кришками поміщають навішування моху масою 200 +0,5 мг, 1 мл мікробної суспензії і 50 мл розчину металу 0,02 моль/л. Через 5, 10, 20, 30, 60, 120 хв культуру мікроорганізмів фільтрують через мікробний фільтр і фільтрати оттітровивают розчином ЕДТА. p>
2.1.9. Отримання кривої виживаності мікроорганізмів p>
Виживаність мікроорганізмів вивчають посівом їх на чашки Петрі з живильним агаром. мікробну суспензію використовують після обробки її металами в досвіді з вивчення сорбції металів мікроорганізмами. p>
2.1.10. Вивчення адсорбції мікроорганізмів мохом p>
У мірну колбу на 50 мл спочатку додають 1 мл мікробної суспензії і доводять об'єм до мітки дистильованою водою. Потім переливають розчин мікробної суспензії в качальную колбу і додають навішування моху масою 200 +0,5 мг. Всі колби ставлять на гойдалку на 2 години. вимірюють оптичну щільність і роблять висів на життєздатність. Результати представлені в таблиці 2.8.
2.2. Результати досліджень та їх обговорення p>
В якості сорбенту-носія мікроорганізмів використовувався мох з класу мохи (Мusci) підкласу сфагнові, сімейства сфагнові, Sphagnum cuspidatum. Даний вид моху був обраний у зв'язку з тим, що він володіє значним ареалом поширення в нашій республіці. p>
Як мікроорганізмів, здатних до поглинання важких металів, вивчалися Pseudomonas aeroginosa B7. Це прямі або злегка зігнуті палички, розміром 0,5-1 мкм.при гнійних інфекціях в медичних установах. p>
Отримані експериментальні дані в досвіді з вивчення сорбції металів мохом (2.1.3.) зведені в таблицю 2.1. і подані у вигляді ізотерм сорбції на малюнках 2.1. і 2.2 ..
Таблиця 2.1 p>
Дані іонообмінної сорбції металів мохом p>
| Навішування | Початкова | Обсяг | Обсяг ЕДТА 0,05 | Рівноважна | Кількість |
| моху, г | концентрації | малих аліквотах | моль/л який пішов | концентрація | сорбованої |
| | Ия солі |, мл | на титрування, | солі металу, | го металу, |
| | Металу, | | мл | моль/л | мг-екв/г |
| | Моль/л | | | | |
| Сульфат міді, CuSO4 |
| 0,2012 | 0,1 | 10 | 9,85 | 0,09855 | 0,72 |
| 0,1998 | 0,1 | 10 | 9,86 | 0,09863 | 0,68 |
| 0,2001 | 0,02 | 10 | 3,73 | 0,01865 | 0,67 |
| 0,2020 | 0,02 | 10 | 3,74 | 0,01868 | 0,66 |
| 0,1995 | 0,005 | 25 | 1,95 | 0,00389 | 0,55 |
| 0,1987 | 0,005 | 25 | 1,99 | 0,00397 | 0,51 |
| Ацетат кадмію, Cd (CH3COO) 2 |
| 0,2013 | 0,1 | 10 | 9,86 | 0,09864 | 0,69 |
| 0,2210 | 0,1 | 10 | 9,87 | 0,09871 | 0,66 |
| 0,1899 | 0,02 | 10 | 3,75 | 0,01876 | 0,62 |
| 0,2430 | 0,02 | 10 | 3,76 | 0,01880 | 0,60 |
| 0,2150 | 0,005 | 25 | 1,93 | 0,00386 | 0,57 |
| 0,2000 | 0,005 | 25 | 1,95 | 0,00390 | 0,55 | p>
p>
Рис.2.1. P>
p>
Ріс.2.2. p>
Ізотерми сорбції - це криві, що показують залежність кількості сорбованої речовини (мг-екв) в розрахунку на 1 г сорбенту від рівноважної концентрації цієї речовини в моль/л. p>
Отримані результати повністю відповідають існуючим відомостями про іонообмінної ємності моху, що за літературними відомостями вважається рівною 1 мг-екв/г. p>
На підставі поданих Рис.2.1. та 2.2. можна говорити, що мох є хорошим природним іонообмінників і має гарні сорбційні властивості по відношенню до важких металів, це досягається наявністю у структурі моху таких речовин як поліуроніди
(полісахариди, що містять карбоксильної групи в 6-пложеніі піранового або ангідроглюкозного циклу) і пектину . Порівнювання результати сорбції іонів міді та іонів кадмію можна зробити висновок, що з досліджених важких металів краще сорбується мохом мідь (Cu), ніж кадмій (Cd). Це може бути пов'язано в першу чергу з тим, що іони міді краще утримуються карбоксильні групами моху у складі клітинної стінки моху, які і відповідають в основному за іонообмінну активність моху. P>
Отримані експериментальні дані в досвіді з вивчення кінетики сорбції металів мохом (2.1.4.) зведені в таблицю 2.2. і подані у вигляді кінетичних кривих сорбції на малюнках 2.3, 2.4 .. p>
Таблиця 2.2 p>
Дані щодо кінетики сорбції металів мохом p>
| Врем | Навішування | Початкова | Обсяг | Обсяг ЕДТА 0,05 | Рівноважна | Кількість |
| я, | моху, г | концентрації | малих аліквотах | моль/л який пішов | концентрація | сорбованої |
| хв | | ия солі |, мл | на титрування, | солі металу, | го металу, |
| | | Металу, | | мл | моль/л | мг-екв/г |
| | | Моль/л | | | | |
| Ацетат кадмію, Cd (CH3COO) 2 |
| 5 | 0,2014 | 0,02 | 10 | 3,99 | 0,01997 | 0,01 |
| 10 | 0,2218 | 0,02 | 10 | 3,94 | 0,01972 | 0,14 |
| 20 | 0,1899 | 0,02 | 10 | 3,92 | 0,01958 | 0,21 |
| 30 | 0,2434 | 0,02 | 10 | 3,86 | 0,01931 | 0,35 |
| 60 | 0,2156 | 0,02 | 10 | 3,81 | 0,01903 | 0,49 |
| 120 | 0,2213 | 0,02 | 10 | 3,81 | 0,01903 | 0,49 |
| Сульфат міді, CuSO4 |
| 5 | 0,2266 | 0,02 | 10 | 3,82 | 0,01912 | 0,44 |
| 10 | 0,2312 | 0,02 | 10 | 3,80 | 0,01901 | 0,50 |
| 20 | 0,1899 | 0,02 | 10 | 3,77 | 0,01885 | 0,57 |
| 30 | 0,2001 | 0,02 | 10 | 3,75 | 0,01874 | 0,63 |
| 60 | 0,2166 | 0,02 | 10 | 3,73 | 0,01863 | 0,69 |
| 120 | 0,1959 | 0,02 | 10 | 3,73 | 0,01863 | 0,69 | p>
Ріс.2.3. P>
Ріс.2.4. P >
Під кінетичними кривими сорбції прийнято розуміти криві, що показують залежність кількості сорбованої речовини (іонів металу) від часу проведення сорбції, t, хв. p>
По виду кінетичних кривих можна говорити про те, що в системі < br> «мох-розчин металу» досить швидко встановлюється рівноважний стан (ріс.2.3, 2.4.). Так, вже через півгодини сорбується 91% іонів міді і 72% кадмію. Також по виду кривої 2.3. можна говорити про присутність у моху двох активних центрів зв'язування іонів металу, про це свідчать дві точки перегину на кривій, тобто основний внесок у сорбцію вносить іонообмінна сорбція, а не фізична, тому що у випадку фізичної сорбції точок перегину не було б. p>
Результати вивчення сорбції металів мікроорганізмами (2.1.5.) зведені в таблицю 2.3. і подані у вигляді ізотерм сорбції металів на ріс.2.5.і 2.6 .. p>
Таблиця 2.3 p>
Дані по сорбції металів мікроорганізмами p>
| Навіски | Початкова | Обсяг | Обсяг ЕДТА | Рівноважна | Кількість | Кількість |
| а моху, | концентрації | малих аліквотах | 0,05 моль/л | концентрація | сорбували | сорбували |
| г | ия солі |, мл | який пішов на | солі | ного | ного |
| | Металу, | | титрування, | металу, | металу, | металу |
| | Моль/л | | мл | моль/л | мг-екв/мл | мг-екв/см3 |
| | | | | | | |
| | | | | | | Щільно |
| | | | | | | Упакований |
| | | | | | | Х клітин |
| Ацетат кадмію, Cd (CH3COO) 2 |
| 0,1945 | 0,1 | 10 | 9,98 | 0,09979 | 0,11 | 8,0046 |
| 0,2230 | 0,1 | 10 | 9,99 | 0,09986 | 0,08 | 5,6172 |
| 0,1981 | 0,02 | 10 | 3,96 | 0,01979 | 0,11 | 7,5130 |
| 0,2054 | 0,02 | 10 | 3,97 | 0,01986 | 0,07 | 4,9151 |
| 0,1980 | 0,005 | 25 | 2,38 | 0,00476 | 0,12 | 8,4258 |
| 0,1996 | 0,005 | 25 | 2,40 | 0,00480 | 0,10 | 7,0215 | p>
Продовження таблиці 2.3
| Сульфат міді, CuSO4 |
| 0,2032 | 0,1 | 10 | 9,93 | 0,09933 | 0,33 | 23,1711 |
| 0,1975 | 0,1 | 10 | 9,94 | 0,09941 | 0,29 | 20,3625 |
| 0,1987 | 0,02 | 10 | 3,89 | 0,01947 | 0,27 | 18,6071 |
| 0,2005 | 0,02 | 10 | 3,90 | 0,01948 | 0,26 | 18,2560 |
| 0,2400 | 0,005 | 25 | 2,24 | 0,00449 | 0,25 | 17,6943 |
| 0,2265 | 0,005 | 25 | 2,26 | 0,00451 | 0,24 | 16,8517 | p>
Ріс.2.5. P>
Рис. 2.6. P>
Грунтуючись на результатах експерименту можна говорити про те, що досліджуваний штам мікроорганізмів Pseudomonas aeruginosa В7 володіє сорбційні властивості по відношенню до важких металів. Так, по відношенню до кадмію в результаті досліджень (п.2.1.5) сорбційна ємність мікроорганізмів - 0,114 мг-екв/мл суспензії, по міді - 0,29 мг-екв/мл суспензії. P>
Проте варто відзначити, що в даний час існують більш ефективні форми мікроорганізмів, які використовуються для біосорбції металів з розчинів, у тому числі і штами даного роду.
Із досліджених важких металів краще сорбується мохом і мікроорганізмами мідь (Cu), ніж кадмій (Cd) (див. ріс.2.5 і 2.6.)
Можна зробити припущення про те, що це пов'язано в першу чергу з тим, що в невеликих кількостях мідь є одним з найважливіших біогенних елементів, необхідних для розвитку мікроорганізмів і поряд з сорбції має місце утилізація мікроорганізмами іонів міді. p>
Результати вивчення кінетики сорбції мікроорганізмами іонів металів зведені в таблицю 2.4. і подані у вигляді кінетичних кривих. p>
Таблиця 2.4 p>
Дані щодо кінетики сорбції металів мікроорганізмами
| Час | Навіски | Початкова | Обсяг | Обсяг ЕДТА | Рівноважна | Кількість | Кількість |
|, Хв | а моху, | концентр | алікво | 0,05 | я | сорбували | сорбованої |
| | Г | ація | ти, мл | моль/л | концентрації | ного | металу |
| | | Солі | | який пішов | ия солі | металу, | мг-екв/см3 |
| | | Металу, | | на | металу, | мг-екв/мл | щільно |
| | | Моль/л | | титрування | моль/л | | упакованих |
| | | | |, Мл | | | клітин |
| Ацетат кадмію, Cd (CH3COO) 2 |
| 5 | 0,1874 | 0,02 | 10 | 4,00 | 0,01999 | 0,01 | 0,3511 |
| 10 | 0,1755 | 0,02 | 10 | 3,98 | 0,01990 | 0,05 | 3,3703 |
| 20 | 0,2100 | 0,02 | 10 | 3,98 | 0,01988 | 0,06 | 4,3534 |
| 30 | 0,1990 | 0,02 | 10 | 3,97 | 0,01985 | 0,07 | 5,1257 |
| 60 | 0,1980 | 0,02 | 10 | 3,96 | 0,01982 | 0,09 | 6,2492 |
| 120 | 0,1996 | 0,02 | 10 | 3,96 | 0,01981 | 0,10 | 6,7407 |
| Сульфат міді, CuSO4 |
| 5 | 0,1955 | 0,02 | 10 | 3,97 | 0,01985 | 0,07 | 5,1959 |
| 10 | 0,2230 | 0,02 | 10 | 3,96 | 0,01978 | 0,11 | 7,5833 |
| 20 | 0,1906 | 0,02 | 10 | 3,94 | 0,01971 | 0,15 | 10,2515 |
| 30 | 0,2054 | 0,02 | 10 | 3,93 | 0,01964 | 0,18 | 12,4281 |
| 60 | 0,1980 | 0,02 | 10 | 3,90 | 0,01949 | 0,26 | 17,9751 |
| 120 | 0,1996 | 0,02 | 10 | 3,90 | 0,01949 | 0,26 | 17,9751 | p>
p>
Рис. 2.7. P>
p>
Ріс.2.8. P>
По виду кінетичних кривих сорбції можна говорити, що основний внесок у сорбцію іонів металів мікроорганізмами вносить фізична сорбція, щоб говорити про іонообмінної сорбції необхідні додаткові дослідження. Рівноважний стан встановлюється протягом години. Також можна сказати, що сорбція міді йде швидше. P>
Отримані результати в експериментах з вивчення сорбції металів у системі мох-суспензія мікроорганізмів (п.2.1.6.) Зведені в таблицю
2.5. і подані у вигляді ізотерм сорбції на рис. 2.9.і 2.10 .. p>
Таблиця 2.5 p>
Дані по сорбції металів у системі мох-су?? пенза мікроорганізмів p>
| Навішування | Початкова | Обсяг | Обсяг ЕДТА 0,05 | Рівноважна | Кількість |
| моху, г | концентрації | малих аліквотах | моль/л який пішов | концентрація | сорбованої |
| | Ия солі |, мл | на титрування, | солі металу, | го металу, |
| | Металу, | | мл | моль/л | мг-екв/г |
| | Моль/л | | | | |
| Ацетат кадмію, Cd (CH3COO) |
| 0,2156 | 0,1 | 10 | 9,84 | 0,09842 | 0,80 |
| 0,2643 | 0,1 | 10 | 9,85 | 0,09850 | 0,76 |
| 0,1986 | 0,02 | 10 | 3,69 | 0,01846 | 0,77 |
| 0,1921 | 0,02 | 10 | 3,70 | 0,01850 | 0,75 |
| 0,1896 | 0,005 | 25 | 1,73 | 0,00346 | 0,77 |
| 0,1955 | 0,005 | 25 | 1,71 | 0,00342 | 0,79 |
| Сульфат міді, CuSO4 |
| 0,2000 | 0,1 | 10 | 9,80 | 0,09805 | 0,97 |
| 0,1955 | 0,1 | 10 | 9,81 | 0,09811 | 0,94 |
| 0,1970 | 0,02 | 10 | 3,63 | 0,01816 | 0,92 |
| 0,1979 | 0,02 | 10 | 3,64 | 0,01819 | 0,90 |
| 0,2053 | 0,005 | 25 | 1,62 | 0,00323 | 0,88 |
| 0,1990 | 0,005 | 25 | 1,61 | 0,00322 | 0,89 | p>
p>
Рис. 2.9 p>
Ріс.2.10. P>
За результатами цього експерименту можна зробити висновок, що спільне використання моху і мікроорганізмів значно підвищує ефективність біосорбції і покращує поглинання важких металів з розчинів цих металів. Так, якщо мохом сорбується 0,655 мг-екв (кадмію)/г, то при спільному використанні моху і мікроорганізмів- p>
0,777 мг-екв/г і мл. Таким чином, ефективність сорбції збільшується на 16%. При аналогічному порівнюванні результатів по сорбції іонів міді ефективність збільшується на 26%. P>
Експериментальні дані з вивчення кінетики сорбції металів мікроорганізмами, адсорбованими на моху зведені в таблицю 2.6. і подані у вигляді кінетичних залежностей концентрації металу від часу на рис. 2.11. та 2.12 .. p>
Таблиця 2.6. p>
Дані щодо кінетики сорбції металу в системі мох-суспензія мікроорганізмів
| Час | Навішування | Початкова | Обсяг | Обсяг ЕДТА 0,05 | Рівноважна | Кількість |
|, Хв | моху, г | концентрації | малих аліквотах | моль/л який пішов | концентрація | сорбували |
| | | Ия солі | и, мл | на титрування, | солі металу, | ного |
| | | Металу, | | мл | моль/л | металу, |
| | | Моль/л | | | | мг-екв/г |
| Ацетат кадмію, Сd (CH3COO) 2 |
| 5 | 0,2251 | 0,02 | 10 | 3,95 | 0,01975 | 0,13 |
| 10 | 0,2643 | 0,02 | 10 | 3,95 | 0,01974 | 0,13 |
| 20 | 0,1986 | 0,02 | 10 | 3,93 | 0,01965 | 0,18 |
| 30 | 0,1921 | 0,02 | 10 | 3,93 | 0,01965 | 0,18 |
| 60 | 0,1896 | 0,02 | 10 | 3,69 | 0,01845 | 0,78 |
| 120 | 0,1955 | 0,02 | 10 | 3,69 | 0,01845 | 0,78 |
| Сульфат міді, CuSO4 |
| 5 | 0,2312 | 0,02 | 10 | 3,79 | 0,01897 | 0,52 |
| 10 | 0,2087 | 0,02 | 10 | 3,79 | 0,01897 | 0,52 |
| 20 | 0,1982 | 0,02 | 10 | 3,79 | 0,01895 | 0,52 |
| 30 | 0,19 | 0,02 | 10 | 3,75 | 0,01873 | 0,64 |
| 60 | 0,191 | 0,02 | 10 | 3,68 | 0,01841 | 0,79 |
| 120 | 0,24 | 0,02 | 10 | 3,67 | 0,01833 | 0,83 | p>
Ріс.2.11. P>
Ріс.2.12. p>
За результатами експерименту можна зробити наступні висновки: в системі швидко настає рівноважний стан, то вже через 60 хвилин сорбується 95% іонів міді, і 97% іонів кадмію; наявність на кінетичних кривих двох точок перегину свідчить про наявність у моху двох активних центрів зв'язування та значущості іонообмінної сорбції в сумарному процесі. p>
Результати експерименту з отримання кривих виживаності мікроорганізмів Pseudomonas aeruginosa (2.1.9.) представлені на рис.
2.13. та 2.14 .. p>
p>
Рис. 2.13. P>
Ріс.2.14. P>
Результати даного експерименту повністю відповідають літературним відомостями про виживаності мікроорганізмів при дії на них іонів важких металів [5,7]. Зіставляючи результати цього експерименту і експерименту з вивчення сорбції металів мікроорганізмами (пп.2.1.5. І 2.1.6.) Можна говорити про те, що сорбція ведеться і мертвою культурою, що підтверджує фізичний характер сорбції при використанні мікроорганізмів. P> < p> Результати вивчення адсорбції мікроорганізмів мохом (п.2.1.10.) зведені в Таблиця 2.7 .. p>
Таблиця 2.7 p>
| Концентрація | Оптична | Оптична | Концентрація | Фактична |
| мікробної | щільність (D) | щільність (D) | мікробної | концентрація, |
| суспензії після | розведеної | суспензії після | суспензії після | певна |
| розведення її | суспензії до | проведення | проведення | шляхом висіву |
| до 50мл, кл/мл | досвіду | досвіду | експерименту, | на |
| | | | Кл/мл | агарізованную |
| | | | (Ріс.2.15.) | Середу, кл/мл |
| 6,8 * 107 | 0,092 | 0,073 | 5,07 * 107 | 4,5 * 107 |
| 6,8 * 107 | 0,092 | 0,069 | 5,07 * 107 | 5 * 107 |
| 6,8 * 107 | 0,092 | 0,071 | 5,07 * 107 | 4 * 107 | p>
Згідно з результатами цього експерименту можна говорити про те, що мох згубно впливає на мікроорганізми так, в результаті досліджень (п .2.1.10) концентрація мікроорганізмів знизилася з
6,8 * 107 до 5,07 * 107 кл/мл. Дані властивості моху можуть надалі знайти застосування в медицині, при використанні моху як ентеросорбенту. P>
Концентрація мікробної суспензії, кл/мл * 109 p>
Рис. 2.15. P>
Можна зробити наступні висновки за підсумками досліджень: p>
1) Лишайник є хорошим природним іонообмінників і має гарні сорбційні властивості по відношенню до важких металів, це досягається наявністю у структурі моху таких речовин як поліуроніди
(полісахариди, що містять карбоксильної групи в 6-пложеніі піранового або ангідроглюкозного циклу) і пектину. Іонообмінна ємність моху по міді 0,7 мг-екв/г, за кадмію 0,65 мг-екв/м.
2) Лишайник робить згубний вплив на мікроорганізми.
3) Досліджуваний штам мікроорганізмів Pseudomonas aeruginosa В7 володіє сорбційні властивості по відношенню до важких металів. Так, по відношенню до кадмію в результаті досліджень (п.2.1.5) сорбційна ємність мікроорганізмів - 0,114 мг-екв/мл суспензії, по міді - 0,29 мг-екв/мл суспензії.
4) По виду кінетичних кривих сорбції, згідно з сучасними уявленнями про механізм процесу сорбції можна зробити висновок, що в досліджених гетерогенних системах досить швидко встановлюється рівноважний стан.
5) Спільне використання моху і мікроорганізмів значно підвищує ефективність біосорбції і покращує поглинання важких металів з розчинів цих металів. P>
2.3. Статистична обробка p>
2.3.1. Розрахунок статистичної похибки визначення сорбції мікроорганізмів мохом p>
n: = 3 i: = 1 .. n p>
X1: = 0.073 X2: = 0.069 X3: = 0.071-об'єм розчину ЕДТА який пішов на титрування; p>
X: = 0.071 - середнє значення; p>
S: = 0.0006 p>
t: = 3.14 p>
D: = 0.0015 p>
Z: = 0.103 p>
2.3.2. Розрахунок статистичної похибки визначення концентрації металів шляхом титрування p>
Розрахуємо помилку в досвіді з вивчення сорбції міді мохом p>
(п.2.1.3) для початкової концентрації 0,1 моль/л (табл. 2.1): p>
n: = 3 i: = 1 .. n p>
X1: = 9.85 X2: = 9.86 X3: 9.84 - об'єм розчину ЕДТА який пішов на титрування; p >
X: = 9.85-середнє значення; p>
S: = 0.0007 p>
D: = 0.002 p>
Z: = 0.109 p> < p >----------------------- p>
p>