Розрахунки в хроматографії докладно

1. Вільний об'єм колонки (обсяг рухомої фази).

Вільним обсягом (Vm) хроматографічне колонки вважається обсяг рухомої фази між верхньою та нижньою межами набивання. Експериментально прийнято визначати вільний обсяг, як загальний утримуваний обсяг такого компонента, який практично не утримується на сорбенті. Проте не слід забувати, що з отриманого результату слід відняти обсяги, які не заповнені сорбентом. Це, перш за все, обсяги сполучних трубок і реєструє датчика. Не всі пам'ятають про те, що з отриманої експериментальної величини Vm слід ще відняти половину що вводиться об'єму проби! Таким чином, вільний обсяг колонки дорівнює        

Vm = Vmro - Vo - Vin/2,         

(1)     

де

Vmro - утримується загальний обсяг не утримується компонента суміші;

Vo - обсяг, не зайнятий сорбентом;

Vin - обсяг введеної проби.

2. Обсяг проби.

Обсяг проби є третім за значенням параметром, що впливає на ширину хроматографічних піків. Першими, без сумніву, є утримуваний обсяг і число теоретичних тарілок. Проба впливає на ширину піку не тільки своїм розміром, але і виглядом свого концентраційного профілю. Досвід показує, що залежно від конструкції пристрої введення проби, проба зазнає змін до того, як вона досягне сорбенту. Зміни полягають у те, що концентрація речовини в різних місцях буде неоднакова, тобто концентраційний профіль може істотно відрізнятися від прямокутної форми. Швидше за все, профіль може мати вигляд кривої Гаусса.

Розглянемо на прикладі цих 2-х випадків внесок проби в ширину хроматографічного піку. Для прямокутного концентраційного профілю внесок обсягу проби виражається такою формулою: