Підвищення ефективності використання гідроїди при
біотестування: вибір виду, сезону, температурного режиму
Карлсен А. Г., Марфенін Н. Н.
Серед
різних видів гідроїди чутливість до підвищеного вмісту в морській
воді іонів цинку в багато разів розрізняється. За допомогою реєстрації частки
розсмоктатися за 1-2 доби гідрантів у ObeUa loveni можна без застосування дорогого
обладнання навіть в польових умовах встановити наявність у воді токсичних
домішок (іонів цинку в концентрації 0,5 мг/л і вище). Чутливість методу
може бути підвищена, якщо використовувати матеріал у період початку активного росту
колоній після зимової діапаузи.
В
Останнім часом була експериментально доведено високу чутливість
гідроїди до різних токсичних речовин, що додаються до морської води (Karbe,
1972; Stebbing, 1980a, 1981), що ставить їх в ряд перспективних об'єктів для
біотестування (Stebbing, 1980b). Тому виникла необхідність виявити серед
гідроїди види, найбільш чутливі до токсикантів, і умови, за яких
зазначена чутливість виявляється в найбільшій мірі.
Робота
в цьому напрямку вже була розпочата нами раніше (Карлсен, Марфенін, 1987). На
трьох видах гідроїди роду Obelia-О. loveni (Allm., 1859) О. flexuosa (Hincks,
1861), 0. geniculata (L., 1758), взятих з моря в серпні, було випробувано в
лабораторних умовах дію різних концентрацій іонів цинку і міді в
морській воді. Ефект токсичного впливу реєстрували за часткою
дедіфференціровавшіхся гідрантів через 1-2 доби, зіставляючи їх у
експериментальних і контрольних колоніях. Тоді було встановлено, що,
по-перше, серед обілив найбільш чутливий до тосікантам вид О. loveni. а
по-друге, чутливість його до токсичного впливу підвищується при
зростанні температури (від 14 до 18 °).
В
цьому дослідженні ми продовжили вивчення порівняльної чутливості
різних видів гідроїди до іонів цинку, випробувавши його вплив на більш
примітивних гідроїди Clava multicornis (Forskal, 1775) і Coryne tubulosa (M.
Sars, 1835), що відносяться до підряду Athecata.
Крім
того, ми перевірили реакцію на тривалий вплив (до 22 діб) різних
концентрацій іонів цинку трьох видів обілив: О. longissima (Pallas, 1766), 0.
loveni, 0. flexuosa, а також більш високоорганізованого гідроїди Dynamena
pumila (L., 1758) з сімейства Sertulariidae того ж підряду Thecaphora.
Нарешті,
для О. loveni проведено порівняння реакції гідроїди на стандартні випробовувані
нами концентрації іонів цинку в різний час вегетаційного сезону-на його початку
(квітень), і в кінці (серпень).
Отримані
результати дозволяють зробити попередні висновки про характер варіацій у
чутливості гідроїди до токсикантів, що допоможе, як ми сподіваємося,
уникнути необгрунтованих екстраполяції і уточнити підхід до вибору об'єктів для
біотестування.
Матеріал і методи
Основні
методи описані в попередніх публікаціях. Культивування гідроїди в лабораторних
умовах здійснювали за спеціально розробленим методом (Бурикін з співавт.,
1984). Зростання гідроїди враховували періодично, підраховуючи кількість наявних в
колонії гідрантів. Метод визначення дії іонів цинку на процес
дедіфференціровкі гідрантів зводився до порівняння відносної кількості
дедіфференціровавшіхся гідрантів в досвіді і контролі (Карлсен, Аристархов, 1986;
Карлсен, Марфенін, 1987). Відносна кількість дедіфференціровавшіхся
гідрантів визначали як відношення їх числа до загального числа гідрантів в колонії
до моменту спостереження (у відсотках). Загальна кількість гідрантів в кожному досвіді
було не менше 30 і, як правило, перевищувала 100. Найбільші вибірки (200 - 400
гідрантів) були в дослідах, в яких визначали дію мінімальних концентрацій
токсикантів. У цих же статтях описаний спосіб приготування робочих розчинів,
містили іони цинку в підвищеній концентрації. При короткочасних
спостереженнях (близько 2 діб) розчини не міняли, гідроїди знаходилися в чашках
Петрі в термостаті. При хронічних експериментах розчини міняли 1 раз на 2
на добу. Термін обраний на підставі даних, що показують, що через 2 діб 20%, а
через 6 діб 80% іонів ртуті "зникає" з розчину (Baier et al., 1975).
Спеціальні дослідження поведінки іонів цинку в розчині не проводили.
Статистичну
обробку результатів проводили за критерієм Стиодента (Лакіна, 1980).
Матеріал
збирали в різні місяці: у березні, квітні, травні та серпні протягом 1984 і 1985
рр.. На Еремеевском порозі Великої Салмині Білого моря. Роботу проводили на
Біломорської біостанції МГУ (сел. Приморський).
Результати
1.
Дія іонів цинку на гідроїди Clava multicornis (Forskal, 1776) і Coryne
tubulosa (M. Sars, 1835) (підряд Athecata). Представники підряду Athecata
виявилися менш чутливими до дії іонів цинку, ніж досліджені нами
обілив з підряду Thecaphora. Так, гідроїди Clava multicornis, принесений з
моря в серпні після статевого розмноження, зберігав життєздатність у
розчинах, що містили іони цинку в концентраціях 10,0, 5,0 і 2,5 мг/л у
протягом 39 год (до кінця експерименту).
Колонії
Coryne tubulosa, принесені з моря в березні і поступово адаптовані до
теплої (18 °) воді, спостерігали протягом 20 діб. Колонії в контрольних умовах
швидко зростали, збільшувалася кількість гідрантів. Практично так само добре ріс
гідроїди в розчині з концентрацією іонів цинку 1,0 мг/л. При 2,5 мг/л колонії
не гинули, але їхній ріст не супроводжувався помітним збільшенням числа гідрантів,
тобто кількість утворилися нових і старих дедіфференціровавшіхся гідрантів
було приблизно однаковим (рісунок. А). При 3,0 мг/л всі колонії гинули
не пізніше, ніж через 2 доби.
Кількість
гідрантів у колоніях, які зростали в умовах підвищених концентрацій іонів
цинку; А - Coryne tubulosa, Б-Obelia flexuosa, В-Obelia geniculata Г-Obelia
loveni, /-контроль; концентрація іонів цинку 2,5 мг/л (2), 1,0 (3), 0,5 (4),
0,25 мг/л (5)
2.
В підручнику зростання гідроїди роду ObeUa (підряд Thecaphora) в присутності
підвищених концентрацій іонів цинку. Якщо колонії, витягнуті з моря на початку
березня, коли вони перебувають у стані гіпобіоза, заздалегідь адаптувати до
теплої (18 °) воді протягом 6 діб, то всі вони починають бурхливо рости. У
контрольних умовах це зростання зберігається протягом усього експерименту
(15-22 діб).
В
присутності іонів цинку в концентрації 1,0 мг/л всі три види гідроїди ростуть
гірше, ніж у контрольних умовах, і через 10-12 добу гинуть (малюнок, б-р).
При концентрації 2 мг/л гідроїди гинуть через 2 доби. При концентрації 0,5
мг/л Obelia flexuosa і Obelia longissimа ростуть практично так само, як у
контролі (малюнок, Б, 5), а О. loveni росте гірше (малюнок, Г), хоча протягом
всього експерименту не гине. При концентрації 0,25 мг/л і О. loveni зростає так
ж, як у контролі.
Якщо
експеримент проводити з колоніями, не адаптованими попередньо до тепла,
то при концентраціях 1,0 мг/л вони виходять в теплій (18 °) воді з
гіпобіотичним стану (т. е, у них з'являються гідранти), але далі
практично, не ростуть, хоча і зберігають життєздатність протягом всього
експерименту (20 діб).
3.
Дія підвищених концентрацій іонів цинку на гідроїди Dynamena pumila (підряд
Thecaphora). Зростання колоній D. pumila в експерименті був нестійкий, тому
вдалося встановити тільки летальні концентрації іонів цинку, які виявилися
вище, ніж у обілити.
Тривалі
спостереження за станом гідроїди показали, що якщо його в березні одразу
помістити в розчин з іонами цинку в період адаптації до теплій воді, то він
гине протягом 2-3 днів в розчині 3,0 і 2,5 мг/л і через 20 днів при
концентрації 1 мг/л. Якщо ж гідроїди попередньо протягом 6 діб
адаптувати до теплій воді і тільки після цього го помістити в експериментальні
умови, то він, принаймні протягом 18 діб, зберігає життєздатність
при концентрації іонів цинку 2,5 мг/л.
Таблиця
1
Частка
дедіфференціровавшнхся гідрантів (%) у Obelia loveni при 18 ° в різні періоди
вегетації в матеріалі з моря (*) і в лабораторній культурі (**) після
збільшення концентрації іонів цинку
Примітка.
Різниця в 19% і більш вірогідно з вірогідністю 95-99,9%. Менші відмінності
кедосто вірні,
4.
Особливості реєстрації токсичного ефекту на гідроїди залежно від
періоду їх вегетації. На найбільш чутливому до дії іонів цинку гідроїди
О. loveni ми порівняли реакцію його гідрантів на підвищені концентрації іонів
цинку ранньою весною (квітень) та в кінці літа (серпень), а також у березні
(лабораторна культура). Ми розраховували з'ясувати, однакові чи що викликають
токсичний ефект порогові концентрації іонів цинку на початку і в кінці сезону
вегетації.
Як
вже зазначалося вище, ранньою весною колонії О. loveni в морі ще не ростуть і
бувають без гідрантів. Перенесення їх в акваріум з більш теплою водою (у даному
випадку 17-18 °) стимулює утворення гідрантів і початок росту пагонів і
столонів. На цьому тлі переходу з одного морфофункціонального стану в
інше (Марфенін, 1980) було проведено випробування токсичного впливу цинку
в одній серії дослідів (табл. 1, квітень). В іншій серії досліди були здійснені
не відразу після перенесення матеріалу з моря в значно відрізняються за
температурі акваріумні умови, а лише через 1-2 тижні, т. з. після
того, як пройшла адаптація гідроїди і культура стала лабораторної (табл. 1,
березень).
В
серпні матеріал для дослідів брали иа моря. Різниця по температурі при перенесенні
гідроїди в лабораторію було всього в декілька градусів (від 14 до
18 °). Результати досліджень, проведених за єдиною методикою урахування частки розсмоктатися
гідрантів у взятих для експерименту пагонах О. loveni, показали, що при
концентрації цинку, що дорівнює 2,0 мг/л, і температурі 18 ° через 18-22 год все
гідранти в піддослідних пагонів дедіфференціруются у всіх случаях.Прі
концентрації іонів цинку, що дорівнює 1,0 мг/л, частка дедіфференціровавшіхся гідрантів
через 18-22 год була вище в серпні, а навесні була вище в лабораторній культурі
(табл. 1). Однак через 43-46 год у весняних дослідах частка розсмоктатися гідрантів
стала вище в матеріалі, взятому безпосередньо з моря. Це означає, що через
2 добу при даній температурі і при даній концентрації іонів цинку реакція
гідроїди у всіх випадках приблизно однакова.
При
меншій концентрації іонів цинку (0,5 мг/л) токсичний ефект через 18-22 год
проявився у весняному матеріалі, взятому з моря (квітень), і в серпневому
матеріалі. У лабораторній культурі навесні частка дедіфференціровавшіхся гідрантів
в цей час від контролю достовірно не відрізнялася. Однак через 2 доби
токсичну дію іонів цинку проявилося і в лабораторній культурі, хоча
частка розсмоктатися гідрантів залишалася все ж таки більш низькою, ніж у матеріалі з
моря.
Таблиця
2
Залежність
частки дедіфференціровавшіхся гідрантів (%) у гідроїди Obelia loveni, взятому з
моря від температури, концентрації іонів цинку в морській воді і
тривалості досвіду
*
Відмінності ог контролю з імовірністю 95%. ** Те саме, Р = 99,0%.
Примітка.
Досліди при температурі 18 і 22 ° були поставлені в травні. а при 14,5 ° в серпні.
Дані
по дедіфференціровке гідрантів в експерименті можуть мати значення для оцінки
токсичного ефекту лише при зіставленні з контрольними значеннями, які
сильно різнилися в перерахованих трьох серіях опитов.Менее всього
дедіфференціровка гідрантів у контролі була виражена в матеріалі, взятому навесні
з моря, напередодні перед досвідом, сильніше в лабораторній культурі і ще більше
частка дедіфференціровавшіхся гідрантів у контролі була в серпневому
матеріале.Чем інтенсивніше йде дедіфференціровка гідрантів у контролі, тим
складніше використовувати матеріал для біотестування. Так, наприклад, за абсолютними
значенням дедіфференціровавшіхся гідрантів в дослідах з дією іонів цинку
було найбільше в серпні, але і дедіфференціровка у контролі була в цей час
найбільшою. Тому не можна стверджувати, що в серпні гідроїди більше
чутливі до токсичного впливу іонів цинку. Швидше ми приходимо до
зворотного висновку, що саме навесні, незабаром після переходу колоній в період
активного зростання завдяки відносно слабкою дедіфференціровке у контролі
можлива більш чутлива індикація порогових значень токсичних домішок.
5.
Роль температурного режиму в підвищення чутливості методу. Підвищення
температури до деяких меж приводить до прискорення ряду фізіологічних
процесів, в тому числі у гідроїди: до прискорення зростання колонії (Kinne,
Paffenhofer, 1966; Tusov, Davis, 1971; Бурикін, 1980), інтенсивності
дедіфференціровкі (Crowell, 1953) і формування (Crowell, 1957) гідрантів,
зменшення періоду ростових пульсацій (Wyttenbach, 1974) і т. д. Тому ми
спробували підвищити чутливість методу за допомогою реєстрації токсичного
ефекту при найбільш високій температурі, близької до верхньої температурної
кордоні існування цих гідроїди (табл. 2).
В
травні колонії О. loveni, що перебувають у стані переходу з зимового гіпобіоза до
активного росту, ми переносили в лабораторію і містили при температурі 22,0 °.
Поріг чутливості до цинку опинився в цьому випадку не вище 0,25 мг/л. При
18 ° (паралельний експеримент) і при 14,5 ° (серпень) пороги чутливості
гідроїди до іонів цинку опинилися близько 0,5 і 1,0 мг/л відповідно (табл.
2). Тому збільшення температури можна розглядати як один із шляхів
підвищення чутливості методу.
Обговорення результатів
Вперше
досить висока чутливість гідроїди до цинку була виявлена Карбо
(Karbe, 1972). Він провів експериментальні дослідження гідроїди Eirene
viridula Eschscholtz, 1829, що відноситься до сем. Campanulinidae, підряд
Thecaphora, і встановив, що поліпи чутливі до іонів цинку при
концентрації 1,5-3,0 мг/л.Вслед за Карбо англійський дослідник Стеббінг
(Stebbing, 1976, 1979, 1980b; Stebbing, Santiago-Fandino, 1983) докладно
зайнявся можливістю використання гідроїди як тестоб'ектов. Використовуючи
гідроїди Obelia flexuosa (Hincks, 1861) з сем. Campanulariidae, підряд
Thecaphora, він показав, що колонії цього гідроїди гинуть при вмісті в
морській воді міді в концентрації близько 0,05 мг/л, а кадмію-0, 5 мг/л. Намагаючись
виявити токсичну дію важких металів на організм гідроїди задовго
до їх загибелі, Стеббінг став використовувати різні морфологічні і
фізіологічні показники, наприклад частоту освіти гонозооідов
(спеціалізованих статевих зооідов), швидкість росту тіла колонії, число
зооідов в експериментальних колоніях по відношенню до контролю. Таким способом
Стеббінгу вдалося достовірно зареєструвати ефект стимуляції росту колонії і
частоти освіти гонозооідов при дуже малих концентраціях токсикантів (0,1
мкг/л міді і 0,05 мг/л кадмію) (Stebbing, 1980a, 1981). Цей ефект, відомий
раніше за назвою закону АрндтаШульца, а потім "хормезіса", був описаний
неодноразово для різних об'єктів (Stebbing, 1982). Для нас важливо, що Стеббінг
детально вивчив його прояв і по можливості механізм у гідроїди з метою
практичного використання цього ефекту для біотестування (Stebbing et al.,
1983).
Роздільна
здатність методу дуже велика. Проте у нього є принаймні дві
недоліку. Перш за все, "хормезіс" проявляється в досить вузьких рамках
концентрацій токсикантів. Якщо концентрація міді у воді вже 1,0 мкг/л і вище, то
виявити це зі збільшення частоти освіти гонозооідов або за
пропонованого Стеббінгом показником швидкості росту колонії вже не можна аж до
таких концентрацій токсикантів. які близькі до летальним.Второй недолік
полягає в необхідності вирощування колонії більше тижня (за Стеббінгу-11
на добу) у досліджуваній воді, перш ніж можна отримати результати для подальшого
аналізу (Stebbing, Santiago-Fandino, 1983). Отже, для
експрессіндікаціі запропонована Стеббінгом методика малопрігодна.Іспользуемий
нами метод не володіє такою високою роздільною здатністю. Так, для
порівняння, за дедіфференціровке гідрантів у Obelia loveni можна
зареєструвати через добу токсичний вплив міді при її концентрації
10 мкг/л і вище (Карлсен, Марфенін, 1987). Однак і така чутливість
гідроїди виявляється все-таки істотно вище, ніж у інших тестоб'ектов
(Патина, 1982), а найголовніше-який використовується нами метод досить простий, легко
здійснимо як в лабораторних, так і в польових умовах, що не вимагає великих
витрат, времяемкіх вимірювань і дозволяє отримати результати вже через 1-2 діб.
Метод
заснований на реєстрації дедіфференціровкі гідрантів в експерименті та контролі.
Розсмоктування гідрантів і частин колонії-характерне явище у гідроїди. Воно
було виявлено на початку нашого століття (Thatcher, 1903; Huxley, DeBeer, 1923) і
спочатку вважалося результатом реакції колонії на несприятливі умови
існування, зокрема впливу ядов.Хакслі і Де Вир на гістологічних
препаратах детально досліджували весь процес розсмоктування гідрантів у О.
geniculata і порівняли його з диференціюванням у зворотній
послідовності-коротшають щупальця, змикається гіпостом, утоньшается і
робиться коротше тіло гідранта, стаючи схожим на зачаток у момент початку
диференціювання гідранта. Виходячи з цих особливостей процесу, вони назвали його
"Дедіфференціровкой". Вони ж встановили, що матеріал дедіфференціровавшіхся
гідрантів надходить всередину колонії і використовується нею.
Після
того як колонії гідроїди навчилися містити в лабораторних умовах (Fulton,
1960), вирощуючи їх на склі, Кровеллом (Crowell, 1953) було виявлено, що
у кампануляріід дедіфференціровка гідрантів-регулярний процес, пов'язаний з їх
(гідрантів) коротким життєвим циклом. На місці дедіфференціровавшіхся
гідрантів через короткий час при сприятливих умовах утворюються нові гідранти,
які, так само як і що передували їм, приблизно через тиждень "старіють" і
розсмоктуються.
Всі
це допомагає краще представити можливості підвищення ефективності
використання нашого методу для біотестування. Намагаючись збільшити "роздільну
здатність "пропонованого методу, ми повинні діяти одночасно в двох
напрямках-шукати способи підвищення чутливості гідрантів до токсикантів
і в той же час намагатися зменшити швидкість розсмоктування їх у контроле.Что
стосується чутливості об'єкта до токсикантів, то преждевсего слід виявити
найбільш сприйнятливі до них види гідроїди .. Раніше (Карлсен, Марфенін, 1987)
ми вже встановили, що з трьох видів роду Obelia найбільш вдалий для
біотсстірованія - О. lovеni.Іспитаніе ще чотирьох видів гідроїди з різних
родин, результати якого наведені в цій статті, показало, що вони
менш чутливі до токсичного дії іонів цинку в порівнянні з О.
loveni. Отже, підтверджено сам факт різної сприйнятливості гідроїди
до токсікаптам, і подальший пошук найбільш чутливих видів має сенс і
повинен бути продолжен.Можно очікувати, що ступінь впливу токсикантів на колонії
розрізняється на різних етапах їх життєвого циклу. Дійсно, в житті
колонії є періоди, протягом яких токсичний ефект, ймовірно, важко
було б встановити. Це, наприклад, гіпобіотичним стан під час зимової
діапаузи або ж період депресії після розмноження (Марфенін, 1980). З іншого
боку, були підстави припускати, що перехід з гіпобіотичним стану
до активного росту колонії або ж період підготовки колонії до зимової діапауза
більш чутливі до токсичного впливу.
Ми
не проводили систематичного вивчення цього питання, а обмежилися порівнянням
дії цинку на двох етапах життєвого циклу колонії, перший з яких
відповідає переходу з гіпобіотичним до активного станом ранньою весною,
а друга-зростанню після розмноження в кінці літа. Можна вважати, що різниця у
ступеня прояву токсичного ефекту підтвердилося, однак це сталося на
тлі ще більш значних відмінностей у контролі. Це є гарним прикладом
того, що зменшення дедіфференціровкі гідрантів у контролі-не менш важливий
шлях збільшення роздільної здатності методики. Ефективність методу можна
також підвищити, працюючи при більш високих температурах.
Якщо
ж підійти до проблеми підвищення ефективності використання гідроїди для
біотестіровапія з боку вдосконалення контролю, то і в цьому випадку, судячи
з отриманих нами результатів, можна сподіватися на вагомий успіх. Майже в 20
раз розрізнялася частка дедіфференціровавшіхся гідрантів у контролі через 20 год
після початку експерименту у колоній при переході з гіпобіотичним стану,
з одного боку, і літньому матеріалі-з іншого. При переході колоній до активного
росту після зимової діапаузи всі гідранти починають зростати одночасно і,
отже, повинні дедіфференціроваться також одночасно-приблизно
через 1 тиждень. Цим пояснюється таке низьке значення частки дедіфференціровавшіхся
гідрантів у контролі у квітневої серії через 20 ч. Досить було провести
експеримент на матеріалі, вже адаптованому до кімнатної температури, тобто
через 1-2 тижні після початку росту колоній, як частка дедіфференціровавшіхся
гідрантів в тих же умовах стала істотно вище.
Через
2 доби після початку експерименту дедіфференціровка гідрантів у контролі завжди
зростала. Це пов'язано з тим, що за умовами пропонованої методики пагони з
гідрантами не отримували їжі. Голодування прискорювало розсмоктування і одночасно
робило більш рідкої диференціювання нових гідрантів.
Таким
чином, в результаті проведених досліджень стало ясно, що для
біотестування краще всього використовувати колонії в період. переходу їх з
стану спокою в стан активного зростання. За дедіфференціровке гідрантів в
протягом 1 добу можна достовірно зареєструвати токсичний ефект малих
концентрацій іонів цинку у воді,. які, як показали довгострокові
експерименти, є сублетальлними навіть для випробовуваних видів гідроїди, а
тим більше для інших організмів.
Список літератури
Бурикін
Ю. Б. Регулююча роль деяких екологічних факторів у процесах росту і
інтеграції колоніальних гідроїди// Теоретичне і практичне значення
кишковопорожнинних. Л.: зін АН СРСР, 1980. С. 16.
Бурикін
Ю. Б., Марфенін Н. Н "Карлсен. А. Г. Досвід змісту мирського колоніального
гідроїди Dynamena pumiia (L.) і лабораторних умовах// Наук. докл, вища.
школи. Біол. науки. 1984. № 1. С. 102.
Карлсен.
А. Г., Аристархов В, М. Зміна постійним магнітним полем токсичного
дії розчинів хлориду цинку на колоніальних гідроїди Obelia loveni і
Obelia flехіоsа// Изв. АН СРСР. Сер. біол. 1986. № 2. С. 230-237.
К.арлсен
А. Г., Марфенін 11. Н. Дія підвищених концентрацій іонів цинку на
деяких гідроїди// Наук. докл. высш. школи. Біологічні науки, 1987, № 1,
с. 71-73
Лакіна
Г. Ф. Біометрія. М.: Висш. школа, 1980. С. 104, 271. Марфенін Н. Н. Основні
морфофункціональні стану колонії у гідроїди Dynamena pumiia (L.) в
природних умовах// Докл. АН СРСР. 1980. Т. 255. № 1.С. 253.
патини,
С. А. Особливості поширення та біологічної дії забруднюючих
речовин у Світовому Оксані// Людина і біосфера. М.: Іздво МГУ, 1982. Вип. 7.С. 62.
Baier R. W. Wojnowich G., Petrie L.
Mercury loss from culture media// Analyt. Chem. 1975. V. 45. P. 2464.
Crowell S. The regressionreplacement
cycle of hydranths of Obelia and Campanularia// Physiol. Zool. 1953. V. 26. № 4.
Р. 319.
Baier R. W., Wojnowich G., Petrie L.
Mercury loss from culture media// Analyt. Chem. 1975. V. 45. P. 2464.
Crowell S. The regressionreplacement
cycle of hydranths of Obelia and Campanularia// Physiol. Zool. 1953. V. 26. № 4.
Р. 319.
Crowell S. Differential responses of
growth zones to nutritive level, age, and temperature in the colonial hydroid
Campanularia// J. Expti Zool. 1957. V. 134. P. 63.
Fulton С. Culture of a colonial hydroid under
controlled conditions// Scicnce. 1960, V. 132. P. 473.
Huxley!. S. DeBeer G. R. Studies in
dedifferentiation. IV. Resorption and differential inhibition in Obelia and
Campanularia// J. Microscop. Sci. 1923. V. 67. P. 473.
K.arhe L. Marine Hydroiden als
Testorganismen zur Prufung der Toxizitat von Abwasserstoffen. Die wirkung von
Schwermetallen auf Kolonien von Eirene viridula// Marine Biol. 1972. В, 12. № 4. S. 316.
Kinne 0., Paffenhoger G. A. Growth
and reproduction as a function of temperature and salinity in Clava multicornis
(Cnidaria, Hydro2oa)// Helgolander wiss. Meeres. 1966.В. 13. № 1-2. S. 62. Stebbing A, R. D. The
effect of low metal levels on a clonal hydroid// J. mar. biol. Ass.U. K. 1976.
V. 56. P. 977.
Stebbing A. R. D. As experimental
approach to the determinants of biological water quality// Phi! os. Trans. Roy.
Soc. London. 1979. V. 286. P. 465.
Stebbing A. R. D. Increase in
gonozooid frequency and adaptive response to stress in Campanularia flexuosa .-
In: Developmental and cellular biology of coelenterates/'Eds Tardent P.,
Tardent R Amsterdam: Elsevier, 1980a. P. 27.
Stebbing A. R. D. The biological
measurement of water quality// Rapp. P.-v. ReunCons. int. Exolor. Mer. 1980b.
V. 179. P. 310.
Sfebbing A. R. D.
Hormesis-stimulation of colony growth in Campanularia flexuosa '(Hydrozoa) by
copper, cadmium and other toxicants// Aquatic Toxicol. 1981. V 1. P. 227.
Stebbing A. R. D. Hormesis-the
stimulation oi growth by low levels of inhibitors// Scitotal environment. 1982.
V. 22. P. 213.
Stebbing A. R. D., Cleary J. S
Brinsley M "Goodchild C., Santiago - Fandino V. Responses of a hydroid to
surface water samples from the river Tamar and Plymouth sound in relation to
metal concentration s/'/ J. mar. biol. Ass. U. K. 1983. V. 63. № 4. Р. 695.
Sfebbing A. R. D "Santiago-Fandino
V. G. R. The combined and separate effect of copper and cadmium on the growth
of Campanularia flexuosa (Hydrozoa) colonies// Aquatic Toxicol. 1983. V. 3. P.
183.
Thuicher H. F. Absorption of the
hydranth in hydroid polyps// Biol. Bull. 1903. V. 5. № 2. Р. 295.
Tusov J; Davis L. V. Influence of
environmental factors on the growth of Bougainvillia. sp.// Exptl Coelenterate
Biol./Eds Lenhoff H. M., Muscatine L., Davis L. V. Honolulu. 1971. P. 54.
Wyttenbach C. R. Cell movements
associated with terminal growth in colonial hydroids// Amer. Zool. 1974,
V. 14. № 2. Р. 699.
Щоб
підготовки даної роботи були використані матеріали з сайту http://soil.msu.ru/
