Методи визначення N-кінцевої амінокислоти

Березів Т.Т., Коровкин Б.Ф.

Для визначення природи N-кінцевої амінокислоти запропоновано ряд методів, зокрема метод Сенджер (F. Sanger), заснований на реакції арілірованія поліпептиду 2,4-дінітрофторбензолом (ДНФБ), що призводить до освіти пофарбованого в жовтий колір 2,4-дінітрофенільного похідного N-кінцевої амінокислоти. Розчин поліпептиду обробляють ДНФБ, який взаємодіє з вільною NH2-групою N-кінцевої амінокислоти пептиду.

Після кислотного гідролізу продукту реакції -- дінітрофенілпептіда тільки одна N-концевая амінокислота виявляється пов'язаної з реактивом у вигляді 2,4-дінітрофеніламінокіслоти (стабільною при гідролізі). У відміну від інших утворилися при гідролізі поліпептиду вільних амінокислот вона жовтого кольору. Її ідентифікують методом хроматографії.

-N Щоб визначити кінцевий амінокислоти значно більш широко застосовується фенілтіогідантоіновий метод Едмана завдяки своїй високої чутливості і можливості багаторазового використання в одній і тій же пробі. Фенілізотіоціанат реагує з вільною